角膜内皮细胞间连接及其临床意义的研究进展

角膜内皮细胞间连接及其临床意义的研究进展【摘要】角膜内皮细胞间连接主要为缝隙连接，其次为紧密连接及黏合连接，它们共同构成角膜内皮细胞间的机械屏障，维持角膜的自然脱水状态以保持角膜透明。既往研究及综述已阐明角膜内皮失代偿与角膜内皮数量的关系，但少有综述关注角膜内皮细胞间连接的作用及其对内皮功能的影响。本综述介绍了角膜内皮细胞间连接的种类、功能以及它们在临床上的意义。本文指出，细胞间连接的状态影响角膜内皮的生长发育、损伤后愈合、屏障功能等一系列生物学过程，与多种临床疾病密切相关。聚焦于细胞间连接的研究有助于探索角膜内皮疾病的机制，并有望为角膜内皮疾病的诊疗提供新思路。【关键词】角膜内皮；通透性；紧密连接；黏着连接；缝隙连接角膜内皮细胞位于角膜最内层，为呈六边形的单层不可再生细胞，通过钠钾ATP酶（Na+/K+ATP酶）的主动转运及细胞间连接构成的机械屏障［1］，维持角膜的自然脱水状态，以保持其透明性和正常屈光功能。角膜内皮细胞通过细胞间连接维持彼此间的稳定性和细胞功能，这些连接不仅参与屏障完整性维持，还通过细胞旁/细胞间通路参与液体与离子稳态及信号传递［2］。角膜内皮细胞间的连接主要包括缝隙连接、紧密连接和黏合连接，其中缝隙连接主要介导细胞间通讯与代谢耦联，紧密连接维持细胞旁通路屏障功能，黏合连接有助于维持细胞形态与层状结构稳定。这些细胞间连接共同作用，确保角膜的自然脱水状态，防止角膜基质水肿，从而保证角膜的透明性和屈光性能。现有研究和综述已阐明角膜内皮细胞数量减少与角膜内皮功能失代偿之间的关系［3］，但关于角膜内皮细胞间连接的系统性研究尚显不足。临床上，角膜内皮细胞的功能不仅与细胞数量和密度相关，部分内皮细胞数量正常的患者仍会出现内皮失代偿，这类患者显微镜下角膜内皮细胞形态欠规则，失去正常的六边形形态，提示其角膜内皮细胞间屏障已遭破坏。细胞间连接的完整性和功能状态同样决定内皮的生理和病理表现［4］。近年研究表明，角膜内皮细胞间连接的状态直接影响角膜内皮的生长发育、损伤后修复及细胞间屏障功能等生物学过程。生理及病理状态下，细胞间连接的损伤或功能障碍均可能导致角膜内皮功能失调［46］，进而影响角膜健康。角膜内皮细胞间连接异常与多种临床疾病密切相关，如代谢性疾病相关角膜内皮改变、角膜内皮病、角膜水肿、角膜移植后排斥反应等［79］。因此，关注角膜内皮细胞间连接的研究对理解上述疾病的发病机制具有重要意义。通过深入探讨角膜内皮细胞间连接的类型、功能及其临床意义，可为角膜内皮相关疾病的早期诊断和治疗提供新思路与新策略。一、3种角膜内皮细胞间连接角膜内皮细胞间连接主要为缝隙连接［10］，同时存在紧密连接及黏合连接［11］。这3种细胞间连接共同存在于相邻内皮细胞的质膜侧面，紧密连接位于近顶部，黏合连接位于其下方，二者共同构成内皮细胞顶端连接复合体（apicaljunctionalcomplex，AJC）［12］，也被称为细胞周围肌动球蛋白环（perijunctionalactomyosinring，PAMR）；缝隙连接位于AJC下方，3种连接共同发挥机械屏障及细胞间分子运输作用。1.缝隙连接：为角膜内皮细胞间最普遍的连接类型［10］，由连接蛋白构成，形成的通道允许相对分子质量<2000的分子（如离子、代谢产物）在细胞间直接传递，建立细胞间的离子偶联或代谢偶联。2.紧密连接：由多种闭锁小带蛋白质（zonulaoccludens，ZO）及其他紧密连接蛋白组成［12］，相邻两个内皮细胞间的紧密连接蛋白相互接触形成封闭索，进而构成网状的闭锁带。3.黏合连接：又称黏合带，主要由E钙粘素构成［13］，维持细胞间黏附及组织结构稳定。二、缝隙连接与角膜内皮稳态密切相关（一）缝隙连接的结构与基本功能缝隙连接由相邻细胞膜配对的连接小体（connexon）构成，是细胞间直接通讯的主要通道，可使钙离子（Ca²⁺）、三磷酸肌醇（IP₃）等小分子跨膜传递，从而支持内皮层的稳态、应激应答及信号整合［14］。缝隙连接介导的细胞间通讯（gapjunctionalintercellularcommunication，GJIC）与旁分泌信号路径共同调节细胞生存、迁移和应激反应，是理解内皮稳态与损伤机制的核心基础。GJIC与蛋白质复合体间存在动态的功能性耦合，对维持正常内皮层功能至关重要［1518］。（二）缝隙连接在角膜内皮细胞发育过程中的变化人类角膜内皮细胞在各年龄阶段均表达缝隙连接，其数量与大小会随组织成熟动态调整，这与细胞分化、通讯需求及稳态维持密切相关［19］。细胞侧面缝隙连接的突出度、大小和丰度随年龄增长而减少。在角膜内皮层逐渐发育为六边形并形成顶端连接的过程中，细胞间通讯的增强可能促使缝隙连接体积增大、数量增多。一项针对缝隙连接的电镜观察研究证实了上述观点：在角膜伤口愈合早期，角膜内皮细胞间缝隙连接的体积较正常情况增大25%左右［20］。（三）缝隙连接蛋白43发挥关键作用连接蛋白43（connexin43，Cx43）在维持角膜内皮稳态中至关重要，也是大鼠、兔和人角膜内皮细胞中最常见的缝隙连接蛋白亚型［21］。角膜内皮细胞缝隙连接相关研究多聚焦于Cx43蛋白。1.Cx43表达改变反映损伤状态：角膜受到物理化学伤害或其他应激刺激时，常伴随Cx43的明显减少或形态失常［2122］；也有研究者发现，遗传毒性药物造成的角膜内皮细胞应激会导致Cx43聚集，形成较大的盘状细胞间通道［16］。这提示缝隙连接蛋白在数量和分布上的改变可能是角膜内皮创伤的重要提示。2.调控Cx43影响角膜内皮修复与病理过程：缝隙连接与角膜内皮细胞生存、创伤后愈合、内皮间质转化、氧化应激及凋亡等过程密切相关。近年研究进一步关注Cx43表达调控对内皮损伤修复过程的影响，发现Cx43的减少可促进角膜内皮创伤愈合，减轻间质水肿，同时抑制损伤后角膜内皮间质转化过程，减少瘢痕产生［23］。有研究者通过不同实验设计验证了这一结论：将Cx43调节蛋白注射于角膜内皮伤口边缘，可降低Cx43的表达量，进而促进角膜愈合［24］。另有研究发现，丝裂霉素C导致的遗传毒性应激刺激可使Cx43在细胞连接处迅速聚集成斑块，而应激结束后Cx43表达量下降［16］。此外，Cx43的表达下调有时也预示细胞凋亡，例如角膜内皮营养不良会促进Cx43通过胞吞途径降解，降低细胞表面Cx43表达量，从而同步降低细胞间通讯强度［22］。Cx43的功能不仅限于GJIC，其C末端及半通道活性在肿瘤或炎性反应等其他组织背景中也显示出多重信号调控作用，提示其在细胞内外信号交流中的调控角色［25］。三、紧密连接紊乱导致角膜水肿液体通过角膜内皮存在两种方式，以往认为主要通过细胞内运输，现越来越多研究者将关注点聚焦于细胞旁通路［26］，而细胞间紧密连接正是这一过程的关键结构。（一）紧密连接的结构紧密连接主要由壳牢素（claudin，CLDN）、闭锁素（occludin，OCLN）及其他辅助蛋白构成。壳牢素家族属于四次跨膜整合蛋白，在紧密连接中数量最多，其C端与ZO1相连，通过细胞骨架维持紧密连接的稳定性与选择通透性。不同壳牢素成员具有组织特异性，可形成具有不同通透特性的连接通道。闭锁素是最早发现的紧密连接跨膜蛋白，普遍表达于顶端细胞膜，其磷酸化状态影响定位与功能，是紧密连接研究中的标志性蛋白［11，2729］。这些跨膜蛋白通常与膜相关鸟苷酸激酶家族（membraneassociatedguanylatekinase，MAGUK）成员及连接分子结合，包括ZO1、ZO2、ZO3、连接黏附分子（junctionaladhesionmolecules，JAMs）、α连环蛋白及PAR3PAR6aPKC复合体等。ZO1可通过其N端与occludin结合，将跨膜紧密连接蛋白与细胞骨架相连，进而参与紧密连接的活性调节，是内皮紧密连接研究中关注的核心标志物［30］。（二）紧密连接的分布和功能1.紧密连接随生长发育的变化：紧密连接分布于角膜内皮细胞侧壁顶端，与黏合连接共同组成内皮细胞顶端连接复合体［12］。一项针对家兔角膜内皮紧密连接的研究发现，家兔刚出生时，紧密连接链很少，细胞旁扩散的屏障尚不成熟［19］；随着家兔成熟，紧密连接链网络结构逐渐复杂，并围绕在细胞顶端褶皱下方。这提示紧密连接组成的AJC从幼年到成年是逐步成熟的过程。2.紧密连接紊乱造成角膜水肿：紧密连接是角膜内皮细胞旁通路通透性的结构基础，已有研究者发现，角膜内皮紧密连接的破坏与角膜控制前房液体和营养摄取的能力受损相关，这种破坏会导致角膜水肿和透光性受损［4，3133］。有研究者明确了紧密连接作为通透性屏障的重要性，而缝隙连接对于构成或维持功能性角膜内皮屏障并非关键［34］。另有研究者发现，紧密连接的丢失可能是角膜炎症浸润的关键环节，炎症浸润导致的渗出及内皮屏障破坏或许与角膜水肿机制相关［5，35］。高眼压、手术、化学损伤均可能损伤角膜内皮细胞间的紧密连接［6，36］，进而造成房水渗漏和角膜水肿。上述研究表明，紧密连接的结构损伤已是内皮疾病的重要标志，目前已有研究者开发出评估角膜内皮细胞AJC损伤程度的机器学习方法［37］，有望助力角膜内皮失代偿的早期诊断。（三）紧密连接蛋白闭锁小带1（zonulaoccludens1，ZO1）ZO1是评估角膜内皮细胞间紧密连接的关键生物标志物。角膜内皮应激（包括缺氧、眼内压升高或导致角膜产生无菌性炎性反应的一系列应激反应）均与角膜内皮细胞ZO1蛋白的异常表达相关［38］。既往研究通过多种应激实验证实了这一点：有研究通过激活Toll样受体产生内皮无菌性炎性反应［4］，发现ZO1表达下调，角膜间质水肿；其他研究将角膜内皮细胞暴露于促炎细胞因子肿瘤坏死因子α（TNFα）［3132］，导致ZO1的中断和跨内皮电阻的丧失，而这一过程可通过基质金属蛋白酶9（MMP9）抑制剂解救，提示MMP9的激活是TNFα导致症损伤的下游事件。另有研究发现，角膜内皮的急性氧化应激通过p38丝裂原活化蛋白激酶（MAP激酶）依赖机制诱导微管解体，导致PAMR破坏和紧密连接屏障功能丧失［6］；化学氧化试剂同样通过p38MAP激酶依赖机制介导PAMR破坏和ZO1分布紊乱［39］。这些炎性反应作用下的角膜内皮细胞应激反应，往往导致紧密连接相关蛋白的表达受损，引发角膜水肿。而部分因子可通过调节ZO1的表达保护角膜内皮屏障，例如有研究者发现，周围炎性反应因子增高时，磷酸化信号转导与转录激活因子3（pSTAT3）表达上调，进而诱导ZO1表达上调以应对可能的炎性反应损伤［40］。此外，近年也有研究在角膜冷保存或低温应激背景下强调“微管PAMRZO1”轴：低温可导致ZO1周边连续性破坏，而微管稳定/相关干预可减轻屏障完整性损伤［4142］。另有研究发现，ZO1/ZONAB通路与缓激肽诱导的角膜内皮细胞增殖密切相关［21］，提示ZO1不仅作为结构蛋白维持细胞外屏障，还可将细胞外信号传递至细胞内调控生长发育。（四）其他蛋白对于角膜内皮通透性的影响除紧密连接ZO1的核心作用外，水通道蛋白可能也发挥辅助作用，促进水分子从细胞旁通道运输。有研究者发现，水通道蛋白1的缺失不会直接导致间质水肿，但会使角膜内皮细胞对水分子的通透性增加，提示紧密连接及电化学耦联作用仍是影响水分子运输的主要因素［43］。MarvelD3是一种紧密连接相关的occludin家族四跨膜蛋白，对角膜内皮细胞旁通路的通透性发挥关键作用，很可能对紧密连接起到重要辅助作用［44］。前文提及的黏附连接分子JAMA及其结合蛋白AF6表达于角膜内皮细胞的紧密连接中，JAMA在维持角膜内皮屏障功能中也起着重要作用［5］。近年来，除传统炎性反应和氧化应激模型外，也有研究从手术相关应激与蛋白组学角度寻找屏障保护因子，例如在白内障相关应激背景下发现，低温诱导的保护因子与自噬通路可能参与内皮细胞存活与功能维持，为理解“应激屏障”耦联提供了新的候选机制［45］。四、黏合连接的功能（一）维持细胞形态与排列黏合连接由细胞表面蛋白质（如钙黏素）及胞内锚定蛋白（α联蛋白、β联蛋白等）组成。钙黏素通过与细胞内的β联蛋白和α联蛋白相互作用，形成细胞间连接；β联蛋白等锚定蛋白进一步与细胞骨架的肌动蛋白相连，从而帮助维持细胞的形态和排列。角膜内皮细胞的黏合连接主要由N钙黏素［46］组成，这些连接结构有助于维持内皮细胞的排列和功能。N钙黏素表达的紊乱或丢失，可能提示内皮间充质转化过程的开始［47］，以及正常内皮功能的丧失。（二）调节细胞间信号传递与功能协调黏合连接不仅是物理性连接，也是细胞间信号传递的重要平台。通过黏合连接，角膜内皮细胞能够感知外部环境的变化，并协调其功能。例如，N钙黏素可参与内皮细胞的生长、迁移、极性调节等过程［4849］。角膜内皮细胞的自然脱水和透明性依赖于内皮细胞的正常排列和功能，而这些过程又通过细胞间的信号传递得到调节［47，50］。（三）参与角膜修复与再生角膜受到损伤时，黏合连接在内皮细胞修复过程中的作用尤为重要。角膜损伤后，内皮细胞会发生迁移及重新排列，以恢复受损区域的功能；这一过程中，黏合连接蛋白的调节与重建是保证细胞能够迁移和恢复的关键［51］。黏合连接的功能受损会导致内皮细胞修复能力减弱，进一步加重角膜水肿或视力障碍等病理状态。（四）维持角膜内皮细胞的屏障功能黏合连接与紧密连接一同构成内皮细胞AJC（即PAMR）。有研究显示，内皮细胞间的这种AJC相较于经典上皮细胞的AJC更疏松［12］（低阻力顶端连接，lowresistanceapicaljunction），提示内皮细胞通过平衡“被动渗漏”与“主动转运”（pumpleakbalance）两个过程，实现对房水的可控摄取并维持角膜脱水状态［52］。五、探究角膜内皮细胞间连接的临床意义（一）临床疾病与细胞间连接的关系1.全身疾病：已有研究报道，多种全身疾病可通过损伤角膜内皮细胞间连接降低屏障/泵功能储备。高脂血症可使角膜内皮细胞间紧密连接排布紊乱，降低钠钾泵表达量，激活氧化应激并损伤细胞屏障，进而降低角膜内皮损伤后的愈合速率［8］。值得强调的是，这类“连接骨架泵”轴的异常往往并非一定伴随早期内皮细胞密度（endothelialcelldensity，ECD）的显著下降，但可先表现为屏障功能脆弱，从而在手术、炎性反应或高眼压等应激下更易出现角膜水肿或失代偿。糖尿病相关研究提示：高血糖可导致角膜内皮细胞紧密连接和钠钾泵表达下调，从而诱发角膜水肿，并进一步提示线粒体稳态（如线粒体自噬）参与其中［7］。此外，有研究在糖尿病模型中观察到内质网应激的出现早于形态学改变，且持续的内质网应激可直接推动内皮功能受损与角膜水肿，提示“细胞间连接/细胞应激—功能衰退”可能是糖尿病角膜内皮病变更早期、更可干预的环节［53］。此外，诸多环境的生物化学损害也可通过破坏角膜内皮紧密连接引发角膜炎性反应［54］。2.眼科疾病：眼科疾病中，多种角膜内皮营养不良疾病均与紧密连接相关。Fuchs内皮营养不良（Fuchsendothelialcornealdystrophy，FECD）患者的血房水屏障功能较正常人存在一定程度下降，这种功能下降在白内障手术术后会表现得更为明显［55］。需要补充的是，FECD的临床风险评估已越来越强调：即便ECD尚“看似足够”，但内皮泵/屏障功能可能已下降，术后仍可能发生持续性角膜水肿并进展至失代偿。与此一致，Scheimpflug断层成像可检出FECD的亚临床水肿并提出分型（“明确水肿/亚临床水肿/无水肿”），该分型被建议用于评估FECD白内障手术风险［56］。此外，进一步研究显示，基于Scheimpflug地图特征的参数组合可预测FECD的进展与干预风险，并提示“功能性水肿/屏障异常”信息可独立于单纯中央角膜厚度指标［57］。另有研究者在紫外线损伤造模的Fuchs内皮营养不良小鼠上发现了ZO1的丢失和角膜水肿［5859］，但尚未有研究者在FECD患者中确认此事。滴状角膜营养不良（gelatinousdroplikecornealdystrophy，GDLD）的角膜内皮间紧密连接也曾被报道出现异常［60］，且这种细胞间连接的缺失与TACSTD2基因突变相关。先天性角膜内皮营养不良（congenitalhereditaryendothelialdystrophy，CHED）患者发生角膜水肿也与紧密连接的功能丧失有关，已有研究发现其关键致病基因Slc4a11可导致紧密连接和黏合连接的表达紊乱［9，61］，这可能进一步引发细胞AJC的结构和功能紊乱。这一系列报道提示，角膜内皮细胞间连接的破坏可能是先天性角膜内皮营养不良导致角膜水肿的关键环节。在无菌性角膜炎性反应模型中，角膜内皮ZO1表达在24h下降，但ECD在24h和1周均未改变，却已出现角膜厚度升高［4］。这类证据提示，临床上部分炎性反应相关术后或发作期角膜水肿，可能首先源于紧密连接/屏障结构的可逆性损伤，而非“细胞数量不足”。在内毒素诱导葡萄膜炎（endotoxininduceduveitis，EIU）模型中，角膜内皮ZO1与occludin表达降低且分布更不均一，呈现内皮细胞连接破坏［62］，进一步从“连接蛋白层面”支持炎性反应可直接导致内皮细胞间连接紊乱并促发水肿。病毒相关前节葡萄膜炎或角膜内皮炎也开始出现“连接/屏障参与”的机制证据：研究在培养的人角膜内皮细胞中观察到，巨细胞病毒感染可显著损伤细胞细胞接触并损害屏障完整性，且该过程与TNFαRhoAROCK信号相关，ROCK抑制剂可部分减轻这种“细胞间接触/屏障”受损［63］。这为临床上巨细胞病毒相关发作期角膜水肿提供了更“结构化”的解释：除细胞丢失外，内皮细胞间连接紊乱本身可能就是水肿的重要促发环节。眼压急剧升高相关角膜水肿（如急性高眼压或青光眼发作）方面，近年也有更直接的“紧密连接结构”证据：多尺度成像研究以ZO1标记紧密连接，提出并量化“部分扭曲/完全扭曲”的紧密连接结构类型，发现紧密连接扭曲比例与角膜水肿程度相关［64］。近年来，研究者开始尝试用更可量化的结构参数反映内皮屏障完整性，例如提出以“Y型连接”（Yjunctions）面积作为屏障受损的敏感指标，并在动物模型与临床内皮相关疾病中观察到其增大与通透性增强、角膜厚度增加等相关［65］。（二）细胞间连接在疾病治疗中的作用1.在角膜移植中的作用：角膜内皮细胞间连接在角膜移植中的作用尤为突出，是移植角膜成活与透明度的决定因素之一，直接影响术后效果。研究表明，角膜移植过程中，供体角膜内皮细胞的紧密连接和缝隙连接的完整性与移植成活率和术后视力恢复密切相关［66］；有研究发现，低温保存供体角膜可能导致内皮细胞紧密连接的降解［4142］。因此，评估移植角膜内皮细胞间连接的功能变化成为评估角膜移植预后和术后管理的重要手段。2.角膜内皮移植的替代疗法：随着对角膜内皮细胞间连接机制理解的逐步深入，角膜内皮细胞再生治疗已成为近年研究热点。角膜内皮体外诱导再生的成功依赖于一系列角膜内皮细胞表面标志物的表达，紧密连接蛋白ZO1、ZO2及黏合连接蛋白N钙黏素是体外培养角膜内皮细胞重要的表型评估蛋白［46，6769］。这一点对角膜移植研究尤为重要，尤其是在诸多有望替代供体角膜的移植物研发中，细胞间连接蛋白的表达是必不可少的评估指标。除此之外，角膜内皮失代偿的其他治疗策略也在不断探索，例如角膜内皮细胞修复治疗（如基因疗法、干细胞疗法等）可通过修复损伤的细胞间连接恢复角膜内皮功能，进而改善角膜透明度和视力［70］。3.逆转角膜内皮连接失代偿的药物研究进展：基于诸多眼科疾病与紧密连接的密切关系，已有研究者开始探索能够保护内皮紧密连接的药物。其中，Rho相关蛋白激酶抑制剂（Rhoassociatedproteinkinaseinhibitor，ROCKi）相关研究曾备受关注。紧密连接屏障受肌球蛋白轻链（myosinlightchain，MLC）磷酸化状态的高度调控［7172］，磷酸化的MLC会导致紧密连接紊乱和细胞旁通路开放；这一磷酸化过程主要由肌球蛋白轻链激酶（myosinlightchainkinase，MLCK）和肌球蛋白轻链磷酸酶（myosinlightchainphosphatase，MLCP）控制。ROCK通过磷酸化MLCP亚基抑制MLCP，从而减少MLC的去磷酸化，而ROCK抑制剂可阻断这一过程，进而减少紧密连接的开放［72］。由于上述紧密连接开放的细胞通路（图1）已逐渐被证实，ROCK抑制剂作为可阻断其中关键环节的试剂，已在诸多研究中崭露头角［7375］，被证实可有效保护紧密连接，防止因紧密连接疏松造成的渗漏［26，7677］。见图1。在眼科领域，ROCK抑制剂也备受关注［77］，其代表性药物为利匹舒地尔（Ripasudil）［78］，该药已在日本获批用于青光眼治疗。诸多学者已发现该药物对角膜内皮的保护作用［7981］，但由于其同时可抑制内皮间质细胞转化及降低眼压［82］，其对内皮的保护作用可能是多种机制共同作用的结果。除此之外，其他类型的ROCK抑制剂也被证实具有相似作用［8384］。综合现有文献结论，角膜内皮细胞间连接相关研究主要集中于缝隙连接及紧密连接两个方向：缝隙连接主要与角膜的发育及损伤修复相关，通过维持细胞间通讯保障内皮细胞的内稳态结构与功能；紧密连接主要与角膜自然脱水相关，调控房水中的水分子和营养物质通过内皮层进入角膜基质层，维持角膜透明。此外，细胞间连接的破坏还与多种眼科疾病及全身疾病相关，是内皮功能受损的生物标志物。然而，这些基础研究与临床实践之间仍存在较大差距，角膜内皮疾病中细胞间连接的损伤机制，以及能否通过细胞间连接的机制研究指导临床治疗，均是未来需要解决的问题。参考文献[1]KlyceSD.12.Endothelialpumpandbarrierfunction[J].ExpEyeRes,2020,198:108068.DOI:10.1016/j.exer.2020.108068.[2]KohSW,CelesteJ,KuCY.FunctionalCNTFreceptoralphasubunitrestoredbyitsrecombinantincornealendothelialcellsinstoredhumandonorcorneas:Connexin-43upregulation[J].InvestOphthalmolVisSci,2009,50(4):1801-1807.DOI:10.1167/iovs.08-2590.[3]Mejía-SalgadoG,Muñoz-VargasPT,Cifuentes-GonzálezC,etal.Quantitativechangesinthecornealendotheliumandcentralcornealthicknessduringanteriorchamberinflammation:asystematicreviewandmeta-analysis[J].PLoSOne,2024,19(1):e0296784.DOI:10.1371/journal.pone.0296784.[4]DownieLE,ChoiJ,LimJK,etal.Longitudinalchangestotightjunctionexpressionandendothelialcellintegrityinamousemodelofsterilecornealinflammation[J].InvestOphthalmolVisSci,2016,57(7):3477-3484.DOI:10.1167/iovs.15-19005.[5]MandellKJ,HolleyGP,ParkosCA,etal.Antibodyblockadeofjunctionaladhesionmolecule:ainrabbitcornealendothelialtightjunctionsproducescornealswelling[J].InvestOphthalmolVisSci,2006,47(6):2408-2416.DOI:10.1167/iovs.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