2022-2023学年高中生物人教版(2019)选修三第1章试卷2

2022-2023学年高中生物人教版（2019）选修三第1章单元测试卷2一．选择题（共15小题）1．下列有关泡菜和酸奶的相关制作，叙述正确的是（）A．生产上常用乳酸链球菌发酵酸奶 B．含有抗生素的牛奶可以发酵成酸奶 C．制作过程中要保证乳酸菌的有氧呼吸 D．泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量先增加后减少2．关于白酒、啤酒和果酒的生产，下列叙述错误的是（）A．在白酒、啤酒和果酒的发酵初期需要提供一定的氧气 B．白酒、啤酒和果酒酿制的过程也是微生物生长繁殖的过程 C．葡萄糖转化为乙醇所需的酶既存在于细胞质基质，也存在于线粒体 D．生产白酒、啤酒和果酒的原材料不同，但发酵过程中起主要作用的都是酵母菌3．下列对腐乳实验操作过程的叙述，错误的是（）A．前期发酵，将笼屉中的温度控制在15～18℃ B．豆腐块分层摆放，逐层加盐，层数加高盐量不变 C．卤汤中的酒量应控制在12%左右 D．腌制腐乳的玻璃瓶冲洗后要用沸水消毒，装瓶后密封，瓶口通过酒精灯火焰4．关于发酵过程产物检验的说法，正确的是（）A．果汁发酵是否产生酒精，可用NaOH来检验 B．检验醋酸产生的简单易行的方法是品尝或用pH试纸鉴定 C．泡菜制作过程中亚硝酸盐的含量不能测定 D．测定果酒、果醋的产生和亚硝酸盐的含量均可用品尝法5．下列关于菌种的选育和扩大培养的叙述，错误的是（）A．用于发酵工程中的菌种都是多种菌种 B．生产柠檬酸需要筛选产酸量高的黑曲霉 C．具有优良性状的菌种可以通过诱变育种或基因工程育种而获得 D．工业发酵罐的体积很大，因此需要在发酵之前对菌种扩大培养6．制作四川泡菜时要用特殊的坛子，坛子需加水密封，密封坛口的目的是（）A．隔绝空气，抑制细菌繁殖 B．阻止尘埃，防止污染 C．造成缺氧环境，利于乳酸菌发酵 D．防止污染，利于醋酸菌发酵7．腐乳是我国独特的传统发酵食品，用豆腐发酵制作而成。下列说法错误的是（）A．酵母菌参与了豆腐发酵，其代谢类型与毛霉不同 B．制作过程中加入的盐、酒都有抑制微生物生长的作用 C．豆腐块分层整齐摆放在瓶中，随着层数加高而增加盐量 D．微生物产生的脂肪酶能将豆腐中的脂肪分解为甘油和氨基酸8．用下表培养基成分培养某种微生物，下列有关说法错误的是（）编号①②③④⑤成分（NH4）2SO4KH2PO4FeSO4CaCl2H2O含量/g0.44.00.50.5100mLA．此培养基可用来培养自养型微生物 B．表中的营养成分有水、无机盐和氮源 C．用此培养基可直接培养出肉眼可见的菌落 D．若加入蛋白胨，则它可提供碳源、氮源和维生素9．近年来，苹果醋、梨醋等成为果醋市场新贵，该产品由水果汁经“两次发酵”而成。下列关于“两次发酵”的叙述，正确的是（）A．第一次发酵指乳酸发酵，第二次发酵指醋酸发酵 B．第一次发酵pH逐渐升高，第二次发酵pH逐渐降低 C．两次发酵的主要微生物均为单细胞原核生物 D．第二次发酵的温度比第一次发酵的温度高10．如图为葡萄酒发酵实验装置，下列相关叙述错误的是（）A．在发酵过程中，需关闭气阀a B．制作葡萄酒时，葡萄先冲洗后除去枝梗 C．若继续用此装置制作葡萄醋，需将温度调整为18～20℃ D．d管长而弯曲，可防止空气中微生物的污染11．如图为某同学设计的酿制苹果醋的基本流程图和发酵装置示意图。下列相关分析正确的是（）A．①过程要先切块后清洗以减少杂菌的污染 B．③过程需要将发酵装置中的充气口开关打开 C．②过程发酵所用的酵母菌无具膜结构的细胞器 D．②过程中为保证无氧环境，应将发酵装置中发酵瓶装满12．在制果酒、果醋、泡菜、腐乳时，发酵过程中对氧气的需求分别是（）A．无氧、有氧、无氧、有氧 B．有氧、无氧、无氧、有氧 C．无氧、有氧、有氧、无氧 D．兼氧、无氧、有氧、无氧13．《齐民要术》记载了一种称为“动酒酢法”（“酢”同“醋”）的酿醋工艺：“大率酒一斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之。七日后当臭，衣（指菌膜）生，勿得怪也，但停置，勿移动，挠搅之。数十日，醋成”。下列叙述错误的是（）A．该方法依据的原理是醋酸菌在氧气、糖源充足时将酒精转化为醋酸 B．加水的目的是对酒进行稀释，避免渗透压过高醋酸菌失水过多 C．“衣”位于变酸的酒表面，是由原酒中的醋酸菌大量繁殖形成的 D．挠搅有利于酒精与醋酸菌充分接触，还可以增加溶液中的溶解氧14．下列哪项操作会引起发酵液受污染（）A．榨汁机只用温水进行清洗，并晾干 B．发酵瓶先用温水清洗，再用75%的酒精擦拭后晾干使用 C．葡萄先去除枝梗，再冲洗多次 D．每次排气时，只需拧松瓶盖，不能将盖完全揭开15．影响发酵工程的因素很多，下列叙述错误的是（）A．发酵工程需考虑培养基的来源和转化效率 B．培养基中各营养物质的比例也会影响微生物的生长 C．发酵生产中，需要随时监控影响发酵过程的各种环境条件 D．选育获得优良菌种后，可以长期传代并用于大规模发酵生产中二．多选题（共5小题）（多选）16．古往今来，酒一直是人们喜欢的发酵食品之一，下列错误的是（）A．果酒制作完成后，可以通过改变发酵条件继续进行果醋发酵 B．工业化生产啤酒流程中的发酵过程分为先发酵和后发酵两个阶段 C．转基因技术已被用来减少啤酒酵母双乙酰的生成，缩短啤酒的发酵周期 D．家庭酿造果酒时，发酵液装满后要拧紧瓶口，严禁漏气，利于发酵（多选）17．在微生物培养过程中利用培养基为画布、细菌为颜料可以创作艺术图形。由于细菌绝大部分是无色的，研究人员根据目标菌所特有的糖苷水解酶，将发色物质或荧光分子通过糖苷键与糖分子连接合成特定的显色底物（通常为无色）添加于培养基中，培养目标菌后呈现出一定的颜色。下列说法正确的是（）A．作画时用到的培养基和用作画具的接种工具均需经过高压蒸汽灭菌处理 B．显色培养基属于选择培养基 C．图形能够发色或发出荧光可能的原因是目标菌分解显色底物后释放出发色物质或荧光基团 D．作画结束后接种过微生物的培养基需要先灭菌再丢弃（多选）18．地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨，其中40%～60%能被土壤中产生纤维素酶的某些微生物分解利用。刚果红染液可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不与水解后的纤维二糖、葡萄糖等发生这种反应。在含有纤维素的培养基中加入刚果红，刚果红与纤维素形成红色复合物；而当纤维素被纤维素分解菌分解后，复合物就无法形成，培养基中会出现以这些菌为中心的透明圈（如图所示），下列关于纤维素分解菌的分离与计数实验，叙述错误的是（）A．分离纤维素分解菌的选择培养基应以纤维素为唯一碳源 B．对纤维素分解菌计数时应选择菌落数在30～300之间 C．采用平板划线法统计平板上菌落数，统计值比活菌实际数高 D．通过比较得知，菌落②中的菌株分解纤维素能力最强（多选）19．腊肉是我国传统美食，先秦经典《易经》里提到“晞于阳而炀于火，日腊肉”，说的便是将肉放在阳光下晒去水分后放入火中烘烤，就叫作腊肉。传统制作时还需三类调料：高度白酒，盐、香料等。下列有关说法正确的是（）A．“晞于阳”“炀于火”的目的是去除水分，防止腌制过程中杂菌滋生 B．高度白酒除了能给腊肉带来浓郁香味外，还可以起到灭菌，防腐的作用 C．在加盐腌制的过程中，细菌等微生物会因渗透失水而失去活性 D．质检时可采用平板划线法对腊肉中的微生物进行检测计数（多选）20．粗饲料经过微生物发酵后，其富含的纤维素、半纤维素和果胶等物质被降解为小分子。易于被畜禽采食和消化吸收，用于饲料发酵的益生菌包括乳酸菌和酵母菌等。生产发酵饲料的大致过程：将适量粗饲料、益生菌和清水等拌匀，放入发酵池或容器中，然后密封发醉，已知乳酸菌产生的乳酸能溶解碳酸钙，以下相关说法正确的是（）A．发酵过程中粗饲料可为益生菌的生长提供碳源 B．酵池应该留有排气口，防止乳酸菌发酵产生大量气体导致爆炸 C．酵母菌和乳酸菌在发酵液中的位置不同。酵母菌偏向上层 D．可用含有碳酸钙的鉴别培养基，并根据透明圈初步筛选出益生菌中的乳酸菌三．填空题（共1小题）21．尿素是一种重要的农业肥料，经微生物分解后能更好的被植物利用。某生物兴趣小组试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计实验并成功筛选到能高效分解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如下表所示。KH2PO4NaHPO4MgSO4•7H2O葡萄糖尿素琼脂1.4g2.1g0.2g10glg15g将表中物质溶解后，用蒸馏水定容到100mL．实验过程如图所示：回答下列问题：（1）该培养基能筛选出目的菌的原因是。（2）图中将细菌转到固体培养基上接种时，可采用的方法是。初步筛选出来的菌种还需要进一步的鉴定：在培养基中加入指示剂，接种并培养初步筛选的菌种，若指示剂变成色，则可说明该菌种能够分解尿素。（3）在实验中，下列材料或用具需要灭菌的是，需要消毒的是（填序号）。①培养细菌的培养基与培养皿②玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管③实验操作者的双手（4）在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约50个菌落，而其他同学只选择出大约20个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有（填序号）。①所取土样不同②培养基被污染③接种操作错误④没有设置对照实验（5）实验结束后，使用过的培养基应该进行处理后，才能倒掉。四．实验题（共2小题）22．苯酚（C6H5OH）是一种工业生产排放、装修材料释放的有毒污染物质，其对皮肤、黏膜有强烈的腐蚀作用，对人体危害极大。某污水处理厂检测出要处理的废水中含有较高浓度的苯酯，为了降解废水中的苯酚，研究人员欲从淤泥中筛选出能高效降解苯酚的菌株，筛选的主要步骤如图所示，请回答下列问题：（1）在实验时，需要把培养基放入中进行灭菌，灭菌15﹣30分钟，待培养基冷却至左右时，在酒精灯火焰附近倒平板；在甲中加入了使其与乙物理性质不同；甲、乙两种培养基按用途分均属于培养基。（2）实验中初步估测瓶C中细菌细胞数为1×108个/mL，若要在每个平板上涂布0.1mL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过100个，则至少应将瓶C中的菌液稀释倍；涂布平板后，通常要将甲倒置培养，其目的除防止之外，还能防止培养基中的水分过快挥发。（3）在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的苯酚超过某一浓度时，细菌对苯酚的降解量反而下降，其原因可能是。23．饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用。若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等。以下是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程示意图。请分析作答。（1）培养基中除了添加、以外，应含有碳源、氮源、水、无机盐等基本营养物质。（2）对培养基进行灭菌常用的方法是。（3）接种前进行的一系列操作，目的是。统计平板上的菌落数，就能大致推测出样品中的活菌数。通常每种稀释液需涂布3个平板，取其平均值，若将最后一个试管中的菌液每次吸取0.1mL涂布培养后获得平均值是a，则1g土壤中含有此菌的菌株数是。该方法统计获得的菌落数比实际的活菌数，原因是。（4）若要对上述菌株进行进一步纯化，通常使用的划线工具是；接种时，在第一区域划线后须将该工具后再划线。（5）产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶。实验结果显示A～E五种菌株中，是产植酸酶最理想的菌株。五．解答题（共2小题）24．[选修1：生物技术实践]为了提高牛粪中的纤维素降解效率，筛选牛粪发酵菌剂的优良菌种，研究人员从牛粪中对纤维素降解菌株进行初步分离，获得了能高效分解纤维素的菌株，并测定其纤维素酶活力，再结合菌落形态等特征进行菌种鉴定。请回答下列问题：（1）取新鲜牛粪样品10g，加入装有90mL无菌水的锥形瓶中，将锥形瓶固定在上，在37℃下振荡培养2～3d，进行选择培养。选择培养的目的是。（2）吸取锥形瓶中的培养液1mL，加入盛有mL无菌水的试管中混匀进行稀释，依次稀释到108倍稀释度。取不超过mL的105、106、107倍稀释度的稀释液分别涂布于羧甲基纤维素钠培养基上，于37℃恒温培养箱中培养24h。（3）用接种环挑取颜色、形态不一的单菌落，使用法接种到羧甲基纤维素钠培养基上继续培养，重复2～3次，直至得到较纯的菌株。再挑选单菌落于增菌培养基中培养24h，吸取2μL点种到羧甲基纤维素钠平板中培养48h后，将培养基用溶液覆盖，10min后，倒去该溶液，再加入NaCl溶液，15min后倒去NaCl溶液，测定透明圈的直径（H）和菌落直径（C），若数值大，则说明菌体增殖速率快，若比值大，则说明菌体分解纤维素的能力强。（4）对筛选出的菌株还要进行鉴定和酶活力测定，1个酶活力单位是指在温度为25℃，其他条件均为最适的情况下，。25．腐乳是我国古代劳动人民创造出的一种经过微生物发酵的大豆食品，该食品味道鲜美，易于消化吸收，而腐乳本身又便于保存，所以深受人们的喜欢。如下是腐乳制作的流程，根据流程回答问题。让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→？→密封腌制（1）在豆腐上长出毛霉时，温度控制在℃，毛霉是核生物，代谢类型为。流程图中未写出的流程是。（2）含水量为左右的豆腐适合用来做腐乳。制作过程中，加盐的作用是。（3）传统工艺制作腐乳，豆腐块上的毛霉来自，现代工艺生产腐乳是在严格的条件下，将优良的毛霉菌种直接接种在豆腐上。（4）吃腐乳时，你会发现腐乳外部有一层致密的“皮”，这层“皮”是。

2022-2023学年高中生物人教版（2019）选修三第1章单元测试卷2参考答案与试题解析一．选择题（共15小题）1．下列有关泡菜和酸奶的相关制作，叙述正确的是（）A．生产上常用乳酸链球菌发酵酸奶 B．含有抗生素的牛奶可以发酵成酸奶 C．制作过程中要保证乳酸菌的有氧呼吸 D．泡菜腌制过程中亚硝酸盐含量先增加后减少【考点】制作泡菜．【分析】泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。【解答】解：A、生产上常用乳酸杆菌发酵酸奶，A错误；B、抗生素会抑制乳酸菌的生长，故含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶，B错误；C、乳酸菌是厌氧菌，故制作过程中要保证乳酸菌的无氧呼吸，C错误；D、泡菜腌制过程中，发酵初期有一部分硝酸盐还原菌的活动，亚硝酸盐含量会增加，发酵中期由于乳酸的量大量积累，硝酸盐还原菌受到抑制，同时形成的亚硝酸盐又被分解，因而亚硝酸盐含量下降，故在整个发酵过程中，亚硝酸盐的含量表现为先增加后下降的趋势，D正确。故选：D。2．关于白酒、啤酒和果酒的生产，下列叙述错误的是（）A．在白酒、啤酒和果酒的发酵初期需要提供一定的氧气 B．白酒、啤酒和果酒酿制的过程也是微生物生长繁殖的过程 C．葡萄糖转化为乙醇所需的酶既存在于细胞质基质，也存在于线粒体 D．生产白酒、啤酒和果酒的原材料不同，但发酵过程中起主要作用的都是酵母菌【考点】果酒、果醋的制作．【分析】酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～25℃；生产中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。【解答】解：A、在白酒、啤酒和果酒的发酵初期需要提供一定的氧气，有利于酵母菌大量繁殖，A正确；B、白酒、啤酒和果酒酿制的过程也是微生物生长繁殖的过程，如发酵初期酵母菌大量繁殖，B正确；CD、酒精发酵利用的菌种是酵母菌，其原理是酵母菌进行无氧呼吸产生酒精，葡萄糖转化为乙醇所需的酶存在于细胞质基质，不存在线粒体中，C错误，D正确。故选：C。3．下列对腐乳实验操作过程的叙述，错误的是（）A．前期发酵，将笼屉中的温度控制在15～18℃ B．豆腐块分层摆放，逐层加盐，层数加高盐量不变 C．卤汤中的酒量应控制在12%左右 D．腌制腐乳的玻璃瓶冲洗后要用沸水消毒，装瓶后密封，瓶口通过酒精灯火焰【考点】发酵工程在食品、医药、农牧业等工业上的应用．【分析】腐乳制作过程中盐、香辛料、酒精均可起到抑制杂菌生长的作用，由于越接近瓶口，微生物污染越重，故豆腐加盐时，越近瓶口处盐用量越多。【解答】解：A、前期发酵，将笼屉中的温度控制在15℃～18℃，此温度不适于细菌、酵母菌和曲霉的生长，而适于毛霉慢慢生长，A正确；B、豆腐块分层摆放，逐层加盐，层数加高而增加盐量，接近瓶口表面的盐要铺得厚一些，以防止杂菌从瓶口进入，B错误；C、卤汤中的酒应控制在12%左右，酒精含量过高，腐乳成熟的时间将会延长；酒精含量过低，不足以抑制微生物的生长，可能导致豆腐腐败，C正确；D、腌制腐乳的玻璃瓶冲洗后用沸水消毒，装瓶后密封，瓶口通过酒精灯火焰，D正确。故选：B。4．关于发酵过程产物检验的说法，正确的是（）A．果汁发酵是否产生酒精，可用NaOH来检验 B．检验醋酸产生的简单易行的方法是品尝或用pH试纸鉴定 C．泡菜制作过程中亚硝酸盐的含量不能测定 D．测定果酒、果醋的产生和亚硝酸盐的含量均可用品尝法【考点】制作泡菜．【分析】1、酿酒反应中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。2、测定亚硝酸盐含量的原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N﹣1﹣萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测对比，可以大致估算出亚硝酸盐的含量。【解答】解：A、果汁发酵是否产生酒精，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色，A错误；B、醋的生产过程中，醋酸菌产生的醋酸会使溶液呈现酸味或pH下降，故检验醋酸产生的简单易行的方法是品尝或用pH试纸鉴定，B正确；C、泡菜制作过程中亚硝酸盐的含量可利用比色法大概估算，C错误；D、亚硝酸盐无色无味，不能通过品尝的方法去测定亚硝酸盐的含量，D错误。故选：B。5．下列关于菌种的选育和扩大培养的叙述，错误的是（）A．用于发酵工程中的菌种都是多种菌种 B．生产柠檬酸需要筛选产酸量高的黑曲霉 C．具有优良性状的菌种可以通过诱变育种或基因工程育种而获得 D．工业发酵罐的体积很大，因此需要在发酵之前对菌种扩大培养【考点】发酵工程在食品、医药、农牧业等工业上的应用．【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配置、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯（生物分离工程）等方面。【解答】解：A、用于发酵工程中的菌种大多是单一菌种，A错误；B、生产柠檬酸需要筛选产酸量高的黑曲霉，B正确；C、用于发酵的菌种可以从自然界中筛选出来，也可以通过诱变育种或基因工程育种获得，C正确；D、工业发酵罐体积较大，必须接种足量的菌种才能保证其产量，需要的菌种数量较多，通常在发酵之前需要对菌种进行扩大培养，D正确。故选：A。6．制作四川泡菜时要用特殊的坛子，坛子需加水密封，密封坛口的目的是（）A．隔绝空气，抑制细菌繁殖 B．阻止尘埃，防止污染 C．造成缺氧环境，利于乳酸菌发酵 D．防止污染，利于醋酸菌发酵【考点】制作泡菜．【分析】泡菜的制作原理：泡菜制作离不开乳酸菌．在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。【解答】解：制作泡菜时要用到乳酸菌，乳酸菌发酵产生乳酸，使得菜具有特殊的风味，乳酸菌是厌氧菌，分解有机物是不需要氧气的，因此泡菜坛要加盖并用一圈水来封口，以避免外界空气的进入，制造缺氧环境，利用乳酸菌发酵，否则如果有空气进入，就会抑制乳酸菌的活动，影响泡菜的质量，C正确。故选：C。7．腐乳是我国独特的传统发酵食品，用豆腐发酵制作而成。下列说法错误的是（）A．酵母菌参与了豆腐发酵，其代谢类型与毛霉不同 B．制作过程中加入的盐、酒都有抑制微生物生长的作用 C．豆腐块分层整齐摆放在瓶中，随着层数加高而增加盐量 D．微生物产生的脂肪酶能将豆腐中的脂肪分解为甘油和氨基酸【考点】发酵工程在食品、医药、农牧业等工业上的应用．【分析】1、腐乳的制作利用的微生物主要是毛霉，多种微生物参与了豆腐的发酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸，这些小分子物质有利于人体的消化和吸收。2、腐乳的制作过程主要是：让豆腐上长出毛霉→加盐腌制→加卤汤装瓶→密封腌制。（1）让豆腐上长出毛霉：将豆腐块平放在笼屉内，将笼屉中的温度控制在15～18℃，并保持在一定的湿度．约48h后，毛霉开始生长，3d之后菌丝生长旺盛，5d后豆腐块表面布满菌丝。豆腐块上生长的毛霉来自空气中的毛霉孢子。（2）加盐腌制：将长满毛霉的豆腐块分层整齐地摆放在瓶中，同时逐层加盐，随着层数的加高而增高盐量，接近瓶口表面的盐要铺厚一些．加盐研制的时间约为8d左右。加盐可以析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，在后期的制作过程中不会过早酥烂。同时，盐能抑制微生物的生长，避免豆腐块腐败变质。（3）加卤汤装瓶：卤汤直接关系到腐乳的色、香、味。卤汤是由酒及各种香辛料配制而成的。卤汤中的酒可以选用料酒、黄酒、米酒、高粱酒等，含量一般控制在12%左右。加酒可以抑制微生物的生长，同时能使腐乳具有独特的香味。香辛料种类很多，如胡椒、花椒、八角、桂皮、姜、辣椒等。香辛料可以调制腐乳的风味，也具有防腐杀菌的作用。可据个人口味配置卤汤。（4）密封腌制。【解答】解：A、腐乳的制作过程中，多种微生物参与了豆腐的发酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，代谢类型是异养需氧型，酵母菌的同化作用属于异养型，异化作用是兼性异氧型，A正确；B、制作中盐浓度过高会影响腐乳的口味，盐浓度过低，腐乳易腐败变质。酒精含量过高，使腐乳成熟期延长，酒精含量过低，不足以抑制微生物生长，豆腐易腐败，加入的盐、酒都有抑制微生物生长的作用，B正确；C、装瓶时，操作要迅速、小心，且要逐层加盐，靠近瓶口表面的盐要铺厚一些，C正确；D、毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸，D错误。故选：D。8．用下表培养基成分培养某种微生物，下列有关说法错误的是（）编号①②③④⑤成分（NH4）2SO4KH2PO4FeSO4CaCl2H2O含量/g0.44.00.50.5100mLA．此培养基可用来培养自养型微生物 B．表中的营养成分有水、无机盐和氮源 C．用此培养基可直接培养出肉眼可见的菌落 D．若加入蛋白胨，则它可提供碳源、氮源和维生素【考点】选择培养基．【分析】培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求。【解答】解：A、由培养基配方表可知，该培养基中不含有机碳源，能够用来培养自养型微生物，A正确；B、培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐，该培养基中不含有机碳源，含有水、无机盐和氮源，B正确；C、该培养基中不含凝固剂，属于液体培养基，若要形成菌落，需要使用固体培养基，C错误；D、蛋白胨来源于动物原料，含有糖、维生素和有机氮等营养物质，若加入蛋白胨，则它可提供碳源、氮源和维生素，D正确。故选：C。9．近年来，苹果醋、梨醋等成为果醋市场新贵，该产品由水果汁经“两次发酵”而成。下列关于“两次发酵”的叙述，正确的是（）A．第一次发酵指乳酸发酵，第二次发酵指醋酸发酵 B．第一次发酵pH逐渐升高，第二次发酵pH逐渐降低 C．两次发酵的主要微生物均为单细胞原核生物 D．第二次发酵的温度比第一次发酵的温度高【考点】果酒、果醋的制作．【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型．果酒制作的原理：（1）在有氧条件下，反应式如下：C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2O+能量；（2）在无氧条件下，反应式如下：C6H12O62CO2+2C2H5OH+能量。2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型．果醋制作的原理：醋酸菌是一种好氧性细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。【解答】解：第一次发酵指酒精发酵，所用微生物为酵母菌，是单细胞真核生物，适宜的发酵温度是18～25℃，无氧呼吸发酵产物是酒精和CO2，会使发酵液的pH降低；第二次发酵指醋酸发酵，所用的微生物醋酸菌属于单细胞原核生物，在糖源不足、氧气充足的情况下，可将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，会使发酵液的pH下降，适宜的发酵温度是30～35℃。故选：D。10．如图为葡萄酒发酵实验装置，下列相关叙述错误的是（）A．在发酵过程中，需关闭气阀a B．制作葡萄酒时，葡萄先冲洗后除去枝梗 C．若继续用此装置制作葡萄醋，需将温度调整为18～20℃ D．d管长而弯曲，可防止空气中微生物的污染【考点】果酒、果醋的制作．【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型．果酒制作的原理：（1）在有氧条件下，反应式如下：C6H12O6+6H2O+6O26CO2+12H2O+能量；（2）在无氧条件下，反应式如下：C6H12O62CO2+2C2H5OH+能量。2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型．果醋制作的原理：醋酸菌是一种好氧性细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动．当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸．当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。【解答】解：A、酵母菌进行酒精发酵需要无氧的环境，所以要关闭气阀a，A正确；B、制作葡萄酒时，葡萄先除去枝梗后冲洗，可避免除去枝梗时引起葡萄破损，增加被杂菌污染的机会，B正确；C、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其最适发酵温度为30～35℃，C错误；D、d管是排气管，其长而弯曲是为了防止防止空气中微生物的污染，D正确。故选：C。11．如图为某同学设计的酿制苹果醋的基本流程图和发酵装置示意图。下列相关分析正确的是（）A．①过程要先切块后清洗以减少杂菌的污染 B．③过程需要将发酵装置中的充气口开关打开 C．②过程发酵所用的酵母菌无具膜结构的细胞器 D．②过程中为保证无氧环境，应将发酵装置中发酵瓶装满【考点】果酒、果醋的制作．【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～25℃；反应中是否有酒精的产生，可用酸性重铬酸钾来检验，该物质与酒精反应呈现灰绿色。2、果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30～35℃。【解答】解：A、①过程要先清洗后切块，以减少杂菌的污染，若先切块，则内部组织可能被杂菌污染，A错误；B、由图观察可知，③过程是制作果醋，制作果醋利用的是醋酸菌，醋酸菌是好氧菌，故③过程需要将发酵装置中的充气口开关打开，B正确；C、②过程是利用酵母菌制作果酒，酵母菌是真核生物，含有具膜结构的细胞器，如：线粒体、内质网、高尔基体等，C错误；D、②过程是利用酵母菌制作果酒，利用的是酵母菌的无氧呼吸，故②过程需要保证无氧环境，但发酵瓶中留的空间以防止发酵时培养液溢出，D错误。故选：B。12．在制果酒、果醋、泡菜、腐乳时，发酵过程中对氧气的需求分别是（）A．无氧、有氧、无氧、有氧 B．有氧、无氧、无氧、有氧 C．无氧、有氧、有氧、无氧 D．兼氧、无氧、有氧、无氧【考点】果酒、果醋的制作；发酵工程在食品、医药、农牧业等工业上的应用；制作泡菜．【分析】1、参与果酒制作的微生物是酵母菌，其新陈代谢类型为异养兼性厌氧型。2、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。3、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。4、参与泡菜制作的微生物是乳酸菌，其其新陈代谢类型是异养厌氧型。【解答】解：（1）果酒制作时，酵母菌在发酵过程中进行无氧呼吸产生酒精；（2）醋酸菌是嗜氧菌，因此其在进行果醋发酵时需要有氧环境；（3）乳酸菌是厌氧型生物，其进行泡菜制作时需要无氧环境；（4）毛霉是需氧型微生物，其进行腐乳制作时需要有氧环境。故选：A。13．《齐民要术》记载了一种称为“动酒酢法”（“酢”同“醋”）的酿醋工艺：“大率酒一斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之。七日后当臭，衣（指菌膜）生，勿得怪也，但停置，勿移动，挠搅之。数十日，醋成”。下列叙述错误的是（）A．该方法依据的原理是醋酸菌在氧气、糖源充足时将酒精转化为醋酸 B．加水的目的是对酒进行稀释，避免渗透压过高醋酸菌失水过多 C．“衣”位于变酸的酒表面，是由原酒中的醋酸菌大量繁殖形成的 D．挠搅有利于酒精与醋酸菌充分接触，还可以增加溶液中的溶解氧【考点】果酒、果醋的制作．【分析】果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是—种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的葡萄糖分解为醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30﹣35℃。【解答】解：A、该方法的原理是醋酸菌在氧气充足、缺少糖源时可将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，A错误；B、加水的目的是对酒进行稀释，避免酒精浓度过高杀死醋酸菌（失水过多），B正确；C、醋酸菌对氧气的含量特别敏感，“衣”位于变酸的酒表面，是由原酒中的醋酸菌大量繁殖形成的，C正确；D、醋酸菌是一种好氧菌，挠搅有利于酒精与醋酸菌充分接触，还可以增加溶液中的溶解氧，D正确。故选：A。14．下列哪项操作会引起发酵液受污染（）A．榨汁机只用温水进行清洗，并晾干 B．发酵瓶先用温水清洗，再用75%的酒精擦拭后晾干使用 C．葡萄先去除枝梗，再冲洗多次 D．每次排气时，只需拧松瓶盖，不能将盖完全揭开【考点】果酒、果醋的制作．【分析】葡萄酒的制作过程：（1）材料的选择与处理：选择新鲜的葡萄，榨汁前先将葡萄进行冲洗，除去枝梗。（2）防止发酵液被污染：①榨汁机要清洗干净，并晾干。②发酵装置要清洗干净，并用70%的酒精消毒。（3）榨汁：将冲洗除枝梗的葡萄放入榨汁机榨取葡萄汁。（4）发酵：①将葡萄汁装入发酵瓶，要留要大约的空间，并封闭充气口。②在制葡萄酒的过程中，要将温度严格控制在18～25℃，时间控制在10～12d左右，可通过出料口对发酵的情况进行及时的监测。③在制葡萄醋的过程中，要将温度严格控制在30～35℃，时间控制在7～8d左右，并注意适时通过充气口充气。【解答】解：A、榨汁机只用温水进行清洗，并晾干，能够有效防止杂菌污染，A错误；B、发酵瓶先用温水清洗，再用75%的酒精擦拭后晾干使用，75%具有杀菌的作用，也能够防止杂菌污染，B错误；C、葡萄需要先进行冲洗，再除去枝梗，若葡萄先去除枝梗，再冲洗多次，去除枝梗时果皮破损，可能导致污染，C正确；D、每次排气时，只需拧松瓶盖，不能将盖完全揭开，以防止空气中的杂菌污染，D错误。故选：C。15．影响发酵工程的因素很多，下列叙述错误的是（）A．发酵工程需考虑培养基的来源和转化效率 B．培养基中各营养物质的比例也会影响微生物的生长 C．发酵生产中，需要随时监控影响发酵过程的各种环境条件 D．选育获得优良菌种后，可以长期传代并用于大规模发酵生产中【考点】发酵工程在食品、医药、农牧业等工业上的应用．【分析】发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节。在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程。还要及时添加必需的营养组分，要严格控制温度、pH和溶解氧等发酵条件。环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖，而且会影响微生物代谢物的形成。【解答】解：A、发酵工程需考虑培养基的来源和转化效率，这样才能获得比较大的产物，A正确；B、培养基中营养物质浓度合适时微生物才能生长良好，营养物质浓度过低时不能满足微生物正常生长所需，浓度过高时则可能对微生物生长起抑制作用，B正确；C、发酵过程中，由于微生物代谢过程中产生热量和代谢产物的积累，发酵环境不断变化，需随时检测影响发酵过程的各种环境条件，并予以控制，保证发酵的正常进行，C正确；D、选育获得优良菌种后，并不能长期传代使用，因为可能会发生变异，D错误。故选：D。二．多选题（共5小题）（多选）16．古往今来，酒一直是人们喜欢的发酵食品之一，下列错误的是（）A．果酒制作完成后，可以通过改变发酵条件继续进行果醋发酵 B．工业化生产啤酒流程中的发酵过程分为先发酵和后发酵两个阶段 C．转基因技术已被用来减少啤酒酵母双乙酰的生成，缩短啤酒的发酵周期 D．家庭酿造果酒时，发酵液装满后要拧紧瓶口，严禁漏气，利于发酵【考点】果酒、果醋的制作．【分析】果酒制作菌种是酵母菌，其代谢类型为异养兼性厌氧型。酵母菌在有氧条件下进行有氧呼吸大量繁殖，无氧条件下进行酒精发酵产生酒精。果醋制作菌种是醋酸菌，其代谢类型为异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将果汁中的糖分解成醋酸。当氧气充足，缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再变为醋酸。【解答】解：A、果酒制作完成后，通入氧气，调高温度到30～35℃，醋酸菌能将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，A正确；B、啤酒发酵整个过程分为主发酵阶段和后发酵阶段，B错误；C、双乙酰是啤酒中的一种有害风味物质，转基因技术已被用来减少啤酒酵母双乙酰的生成，缩短啤酒的发酵周期，C正确；D、葡萄汁装入发酵瓶时，要留约空间，目的是先让酵母菌进行有氧呼吸快速繁殖，耗尽O2后再进行酒精发酵，在发酵过程中每隔一段时间要拧松瓶盖，释放CO2，D错误。故选：BD。（多选）17．在微生物培养过程中利用培养基为画布、细菌为颜料可以创作艺术图形。由于细菌绝大部分是无色的，研究人员根据目标菌所特有的糖苷水解酶，将发色物质或荧光分子通过糖苷键与糖分子连接合成特定的显色底物（通常为无色）添加于培养基中，培养目标菌后呈现出一定的颜色。下列说法正确的是（）A．作画时用到的培养基和用作画具的接种工具均需经过高压蒸汽灭菌处理 B．显色培养基属于选择培养基 C．图形能够发色或发出荧光可能的原因是目标菌分解显色底物后释放出发色物质或荧光基团 D．作画结束后接种过微生物的培养基需要先灭菌再丢弃【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）；微生物的选择培养和计数．【分析】培养基按功能分为：种类制备方法特征用途选择培养基培养基中加入某种化学成分根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基使混合菌样中的劣势菌变成优势菌，从而提高该菌的筛选率加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌鉴别培养基加入某种试剂或化学药品依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计鉴别和区分菌落相似的微生物伊红和美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌【解答】解：A、作画时用到的培养基需用高压蒸汽灭菌法灭菌，接种工具需经过灼烧灭菌处理，A错误；B、显色培养基属于鉴别培养基，B错误；C、图形能够发色或发出荧光：目标细菌分解该底物后，释放出发色物质或者荧光基团，发色物质或荧光分子与培养基中糖分子通过糖苷键连接合成特定的显色底物，使目标菌着色或发出荧，C正确；D、作画结束后，丢弃已接种过微生物的培养基前，需要先进行灭菌，以免污染环境或对其他生物产生毒害，D正确。故选：CD。（多选）18．地球上的植物每年产生的纤维素超过70亿吨，其中40%～60%能被土壤中产生纤维素酶的某些微生物分解利用。刚果红染液可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不与水解后的纤维二糖、葡萄糖等发生这种反应。在含有纤维素的培养基中加入刚果红，刚果红与纤维素形成红色复合物；而当纤维素被纤维素分解菌分解后，复合物就无法形成，培养基中会出现以这些菌为中心的透明圈（如图所示），下列关于纤维素分解菌的分离与计数实验，叙述错误的是（）A．分离纤维素分解菌的选择培养基应以纤维素为唯一碳源 B．对纤维素分解菌计数时应选择菌落数在30～300之间 C．采用平板划线法统计平板上菌落数，统计值比活菌实际数高 D．通过比较得知，菌落②中的菌株分解纤维素能力最强【考点】发酵工程在食品、医药、农牧业等工业上的应用；微生物的选择培养和计数；微生物的选择培养（稀释涂布平板法）．【分析】分解纤维素的微生物分离实验原理：①土壤中存在着大量纤维素分解菌，包括真菌、细菌和放线菌等，它们可以产生纤维素酶。纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。故在用纤维素作为唯一碳源的培养基中，纤维素分解菌能够很好地生长，其他微生物则不能生长。②在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。【解答】解：A、要从土壤中分离纤维素分解菌，需要在以纤维素为唯一碳源的选择培养基中培养，A正确；B、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数，故对纤维素分解菌计数时应选择菌落数在30～300之间，B正确；C、平板划线法不能用于菌落计数，可采用稀释涂布平板法统计平板上菌落数，统计值比活菌实际数低，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，观察计数只能计为一个菌落，C错误；D、由图分析可知，降解圈和菌落直径比值越大，菌株分解纤维素的能力越强，故图中菌落①中的菌株分解纤维素能力最强，D错误。故选：CD。（多选）19．腊肉是我国传统美食，先秦经典《易经》里提到“晞于阳而炀于火，日腊肉”，说的便是将肉放在阳光下晒去水分后放入火中烘烤，就叫作腊肉。传统制作时还需三类调料：高度白酒，盐、香料等。下列有关说法正确的是（）A．“晞于阳”“炀于火”的目的是去除水分，防止腌制过程中杂菌滋生 B．高度白酒除了能给腊肉带来浓郁香味外，还可以起到灭菌，防腐的作用 C．在加盐腌制的过程中，细菌等微生物会因渗透失水而失去活性 D．质检时可采用平板划线法对腊肉中的微生物进行检测计数【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）；微生物的选择培养和计数．【分析】腊肉的制作过程关键在于去除水分，使细胞死亡，阻止细菌等微生物污染。平板划线可使部分菌体死亡，会降低检测计数，是分离细菌的办法，质检一般采用稀释涂布平板法。【解答】解：A、肉放在阳光下晒去水分后放入火中烘烤，目的是去除水分，使杂菌难以滋生，A正确；B、高度白酒能给腊肉带来浓郁香味，同时酒精可以杀死细胞，还可以起到灭菌，防腐的作用，B正确；C、在加盐腌制的过程中，肉表面渗透压过高，细菌等微生物会因渗透失水而失去活性，C正确；D、平板划线可使部分菌体死亡，会降低检测计数，是分离细菌的办法，质检一般采用稀释涂布平板法进行，且平板划线不能用来计数，D错误。故选：ABC。（多选）20．粗饲料经过微生物发酵后，其富含的纤维素、半纤维素和果胶等物质被降解为小分子。易于被畜禽采食和消化吸收，用于饲料发酵的益生菌包括乳酸菌和酵母菌等。生产发酵饲料的大致过程：将适量粗饲料、益生菌和清水等拌匀，放入发酵池或容器中，然后密封发醉，已知乳酸菌产生的乳酸能溶解碳酸钙，以下相关说法正确的是（）A．发酵过程中粗饲料可为益生菌的生长提供碳源 B．酵池应该留有排气口，防止乳酸菌发酵产生大量气体导致爆炸 C．酵母菌和乳酸菌在发酵液中的位置不同。酵母菌偏向上层 D．可用含有碳酸钙的鉴别培养基，并根据透明圈初步筛选出益生菌中的乳酸菌【考点】发酵工程在食品、医药、农牧业等工业上的应用；微生物的选择培养和计数．【分析】1、培养基的基本成分包括水、无机盐、碳源和氮源，此外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。2、选择培养基是在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质，抑制不需要的微生物的生长，有利于所需微生物的生长。【解答】解：A、粗饲料经过微生物发酵后，其富含的纤维素、半纤维素和果胶等物质被降解为小分子，故发酵过程中粗饲料可为益生菌的生长提供碳源，A正确；B、酵池应密封发醉，乳酸菌发酵产生乳酸，不会产生气体，B错误；C、酵母菌为兼性厌氧菌，乳酸菌为厌氧菌，在发酵液中的位置不同，酵母菌偏向上层，C正确；D、在含有碳酸钙的培养基上生长的乳酸菌菌落周围会出现“溶钙圈”，即以乳酸菌为中心的“透明圈”，D正确。故答案为：ACD。三．填空题（共1小题）21．尿素是一种重要的农业肥料，经微生物分解后能更好的被植物利用。某生物兴趣小组试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计实验并成功筛选到能高效分解尿素的细菌（目的菌）。培养基成分如下表所示。KH2PO4NaHPO4MgSO4•7H2O葡萄糖尿素琼脂1.4g2.1g0.2g10glg15g将表中物质溶解后，用蒸馏水定容到100mL．实验过程如图所示：回答下列问题：（1）该培养基能筛选出目的菌的原因是该选择培养基中的唯一氮源是尿素。（2）图中将细菌转到固体培养基上接种时，可采用的方法是稀释涂布平板法。初步筛选出来的菌种还需要进一步的鉴定：在培养基中加入酚红指示剂，接种并培养初步筛选的菌种，若指示剂变成红色，则可说明该菌种能够分解尿素。（3）在实验中，下列材料或用具需要灭菌的是①②，需要消毒的是③（填序号）。①培养细菌的培养基与培养皿②玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管③实验操作者的双手（4）在进行分离分解尿素的细菌实验时，A同学从培养基上筛选出大约50个菌落，而其他同学只选择出大约20个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有①②③（填序号）。①所取土样不同②培养基被污染③接种操作错误④没有设置对照实验（5）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理后，才能倒掉。【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）；微生物的选择培养和计数．【分析】从土壤中分离微生物的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株。选择培养基的目的是筛选目的菌，在固体培养基上接种的方法通常是稀释涂布平板法和平板划线法。接种过程中培养基、接种器具要灭菌，操作者的双手和环境要消毒。【解答】解：（1）选择培养基的是指在培养基上加入某种化学试剂，以抑制不需要微生物的生长，促进所需要微生物的生长。该培养基中加入尿素的目的是筛选出能分解尿素的细菌。（2）转为固体培养时常用的接种方法是涂布平板法或平板划线法。尿素分解菌可以用酚红指示剂进行鉴定，原因是其体内产生的脲酶能够将尿素转化为氨是酚红指示剂呈红色。（3）培养细菌用的培养基与培养皿，玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管需要进行灭菌处理；实验操作者的双手需要进行消毒。（4）该同学与其他同学获得的菌落数差异很大，可能的原因是采用的土样不同，培养基灭菌不彻底，培养基被污染；或者是实验过程中没有进行无菌操作。故选：①②③。（5）为避免污染环境与操作者，使用过的培养基应该进行灭菌处理后才能倒掉。故答案为：（1）该选择培养基中的唯一氮源是尿素（2）稀释涂布平板法酚红红（3）①②③（4）①②③（5）灭菌四．实验题（共2小题）22．苯酚（C6H5OH）是一种工业生产排放、装修材料释放的有毒污染物质，其对皮肤、黏膜有强烈的腐蚀作用，对人体危害极大。某污水处理厂检测出要处理的废水中含有较高浓度的苯酯，为了降解废水中的苯酚，研究人员欲从淤泥中筛选出能高效降解苯酚的菌株，筛选的主要步骤如图所示，请回答下列问题：（1）在实验时，需要把培养基放入高压蒸汽灭菌锅中进行灭菌，灭菌15﹣30分钟，待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板；在甲中加入了琼脂使其与乙物理性质不同；甲、乙两种培养基按用途分均属于选择培养基。（2）实验中初步估测瓶C中细菌细胞数为1×108个/mL，若要在每个平板上涂布0.1mL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过100个，则至少应将瓶C中的菌液稀释105倍；涂布平板后，通常要将甲倒置培养，其目的除防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染之外，还能防止培养基中的水分过快挥发。（3）在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的苯酚超过某一浓度时，细菌对苯酚的降解量反而下降，其原因可能是苯酚的浓度超过某一值时对菌体的生长起抑制作用。【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）；微生物的数量测定；微生物的选择培养和计数．【分析】1、微生物培养的接种：最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，可用来统计样品活菌数目的方法是稀释涂布平板法。2、选择培养基对微生物具有选择作用：配置培养基时根据某一种或某一类微生物的特殊营养要求，加入某些物质或出去某些营养物质，一直其他微生物的生长，也可以根据某些微生物对一些物理、化学因素的抗性，在培养基中加入某种化学物质，从而筛选出待定的微生物。这种培养基叫做选择培养基。【解答】解：（1）对培养基通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，在实验时，需要把培养基放入高压蒸汽灭菌锅中进行灭菌，灭菌15﹣30分钟，待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近（避免杂菌污染）倒平板；在甲中加入了琼脂使其与乙物理性质不同，因为琼脂起到了凝固剂的作用，即甲是固体培养基，乙是液体培养基；甲、乙两种培养基中都以苯酚作为唯一碳源，从而可将能分解苯酚的微生物选择出来，因此，二者均属于选择培养基。（2）实验中初步估测瓶C中细菌细胞数为1×108个/mL，若要在每个平板上涂布0.1mL稀释后的菌液，且保证每个平板上长出的菌落数不超过100个，则设稀释倍数为x，则根据公式C÷V×M，100÷0.1×x≈1×108，计算得x≈105，故应将瓶C中的菌液稀释105倍；涂布平板后，通常要将甲倒置培养，目的是防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，同时还能防止培养基中的水分过快挥发。（3）在步骤⑤的筛选过程中，发现当培养基中的苯酚超过某一浓度时，细菌对苯酚的降解量反而下降，则可能的原因是当苯酚的浓度超过某一值时对菌体的生长起抑制作用。故答案为：（1）高压蒸汽灭菌锅50℃琼脂选择（2）105皿盖上的水珠落入培养基造成污染（3）苯酚的浓度超过某一值时对菌体的生长起抑制作用23．饲养动物常用的植物饲料中含有难溶的植酸钙等物质，很难被动物吸收利用，还影响对其他营养物质的利用。若在饲料中添加植酸酶，则能催化其水解成为可以吸收利用的磷酸盐等。以下是科研人员从作物根部土壤中分离产植酸酶的菌株的过程示意图。请分析作答。（1）培养基中除了添加植酸钙、琼脂以外，应含有碳源、氮源、水、无机盐等基本营养物质。（2）对培养基进行灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法。（3）接种前进行的一系列操作，目的是在固体培养基表面形成单菌落。统计平板上的菌落数，就能大致推测出样品中的活菌数。通常每种稀释液需涂布3个平板，取其平均值，若将最后一个试管中的菌液每次吸取0.1mL涂布培养后获得平均值是a，则1g土壤中含有此菌的菌株数是a×106。该方法统计获得的菌落数比实际的活菌数低，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。（4）若要对上述菌株进行进一步纯化，通常使用的划线工具是接种环；接种时，在第一区域划线后须将该工具灼烧、冷却后再划线。（5）产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶。实验结果显示A～E五种菌株中，E是产植酸酶最理想的菌株。【考点】微生物的选择培养（稀释涂布平板法）；微生物的数量测定；微生物的选择培养和计数．【分析】1、培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质；根据物理性质分为固体培养基和液体培养基，培养基中一般含有水、碳源、氮源和无机盐。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求。2、两种纯化细菌的方法的比较：方法优点缺点适用范围平板划线法可以观察菌落特征，对混合菌进行分离不能计数适用于好氧菌稀释涂布平板法可以计数，可以观察菌落特征吸收量较少，较麻烦，平板不干燥效果不好，容易蔓延适用于厌氧，兼性厌氧【解答】解：（1）由题图信息分析可知，该实验的目的是分离获得产植酸酶的菌株，利用了固体培养基，故在培养基中除了添加植酸钙、琼脂以外，应含有碳源、氮源、水、无机盐等基本营养物质。（2）对培养基进行灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法。（3）接种前进行的一系列操作，目的是在固体培养基表面形成单菌落。统计平板上的菌落数，就能大致推测出样品中的活菌数。通常每种稀释液需涂布3个平板，取其平均值，若将最后一个试管中的菌液每次吸取0.1mL涂布培养后获得平均值是a，由图观察可知用于计数的稀释倍数是105，则1g土壤中含有此菌的菌株数是a÷0.1×105＝a×106。该方法统计获得的菌落数比实际的活菌数低，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。（4）若要对上述菌株进行进一步纯化，通常使用的划线工具是接种环；接种时，在第一区域划线后须将该工具灼烧灭菌，待其冷却后再划线。（5）产植酸酶的菌株会水解植酸钙，菌落的周围将形成透明的区域，根据透明区域的有无，可初步判断该菌是否产植酸酶。实验结果显示A﹣E五种菌株中，E菌株的透明圈最大，说明其水解植酸钙的能力最强，故E是产植酸酶最理想的菌株。故答案为：（1）植酸钙琼脂（2）高压蒸汽灭菌法（湿热灭菌法）（3）在固体培养基表面形成单菌落a×106低当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落（4）接种环灼烧、冷却（5）E五．解答题（共2小题）24．[选修1：生物技术实践]为了提高牛粪中的纤维素降解效率，筛选牛粪发酵菌剂的优良菌种，研究人员从牛粪中对纤维素降解菌株进行初步分离，获得了能高效分解纤维素的菌株，并测定其纤维素酶活力，再结合菌落形态等特征进行菌种鉴定。请回答下列问题：（1）取新鲜牛粪样品10g，加入装有90mL无菌水的锥形瓶中，将锥形瓶固定在摇床上，在37℃下振荡培养2～3d，进行选择培养。选择培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度。（2）吸取锥形瓶中的培养液1mL，加入盛有9mL无菌水的试管中混匀进行稀释，依次稀释到108倍稀释度。取不超过0.1mL的105、106、107倍稀释度的稀释液分别涂布于羧甲基纤维素钠培养基上，于37℃恒温培养箱中培养24h。（3）用接种环挑取颜色、形态不一的单菌落，使用平板划线法接种到羧甲基纤维素钠培养基上继续培养，重复2～3次，直至得到较纯的菌株。再挑选单菌落于增菌培养基中培养24h，吸取2μL点种到羧甲基纤维素钠平板中培养48h后，将培养基用刚果红溶液覆盖，10min后，倒去该溶液，再加入NaCl溶液，15min后倒去NaCl溶液