DB54∕T 0579-2026 藏猪冷冻精液

ICS62.020.30

CCSB43

54

西藏自治区地方标准

DB54/T0579—2026

藏猪冷冻精液

2026-1-4发布2026-2-5实施

西藏自治区市场监督管理局  发布

DB54/T0579—2026

目次

前言............................................................................II

1范围.................................................................................1

2规范性引用文件.......................................................................1

3术语和定义...........................................................................1

4要求.................................................................................1

5冻精制作.............................................................................2

6检查.................................................................................2

7标识、贮存、运输.....................................................................5

I

DB54/T0579—2026

前言

本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定

起草。

本文件由西藏农牧大学提出。

本文件由西藏自治区农业农村标准化技术委员会归口。

本文件起草单位：西藏农牧大学、河南农业大学、华南农业大学、中国农业大学、西藏健阳生态农

业有限责任公司、西藏神鹰农牧科技有限公司。

本文件主要起草人：段梦琪、商鹏、强巴央宗、王克君、李文婷、张博、张浩、张辉、张红亮、叶

幼荣、常振宇、张健、韦明邦、李英、严飞飞、敬冬、徐二东。

II

DB54/T0579—2026

藏猪冷冻精液

1范围

本文件规定了要求、检查、标识、贮存、运输等技术规范要求。

本文件适用于藏猪细管冷冻精液的制作、检验和判定标准。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T5458液氮生物容器

GB/T32763藏猪

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

藏猪

藏猪指血统纯正、体型外貌符合GB/T32763标准。

4要求

种公猪

选择品质优良种用公猪，性欲旺盛，种公猪特征明显，驯化调教后能正常采精，使用年限一般在1.5

年~3年，保证无遗传病史，体质健康，无二类疫病中的任何一类。

精液质量

精液应为乳白色或淡乳白色。精子活力≥70%，精子密度≥2亿个/mL，精子畸形率≤10%。

细管外观

细管无裂痕，两端封口严实，标识清晰。

剂型及剂量

0.5mL细管冻精剂型，每剂剂量≥0.45mL。

细管解冻后要求

1

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4.5.1精子活力

活力≥35%。

4.5.2精子畸形率

精子畸形率≤20%。

5冻精制作

藏猪冷冻精液的制作应按照以下步骤进行。

a）将采集的鲜精液先用精液质量分析系统检测原精密度、重量、活率等指标，对符合检测要求的

原精用猪冻精专用试剂在37℃等温稀释1倍，将稀释后的鲜精于室温（25℃）静置1h，转入17℃恒温冰

箱，平衡2h~3h。

b）取新鲜鸡蛋，去蛋清，将完整蛋黄置于灭菌无绒吸水纸上，将剩余蛋清吸净，用注射器抽取蛋

黄100mL，加入到配好的冻精专用基础液中，充分混匀，形成Ⅰ液。

c）待鲜精充分平衡后，摇匀，防止精子假死，17℃条件下800g~900g离心10min~15min，去掉

上清。再用17℃的Ⅰ液重悬浮精子，使精子密度达到20亿/mL，并置于盛有17℃水的烧杯中，于4℃冰箱

或低温操作柜中降温平衡，使精液在2.5h~3h缓慢降温至4℃~5℃，并平衡0.5h~1h。

d）待4℃平衡后，加入配好的精液冷冻剂再稀释1倍，混匀后立即在低温操作柜中进行0.5mL细管

灌装操作，并在细管托架上码好。

e）灌装完毕后，迅速将码好的细管放入冷冻仪中，启动冷冻程序，待程序跑完后取出细管装入纱

布袋中侵入液氮中长期保存。

6检查

检查分类、项目及判定

主要分为常规检查和抽样检查，常规检查是对细管冷冻精液的出入库的外观等进行检查。抽样检查

是对细管解冻后精子活力、前进运动精子数、精子畸形率进行的随机抽样检查，其中任何一项不达标准

都判断不合格。

检查方案、项目及方法

6.2.1细管检查

用眼观法直接观测细管外观。结果参照4.3所规定。

6.2.2剂量检查

6.2.2.1主要材料

离心管、剪刀、移液枪。

6.2.2.2检查方法

2

DB54/T0579—2026

取三支细管冷冻精液，分别两端剪开，加入离心管内，用移液枪吸取冷冻精液，于精液分析系统显

微镜下测定精子数。

6.2.2.3计算方法

精液剂量计算按式（1）计算：

........................................(1)

�1+�2+�3

�式=中：3

-剂量值，单位mL；

n1-第一支剂量，单位为mL；

�

n2-第二支剂量，单位为mL；

n3-第三支剂量，单位为mL。

精子活力、直线运动检查

6.3.1主要材料

恒温显微镜、恒温水浴锅、2mL离心管、载玻片（25.4mm76.2mm）、盖玻片（18mm18mm）、

移液枪。

××

6.3.2检查方法

取三支细管冷冻精液，在38℃恒温水浴锅中解冻，用移液枪取解冻后精液1μL滴于载玻片并加上盖

玻片，立即置于38℃恒温载物台上用50倍镜观测活力，每个样片选取三个视野进行观测。

6.3.3计算方法

精液活力计算按式（2）计算：

........................................(2)

�1+�2+�3

�式=中：3

y-活力值，单位%；

n1-第一支活力值，单位为%；

n2-第二支活力值，单位为%；

n3-第三支活力值，单位为%。

每剂量前进运动精子数检查

6.4.1主要材料

血细胞计数板、吸管、小试管、计数器、显微镜或电视显微装置、精液稀释液。

6.4.2检查方法

用吸管准确吸取10μL解冻后精液，注入盛有0.99mL精液稀释液的试管内，混匀。将备好的血细胞

计数板用盖玻片将计数室盖好，用吸管吸取10μL稀释精液于盖玻片边缘，使精液自行流入计数室，均

3

DB54/T0579—2026

匀充满，不应有气泡，然后在显微镜下观察计数。每样品观察上下两个计数室，取平均值，如两个计数

室计数结果误差超过5%，则应重检。

6.4.3每剂量前进运动精子数计算

每剂量中精子数按式（3）计算：

S=n500Q.....................................(3)

式中：

××

S—每剂量中精子数，单位为个；

n—5个中方格精子数，单位为个；

Q—细管剂量值,单位为ml。

每剂量中前进运动精子数按式(4)计算：

C=sm........................................(4)

式中：

×

C—每剂量中前进运动精子数，单位为个；

s—每剂量中精子数，单位为个；

m—活力，单位为%。

精子畸形率的检查

6.5.1主要材料

显微镜、载玻片、移液枪、蒸馏水、姬姆萨染料、中性福尔马林。

6.5.2主要方法

6.5.2.1精液准备

精液解冻，同时检查精液活力，选取合格冷冻精液进行后续处理

6.5.2.2涂片

取解冻后的精液滴于载玻片一端，用另一载玻片与有样品的载玻片呈∠35°均匀的拖动，自然风干

制作抹片，同一样品制作3个。

6.5.2.3固定

在已风干的抹片上滴加1mL~2mL中性福尔马林，固定15min后用清水缓缓冲洗，自然风干。

6.5.2.4染色

将固定好的抹片反扣在带有平槽的玻璃面上，将姬姆萨染液滴于槽和抹片之间，染色1.5h后用清

水冲去染液，晾干。

6.5.2.5镜检

将制作好的抹片在显微镜下观察，每个抹片上观察200个以上的精子数。