生物安全实验室试题及答案

生物安全实验室试题及答案一、单项选择题（每题2分，共20分）1.在BSL-3实验室中，下列哪项操作必须在Ⅱ级生物安全柜内完成？A.离心含高浓度病原体的菌液B.对实验动物进行解剖C.打开含高致病性病毒的冻存管D.将废液倒入含消毒剂的收集桶答案：C解析：打开含高致病性病毒的冻存管时，极易产生气溶胶，必须在Ⅱ级生物安全柜内操作，以防止病原体暴露。离心、解剖、废液处理虽需防护，但未必强制在柜内完成。2.关于HEPA过滤器，下列说法正确的是：A.对0.5μm颗粒的过滤效率≥99.97%B.可重复使用，经高温灭菌后性能不变C.压差越大过滤效率越高D.更换前无需消毒，直接拆除即可答案：A解析：HEPA对最易穿透粒径（MPPS，约0.12–0.25μm）的过滤效率≥99.97%，0.5μm颗粒更大，效率更高。HEPA不可重复使用，压差过大会导致破裂，更换前必须消毒。3.实验室发生少量感染性液体溅洒，第一步应：A.立即报告实验室主任B.用含有效氯5000mg/L的消毒剂覆盖30minC.用吸水纸轻轻吸干D.撤离人员并关闭空调系统答案：B解析：少量溅洒应立即用高浓度含氯消毒剂覆盖作用30min，确保彻底灭活病原体，随后再清理。4.下列哪项不是BSL-2实验室的必备设施？A.自动关闭门B.定向气流C.洗眼装置D.高压蒸汽灭菌器答案：B解析：定向气流为BSL-3及以上要求，BSL-2仅需自然通风或机械通风，无需强制定向。5.对含芽孢的废弃物，最可靠的灭菌条件是：A.121℃15minB.121℃30minC.134℃3minD.134℃18min答案：D解析：芽孢耐热性强，134℃18min（预真空程序）可确保log6杀灭水平。6.实验室生物风险评估的核心公式中，风险值R与暴露概率P、后果严重程度C的关系为：A.RB.RC.RD.R答案：B解析：风险等于概率与后果的乘积，体现“高概率低后果”与“低概率高后果”可比性。7.关于正压防护服，下列说法错误的是：A.生命支持系统需双路供气B.内部压力≥环境压力+50PaC.可完全替代生物安全柜D.需每日检查气密性答案：C解析：正压服不能替代生物安全柜，柜内层流与HEPA过滤是防止样本污染的关键。8.实验人员被含HIV的血液针头刺伤，暴露后预防（PEP）启动时间应：A.≤2hB.≤6hC.≤24hD.≤72h答案：A解析：HIVPEP最佳效果在暴露后≤2h内启动，越早越好。9.下列哪项属于“锐器盒”管理错误？A.装满3/4立即封口B.放置于操作台边缘便于丢弃C.一旦封口不可再打开D.外表面被污染立即消毒答案：B解析：锐器盒应置于操作台内侧，避免碰倒或飞溅。10.关于实验室“双人双锁”制度，正确的是：A.仅适用于菌（毒）种库B.两名保管员需同时到场方可开启C.电子门禁可替代机械锁D.夜间可单人值守答案：B解析：双人双锁要求两名授权人同时到场，防止单人擅自进入高等级区域。二、多项选择题（每题3分，共15分，多选少选均不得分）11.以下哪些属于BSL-4实验室“化学淋浴”环节的必要步骤？A.有效氯浓度≥5000mg/LB.作用时间≥5minC.水温≥50℃D.pH6–8E.喷洒覆盖全身无死角答案：BDE解析：化学淋浴使用过氧乙酸或过氧化氢，无需高温，pH中性，确保5min全覆盖。12.关于实验室“气密性检测”，下列方法可用于检漏的是：A.压力衰减法B.皂泡法C.碘化钾气溶胶法D.声发射法E.氦质谱法答案：ABE解析：碘化钾法用于HEPA扫描检漏，声发射用于金属容器，气密性检漏常用压力衰减、皂泡、氦质谱。13.以下哪些操作可产生高浓度气溶胶？A.高速匀浆B.火焰封口C.超声波破碎D.真空冻干E.移液器缓慢放液答案：ACD解析：高速匀浆、超声破碎、冻干升华均易产生气溶胶；火焰封口与缓慢放液风险低。14.实验室“消毒”与“灭菌”区别包括：A.杀灭微生物种类不同B.杀灭程度不同C.使用化学试剂不同D.处理对象不同E.法规要求不同答案：ABDE解析：消毒不要求杀灭芽孢，灭菌需log6；法规、对象、程度均不同，但可使用同一种化学剂。15.关于“实验室获得性感染”数据，下列描述正确的是：A.80%以上由“操作失误”导致B.针刺伤占锐器伤比例＞50%C.呼吸道感染占比最高D.70%发生在BSL-3及以上实验室E.记录上报可延迟至30d答案：ABC解析：呼吸道感染比例最高，针刺伤为主，操作失误是主因；BSL-2感染更多，上报需立即。三、判断题（每题1分，共10分，正确打“√”，错误打“×”）16.在BSL-3实验室内，手机可在消毒后带入。答案：×解析：手机等个人物品禁止带入，防止污染扩散。17.实验室负压梯度应满足：Δ≥答案：√解析：负压实验室需比走廊低≥10Pa，防止病原体外泄。18.过氧化氢气化（VHP）灭菌对不锈钢无腐蚀。答案：×解析：高浓度过氧化氢可腐蚀不锈钢表面，需控制浓度与时间。19.实验动物设施“隔离器”属于PrimaryBarrier。答案：√解析：隔离器直接包围动物，为一级屏障。20.生物安全柜开机后需自净5min方可使用。答案：√解析：自净5min可清除柜内悬浮颗粒，确保洁净。21.实验室出口设置手消毒器即可，无需洗手池。答案：×解析：BSL-2及以上必须设洗手池，手消毒器为补充。22.菌（毒）种运输需“三层包装”，最外层贴UN2814标签。答案：√解析：UN2814为A类感染性物质运输标签。23.实验室“应急预案”演练频率应≥每年2次。答案：√解析：WHO与我国规范均要求≥2次/年。24.实验人员可佩戴隐形眼镜进入BSL-3区域。答案：×解析：隐形眼镜可吸附病原体，禁止佩戴。25.高压灭菌器的生物指示剂为“嗜热脂肪芽孢杆菌”。答案：√解析：Geobacillusstearothermophilus芽孢耐热，用于验证灭菌效果。四、填空题（每空2分，共20分）26.生物安全柜高效过滤器对MPPS的穿透率应≤________%。答案：0.03解析：≥99.97%效率对应穿透率≤0.03%。27.我国《实验室生物安全通用要求》最新版本编号为GB________-2020。答案：1948928.若实验室通风系统失效，人员应在________分钟内撤离。答案：15解析：BSL-3系统失效15min内未恢复需撤离。29.含埃博拉病毒的样本运输包装，外层需贴UN________标签。答案：281430.实验室“锐器伤”紧急处理，应挤压伤口至出血________min。答案：5解析：持续挤压5min可排出潜在病原体。31.过氧化氢VHP常用浓度为________%，作用时间________min。答案：35；30解析：35%VHP作用30min可达log6芽孢杀灭。32.实验室“定向气流”要求：清洁区→________→污染区。答案：半污染区33.生物安全柜前窗开启高度若超过标定值________cm，报警器应启动。答案：2解析：≥2cm即破坏气流屏障。34.高压灭菌验证中，生物指示剂含芽孢量≥________CFU/片。答案：1×10^635.实验动物“安乐死”CO₂浓度需达________%以上。答案：70解析：70%CO₂可在2min内使小鼠丧失意识。五、简答题（每题10分，共20分）36.简述BSL-3实验室“生命支持系统”正压防护服供气回路的冗余设计原则，并给出压差计算公式。答案：冗余设计采用双路独立供气，每路均可单独满足最大呼吸量40L/min，且自动切换。设主路压力，备用路，内部压力，则冗余条件为：≥同时设泄压阀开启阈值=+400

37.实验室发生200mL高浓度布鲁氏菌培养液离心管破裂，请按“溢出处理SOP”写出详细步骤，并计算所需消毒剂用量（有效氯5000mg/L，作用面积0.5m²，作用时间30min，液体吸收量0.2L）。答案：步骤：1.停机保持离心盖关闭30min，让气溶胶沉降。2.穿戴双层手套、N95、护目镜、防水围裙。3.用吸水颗粒覆盖全部裂口区域，吸附0.2L液体。4.配制5000mg/L含氯消毒剂：取含氯泡腾片（每片500mg）10片，加自来水1L，充分溶解。5.将消毒剂缓慢倒入吸附层，确保完全浸润，不飞溅，覆盖面积0.5m²，厚度≥1cm。6.计时30min，每5min补加少量，防止干燥。7.用镊子将污染物装入双层高压袋，表面再用消毒剂擦拭3遍。8.锐器单独入盒，所有废物标识“感染性废物”。9.脱个人防护，按“污染面内卷”原则，入高压袋。10.洗手、记录、报告。用量计算：吸附液体0.2L，需额外0.3L保证浸润，共0.5L；5000mg/L即5g/L，需有效氯2.5g；泡腾片每片0.5g，需5片；考虑损耗，实际使用10片配1L，取0.5L即可满足。六、计算与案例分析题（共15分）38.某BSL-3实验室尺寸为8m×6m×3m，换气次数12次/h，排风系统故障后，室内初始浓度为

的芽孢气溶胶。假设完全混合、无沉降、无灭活，求：（1）浓度降至≤10CFU/m³所需时间；（2）若增加HEPA循环净化器，流量600m³/h，再求所需时间。答案：（1）房间体积V=144

浓度衰减模型：C(令C(≤（2）增加净化器流量Q=600

/h同理：t解析：HEPA循环可缩短15min，但芽孢无灭活时仍需长时间，提示需结合化学消毒。七、综合应用题（共20分）39.某研究所计划新建一座可开展新冠病毒分离培养的BSL-3实验室，请根据GB19489-2020与WHO《LaboratoryBiosafetyManual》第四版，完成以下设计要点：（1）平面布局“三区两缓”示意图（文字描述即可）；（2）通风系统压差梯度与报警值；（3）给排水与废水灭活方案；（4）培训与演练计划。答案：（1）平面布局：清洁区（办公、会议室）→第一缓冲间（更外衣）→半污染区（准备、洗涤）→第二缓冲间（穿防护服）→污染区（核心实验室）。双走廊设计，清洁走廊与污染走廊并行，物品通过传递窗双门互锁。（2）压差梯度：清洁区0Pa→第一缓冲-15Pa→半污染-30Pa→第二缓冲-45Pa→核心实验室-60Pa。报警值：偏离设定值±5Pa持续60s，声光报警并短信通知管理员；偏离±10Pa自动关闭送风并启动备用排风。（3）给排水：