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「翘客」技术手册：血管平滑肌细胞GSN/α-SMA免疫荧光双标染色实验方案凝溶胶蛋白（GelsolinGSN）是一种重要的肌动蛋白调节蛋白，在1GSN微丝，动态调控VSMCsα-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）微丝骨架的2）参与血管收缩的负向调控Ca²⁺浓度升高时，激活的GSN快速解聚F-actinα-SMA通过阻断RhoA/ROCK，GSN可抑制VSMCsGSNVSMCsAnti-SMAMouseMabCat#Anti-GSNRabbitPolyclonalCat#207845-IgG-FITC（绿色IgG-Cy3（红色4%多聚甲醛0.1%TritonX-100（PBS5%BSA+0.1%Tween-DAPIPBST（0.05%Tween-50%-80%。5min，以去除残余的去污剂。5BSA1h，可有效减少非特异性抗体Anti-GSNRabbitpAb1:500Anti-α-SMAMousemAb1:200100-200μl，确保一抗均匀覆盖细胞表面。避免气泡。降低背景）。有的实验采用快速孵育方案，371-2PBST310min。抗小鼠IgG-FITC：1:1000抗兔IgG-1h吸弃二抗溶液，用PBST310min。全程避光操1-2如FITC488nm，Cy3552nm。Cy3FITC若共聚焦软件中黄色信号过强，可降低Cy3（Cy3高于FITC）。GSNα-SMA图片中黄色信号提示α-SMA与GSN本研究采用免疫荧光双标染色技术，系统揭示了GSNα-SMAGSN同作用遭到破坏，导致α-S

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