临床微生物组考试题及答案2025版

临床微生物组考试题及答案2025版一、单项选择题（每题1分，共30分。每题只有一个最佳答案）1.某65岁男性因社区获得性肺炎入院，痰培养48小时后出现β溶血、对杆菌肽敏感、CAMP试验阳性的革兰阳性球菌。下列哪项描述最能解释其致病机制？A.表面M蛋白抑制补体沉积B.溶血素O激活NLRP3炎症小体C.荚膜多糖阻断吞噬体溶酶体融合D.透明质酸酶降解肺泡基底膜答案：B2.对同一患者进行宏基因组测序，发现其支气管肺泡灌洗液中“相对丰度”最高的物种为Streptococcussalivarius。下列哪项操作最能验证该菌是否真正参与感染而非污染？A.重新提取DNA并重复测序B.对原始样本进行16SrRNAV4区qPCR绝对定量C.用S.salivarius特异性引物进行FISH并计数细胞内菌量D.将序列与阴性对照比对并计算decontam指数答案：C3.某ICU患者直肠拭子mNGS检出mcr1阳性大肠埃希菌，但培养阴性。下列哪项措施最能降低后续碳青霉烯耐药传播风险？A.立即口服磷霉素B.对同病房患者进行直肠mNGS筛查C.采用碳青霉烯sparing方案并加强接触隔离D.环境表面每日使用次氯酸钠1000ppm擦拭答案：C4.在新生儿肠道微生态研究中，下列哪项指标最能反映“菌群成熟度”？A.Shannon指数B.粪便丁酸浓度C.基于随机森林的“菌群年龄”模型得分D.拟杆菌门/厚壁菌门比值答案：C5.某实验室自建tNGSpanel检测尿液病原体，下列哪种内参最能校正采样差异？A.加入已知浓度的大肠埃希菌噬菌体λDNAB.加入固定拷贝数的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）细胞C.加入人工合成且带随机标签的spikein质粒D.直接以16S总读数进行RPM归一化答案：C6.对艰难梭菌感染（CDI）患者进行粪菌移植（FMT）后，下列哪项宏基因组功能改变最能预测复发风险降低？A.胆汁酸7α脱羟基酶基因丰度升高B.色氨酸合成酶基因丰度降低C.万古霉素耐药vanA基因消失D.孢子形成相关基因增加答案：A7.某研究使用PacBioHiFi测序获得女性阴道微生态全长16S序列，发现Gardnerellavaginalis存在4种不同SV（精确变异）。下列哪项实验可验证这些SV是否代表不同毒力表型？A.将各SV菌株分别接种于阴道上皮三维模型并测定IL8分泌B.对SV序列进行MLST比对C.用qPCR检测sialidase基因拷贝数D.计算各SV的相对丰度与Nugent评分相关性答案：A8.在慢性创面微生物膜研究中，下列哪项技术组合最能实现“空间代谢组菌谱”共定位？A.MALDITOFIMS+FISHCLASIB.16SrRNA测序+LCMS/MSC.SEM+Raman光谱D.NanoSIMS+CARDFISH答案：D9.某患者因急性坏死性胰腺炎继发真菌感染，血清学BDG阳性但培养阴性。下列哪项mNGS分析策略最能区分定植与侵袭？A.仅报告读数>100的物种B.过滤人源序列后计算真菌/细菌读数比C.使用RNA内参校正并计算每毫升血浆的ITS1拷贝数D.将序列与医院环境库比对去除背景答案：C10.在口腔癌前病变研究中，发现Porphyromonasgingivalis的pgp基因（编码肽精氨酸脱亚胺酶）表达与患者血清抗CCP抗体呈正相关。下列哪项实验最能证明因果关系？A.构建pgp缺失株并接种于无菌小鼠口腔，观察是否诱导宿主蛋白瓜氨酸化B.用ELISA检测pgp蛋白与CCP抗体的直接结合C.对健康志愿者进行P.gingivalis漱口试验并追踪抗体D.分析pgp基因多态性与RA患者HLADRB1共享表位关联答案：A11.某实验室开发CRISPRCas12a检测碳青霉烯酶基因，下列哪种质控最能避免假阴性？A.内源人RNaseP基因作为提取质控B.加入与靶序列无交叉的荧光报告质粒C.使用含非靶标bla基因的弱阳性对照D.在反应体系中加入dNTP混合物答案：A12.对肝硬化患者进行唾液宏蛋白质组学，发现氨同化相关酶丰度升高。下列哪项菌源酶贡献最大？A.尿素酶（UreC）B.谷氨酰胺合成酶（GlnA）C.谷氨酸脱氢酶（GdhA）D.氨基甲酸激酶（ArcC）答案：A13.某研究使用OxfordNanopore对ICU呼吸机回路冷凝水进行实时测序，发现Stenotrophomonasmaltophilia在48小时内获得blaL1。下列哪项生信流程最能确认该基因位于可移动元件？A.将blaL1上下游5kb序列进行ORF预测并查找IS家族转座酶B.计算blaL1的GC含量与基因组平均差异C.使用PlasmidFinder进行比对D.构建系统发育树观察菌株聚类答案：A14.在评估益生菌E.coliNissle1917对溃疡性结肠炎疗效的随机对照试验中，下列哪项结局最能反映“菌群介导”的作用机制？A.内镜Mayo评分下降B.粪便钙卫蛋白降低C.血清IL10升高且与菌株特有基因gadA丰度正相关D.患者生活质量问卷改善答案：C15.某儿童中心发生多重耐药肺炎克雷伯菌（ST11KL64）暴发，常规PFGE无法区分不同病例分离株。下列哪项全基因组测序分析最能追踪传播链？A.计算cgMLST差异≤5等位基因B.检测质粒不相容群（IncFIIvsIncR）C.比较耐药岛（KPCΔblaKPC2）结构D.分析平均核苷酸一致性（ANI）>99.99%答案：A16.对慢性鼻窦炎伴鼻息肉患者进行窦口拭子mNGS，发现金黄色葡萄球菌检出率与术后复发呈正相关。下列哪项实验最能验证其作为“致病菌”而非“旁观者”？A.用体外鼻窦黏膜上皮模型，比较高毒力株与共生株诱导IL33表达差异B.检测鼻息肉组织内IgE水平C.分析金黄色葡萄球菌读数与嗜酸粒细胞计数相关性D.用16S测序比较复发与非复发组α多样性答案：A17.某实验室建立“菌群药物”相互作用数据库，发现二甲双胍血药浓度与肠道Akkermansiamuciniphila丰度负相关。下列哪项实验最能证明该菌直接降解药物？A.在厌氧培养基中加入二甲双胍并测定HPLCMS药物剩余量B.用宏基因组挖掘A.muciniphila的胍基转移酶基因C.对无菌小鼠定植该菌并测定口服二甲双胍的生物利用度D.分析患者SNP与菌群互作答案：A18.在评估抗菌肽LL37对铜绿假单胞菌生物膜作用的实验中，下列哪项指标最能反映“膜内菌代谢活性”而非“生物膜总量”？A.XTT减低试验B.结晶紫染色C.SYTO9/PI共聚焦荧光比值D.扫描电镜观察厚度答案：A19.某研究对结直肠癌（CRC）患者粪便进行病毒组测序，发现一种新型crAsslike噬菌体与肿瘤F.nucleatum丰度呈负相关。下列哪项实验最能验证噬菌体特异性杀灭F.nucleatum？A.将噬菌体与F.nucleatum共培养并测定OD600下降B.用qPCR检测噬菌体复制中间体C.在无菌小鼠中定植F.nucleatum后灌胃噬菌体并计数肿瘤数量D.分析噬菌体尾纤维蛋白与F.nucleatum外膜蛋白结合答案：C20.对ICU患者进行抗生素降阶梯治疗时，下列哪项实时宏基因组指标最能预测“安全停药”？A.血浆cfDNA中耐药基因相对丰度<0.1%B.呼吸道样本中机会致病菌读数<10RPM且宿主炎症指标下降C.肠道菌群Shannon指数恢复至>3.5D.口腔样本中Streptococcusspp.重新成为优势菌答案：B21.某实验室开发微流控芯片进行单细菌RNAseq，发现尿路感染大肠埃希菌存在“持留”亚群。下列哪项基因表达特征最能预测其耐受环丙沙星？A.sosA与relA共表达B.fimH高表达C.ycfR上调D.cyaA下调答案：A22.在评估阴道用乳酸菌制剂对早产预防效果的III期试验中，下列哪项菌群指标被FDA接受为“替代终点”？A.Nugent评分<4维持率B.乳酸菌相对丰度>80%C.阴道pH<4.5D.生物胺浓度下降答案：A23.某研究使用DESeq2分析发现，HIV感染者口腔中Candidaalbicans的“菌丝相关基因”表达上调。下列哪项实验最能验证该表达差异导致致病性增强？A.构建菌丝缺陷株（efg1Δ/Δ）并在人源化小鼠口腔观察侵袭深度B.用RTqPCR验证菌丝基因表达C.测定宿主β防御素2水平D.分析菌株对氟康唑MIC答案：A24.对慢性阻塞性肺疾病（COPD）急性加重患者进行痰液宏基因组，发现嗜麦芽窄食单胞菌携带的L1金属β内酰胺酶基因丰度与FEV1下降呈正相关。下列哪项统计方法最能控制“抗生素暴露”混杂？A.倾向评分匹配后多重线性回归B.仅用未使用抗生素亚组分析C.将抗生素天数作为协变量纳入GLMD.使用抗生素作为随机效应答案：A25.某实验室建立“菌群免疫”相互作用图谱，发现肠道Bacteroidesthetaiotaomicron的荚膜多糖A（PSA）可诱导Foxp3+Treg。下列哪项实验最能证明PSA为“活性分子”？A.纯化PSA并口服给予无菌小鼠，检测结肠RORγt+Treg扩增B.构建PSA合成缺失株并比较定植能力C.用ELISA检测PSA与TLR2结合D.分析PSA刺激树突状细胞后的细胞因子谱答案：A26.在评估FMT治疗自闭症谱系障碍（ASD）疗效的开放标签试验中，下列哪项菌群改变最能预测社交行为改善？A.双歧杆菌丰度升高且血清GABA升高B.脱硫弧菌丰度下降且粪便丁酸增加C.普雷沃菌丰度升高且5HT水平升高D.瘤胃球菌丰度下降且IL6降低答案：B27.某研究使用HiC技术联合宏基因组，发现医院水槽中肺炎克雷伯菌的耐药质粒可转移至阴沟肠杆菌。下列哪项HiC指标最能量化“共价连接”频率？A.跨物种跨膜接触得分（transcontactscore）>0.8B.质粒染色体互作热图出现“对角线外峰值”C.3D结构域边界消失D.GCskew突变率答案：B28.对肝硬化患者进行“菌群代谢”整合分析，发现苯丙氨酸代谢产物苯乙胺与Enterococcusfaecalis的脱羧酶基因丰度正相关。下列哪项实验最能验证该菌驱动高氨血症？A.给无菌小鼠定植E.faecalis并灌胃苯丙氨酸，测定门静脉苯乙胺与血氨B.用脱羧酶抑制剂培养E.faecalis并测定苯乙胺C.分析患者苯丙氨酸水平与HE分级D.测定E.faecalis的gdh基因表达答案：A29.某实验室开发“菌群CRISPR”活体诊断工具，将Cas12a靶向艰难梭菌毒素B基因并输出荧光。下列哪项措施最能避免“交叉扩增”导致的假阳性？A.使用crRNA间隔区含艰难梭菌特有SNPB.降低Cas12a浓度C.提高反应温度至42℃D.使用dCas12a答案：A30.在评估抗菌光动力疗法（aPDT）对种植体周围炎疗效的临床研究中，下列哪项菌群指标最能作为“即刻杀菌”替代终点？A.16SrRNA基因qPCR总菌量下降≥2log10B.伴放线聚集杆菌消失C.链球菌/厌氧菌比值升高D.卟啉单胞菌读数下降≥90%答案：A二、配伍题（每题1分，共10分。每组选项可重复选用）A.艰难梭菌毒素BB.金黄色葡萄球菌PSMαC.铜绿假单胞菌PyocyaninD.大肠埃希菌α溶血素E.肺炎克雷伯菌荚膜31.激活NLRP3炎症小体并诱导IL1β释放（）32.通过形成跨膜孔道诱导中性粒细胞溶胞（）33.抑制线粒体复合物I导致ROS升高（）34.与宿主E钙粘蛋白结合促进细菌内化（）35.诱导肝细胞产生IL8并加重脓毒症（）答案：31A32B33C34A35E三、病例串题（共6小题，每题2分，共12分）患者，女，58岁，因“发热、腹胀、意识模糊3天”入院。既往原发性胆汁性胆管炎终末期，等待肝移植。查体：T38.9℃，P110次/分，BP92/58mmHg，腹部膨隆，压痛。实验室：WBC18×10⁹/L，NE85%，PLT68×10⁹/L，TBil312μmol/L，Cr210μmol/L，血氨142μmol/L。腹水常规：中性粒细胞850/mm³。血培养24小时报阳：革兰阴性杆菌，氧化酶阳性，麦康凯生长，葡萄糖产酸不产气，精氨酸双水解酶阳性，对亚胺培南敏感。36.最可能的致病菌是A.鲍曼不动杆菌B.铜绿假单胞菌C.嗜麦芽窄食单胞菌D.肺炎克雷伯菌答案：B37.经验性给予亚胺培南后48小时仍发热，血mNGS检出铜绿假单胞菌（相对丰度82%）及噬菌体PaP1（读数1200）。下列哪项措施最能指导精准治疗？A.立即更换为美罗培南+多粘菌素B.测定噬菌体PaP1对分离株的体外裂解曲线，若效率>90%则考虑噬菌体辅助疗法C.加用利奈唑胺覆盖革兰阳性菌D.重复血培养并等待药敏答案：B38.患者血氨持续升高，mNGS显示Enterococcusfaecalis脲酶基因丰度占细菌总读数3.5%。下列哪项干预最能直接降低氨产生？A.口服利福昔明B.静脉用门冬氨酸鸟氨酸C.口服乳果糖+新霉素D.静脉用精氨酸答案：C39.入院第5天患者出现急性呼吸窘迫，BALFmNGS检出肺炎克雷伯菌ST11（相对丰度78%），同时发现IncFII型质粒携带blaKPC2。下列哪项信息最能支持“医院获得”而非“既往定植”？A.与病房水槽分离株cgMLST差异0等位基因B.患者直肠拭子入院时阴性C.质粒复制子型与社区获得ST11不同D.患者未使用碳青霉烯答案：A40.针对KPCproducing肺炎克雷伯菌，下列哪项联合用药方案体外协同率最高？A.美罗培南+多粘菌素B.头孢他啶阿维巴坦+氨曲南C.替加环素+磷霉素D.亚胺培南瑞来巴坦+阿米卡星答案：B41.患者最终接受CRRT及噬菌体治疗，但第10天仍因多器官衰竭死亡。尸检肝组织mNGS显示：A.铜绿假单胞菌读数下降但出现gyrA突变B.肺炎克雷伯菌读数升高且出现mgrB缺失C.肠道菌易位并检出ParabacteroidesdistasonisD.真菌读数升高且检出Rhizopusmicrosporus答案：B四、简答题（每题8分，共32分）42.阐述“菌群免疫肿瘤”三角在结直肠癌发生中的分子机制，并给出至少两条可靶向的干预通路。答案：（1）菌群失衡：F.nucleatum通过Fap2与GalGalNAc结合，激活βcatenin信号，促进细胞增殖；（2）免疫抑制：F.nucleatum的Fap2还可与TIGIT结合，抑制NK细胞功能，形成免疫逃逸；（3）靶向干预：①抗Fap2单抗阻断黏附；②口服metronidazole降低F.nucleatum负荷；③抗TIGIT抗体恢复NK活性；④益生菌Akkermansia增强抗PD1疗效。43.描述如何利用“培养组学+高通量筛选”发现新型抗生物膜小分子，并给出实验流程与验证指标。答案：流程：①收集慢性创面样本，培养组学获得>300株分离株；②96孔板建立生物膜模型（CV染色初筛）；③用天然产物库（20,000种）进行共培养，XTT测定代谢活性，初筛抑制率>80%；④复筛排除杀菌效应（活菌计数验证非杀菌）；⑤采用CLSM观察膜厚度下降≥50%；⑥小鼠皮下生物膜感染模型，CFU降低≥2log10；⑦转录组揭示靶点为cdiGMP合成酶，SPR测定KD<1μM。44.解释“空间宏转录组”技术原理，并说明其如何揭示口腔白斑癌变微环境中“菌宿主”互作。答案：原理：将新鲜组织进行OCT包埋，使用GeoMxDSP平台，对菌16SrRNA和宿主mRNA进行UV裂解条形码捕获；通过杂交探针实现原位定量。应用：①发现白斑区P.gingivalis的fimA表达与宿主IL17信号共定位；②癌区C.albicans的菌丝相关基因（ALS3）与上皮EMT基因（vimentin）空间共表达；③抗fimA抗体局部注射可降低IL17+细胞浸润，提示菌驱动炎症癌轴。45.论述“实时宏基因组耐药监测”在ICU抗菌药物管理中的实施策略，包括技术、伦理与成本三方面