高考生物二轮专题复习11基因工程与细胞工程

基因工程与细胞工程

一、选择题

1.下列关于基因工程的叙述，错误的是（）

A.基因工程的原理是基因重组，能按照人们的意愿定向改造生物的性状

B.基因工程是在分子水平的设计施工，需要限制酶、DNA连接酶和运载体

C.限制酶可识别特定的核昔酸序列，并在特定的切点上切割DM分子

D.基因工程常用的运载体质粒中含有两个游离的磷酸基团

【答案】D

【解析】A.基因工程是指按照人类的愿望，将不同生物的遗传物质在体外人工剪切并和载

体重组后转入细胞内进行扩增，并表达产生所需蛋白质的技术。可定向改造生物的遗传性状，

依据的原理是基因重组，A正确；B.基因工程是在分子水平上对DNA（或基因）进行设计施

工的，需要限制酶、DNA连接海和运载体，B正确：C.限制酶具有专一性，可识别特定的核

昔酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子，C正确：D.质粒为环状的DNA分子，不含有

游离的磷酸基团，D错误。故选D。

2.H-Y抗原存在于雄性个体组胞的表面，决定性腺向雄性方向发育。牛的早期胚胎培养液

中添加H-Y单克隆抗体可用来筛选胚胎。卜.列相关叙述正确的是（）

A.制备单克隆抗体所用的杂交瘤细胞既能产生抗体又能无限增殖

B.培养液中添加H-Y单克隆抗体可促进牛早期胚胎发育成雄性

C.选择雄性胚胎移植构建乳腺生物反应器可以进行生物制药

D.做性别鉴别时选择原肠胚的外胚层细胞对胚胎几乎无伤害

【答案】A

【解析】分析题意可知，H-Y抗原存在于雄性个体细胞的表面，决定性腺向雄性方向发育，

正常雌性体内不存在H-Y抗原，故利用抗体和抗原特异性结合的原理，用H-Y单克隆抗体筛

选胚胎。因此，A.制备单克隆抗体所用的杂交瘤细胞，兼具了浆细胞和骨脂瘤细胞的特点，

既能产生抗体又能无限增殖，A正确：B.培养液中添加H-Y单克隆抗体，可以和H-Y抗原

特异性结合，但不能促进牛早期胚胎发育成雄性，B错误：C.由于是利用乳腺生物反应器

进行生物制药，则鉴别后的雌性胚胎可直接做胚胎移植，雄性胚胎没有意义，C错误；D.做

性别鉴别时应选择囊胚期的滋养层细胞，D错误。故选A。

3.某科研小组采用“胚胎干细胞介导法”将荧光素基因导入纯种灰色小鼠胚胎干细胞（ES

细胞）中并整合到染色体上，然后将转基因的ES细胞注射到纯种黄色小鼠囊胚中培育嵌合

体小鼠。下列叙述正确的是（〉

A.荧光素基因可用于检测子代小鼠体内由灰色小鼠胚胎发育的部分

B.ES细胞是从灰色小鼠囊胚的内细胞团中取出的初步分化的细胞

C.注入ES细胞的囊胚移植前需用促性腺激素对受体母鼠进行超数排卵处理

D.割取黄色小鼠囊胚的滋养层细胞做DNA分析即可检测嵌合体了•代鼠的性别

【答案】A

【解析】A.荧光素基因导入到灰色小鼠胚胎，荧光素基因会表达荧光蛋白，将来检测子代

小鼠有荧光蛋白的即为灰色小鼠胚胎发育而来的，据此推测荧光素基因在该实验操作中可起

到检测灰色小鼠囊胚发育的部分，A正确；B.ES细胞可取自囊胚的内细胞团或早期胚胎的

原始性腺，B错误；C.注入ES细胞的囊胚移植前需用促性腺激素对受体母鼠进行同期发情

处理，C错误；D.嵌合体小鼠中既有纯种灰色小鼠胚胎干细胞，也有纯种黄色小鼠细胞，

不能只割取黄色小鼠囊胚的滋养层细胞做DNA分析即检测嵌合体子代鼠的性别，D错误。故

选A。

4.下图是剔除转基因植物中标记基因的一种策略，下列相关叙述错误的是（）

天筛选标记

转基因植株।

SVG

G01

A.分别带有目的基因和标记基因的两个质粒，都带有T-DNA序列

B.该方法建立在高转化频率基础上，标记基因和目的基因须转到不同染色体上

C.若要获得除标记基因的植株，转化植株必须经过有性繁殖阶段遗传重组

D,获得的无筛选标记转基因植株发生了染色体结构变异

【答案】D

【解析】将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法。农杆菌中的Ti质粒上

的T-DNA可转移至受体细胞，声且整合到受体细胞染色体的DNA上。根据农杆菌的这种特点，

如果将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以使目的基因进

入植物细胞，并将其插入到植物细胞中染色体的DNA±,使目的基因的遗传特性得以稳定维

持和表达。因此，A.农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细

胞染色体的DNA上，故分别带有目的基因和标记基因的两个质粒，都带有T-DNA序列，进而

成功整合到受体细胞染色体上，A正确；B.该方法需要利用农杆菌转化法，在高转化频率

的基础上，符目的基因和标记基因整合到染色体上，由图可知，标记基因和目的基因位于细

胞中不同的染色体上，B正确；C.通过杂交分离结果可知，经过有性繁殖阶段遗传重组后

获得了三种类型细胞，其中包括只含目的基因的，只含标记基因的和既含目的基因又含标记

基因的，C正确；D.安得的无筛选标记转基因植株发生了基因重组，I）错误。故选D。

5.霉变的食物中含有20余种黄曲霉毒素，具有很强的致癌性。为检测食物中黄曲霉毒素的

含量，科研人员以黄曲霉毒素为抗原制备出单克隆抗体，对食物进行检测。下列叙述正确的

是（）

A.将2余种毒素共同免疫小鼠，可制备出•种与所有毒素结合的单克隆抗体

B.可用PEG法、电融合法或者灭活的动物病毒诱导T细胞和骨髓瘤细胞的融合

C.细胞融合体现了细胞膜的流动性，朵交瘤细胞体外增殖体现了细胞的全能性

D.毕克隆抗体能检测出浓度很低的黄曲毒毒素体现了单克隆抗体及敏度高的特点

【答案】D

【解析】A.抗体具有特异性，所以将2余种毒素共同免疫小鼠，不可制备出•种与所有毒

素结合的单克隆抗体，A错误；B.植物原生质体融合的方法有电融合法、PEG融合法，灭活

的病毒诱导法用于动物细胞的融合，B错误：C.动、植物细胞融合都能体现细胞膜的流动

性，杂交瘤细胞体外增殖并没有形成新个体，不能体现细胞的全能性，C错误；【）.单克隆

抗体能检测出浓度很低的黄曲霉毒素体现了单克隆抗体灵敏度高的特点，D正确。故选I）。

6.紫罗兰（2n=14）花色丰富、抗虫性强、种子富含亚麻酸。为了让油菜（2n=38）具有紫

罗兰的诸多优良性状，科研人员进行了下图所示实验。下列有关叙述错误的是（）

融

紫罗兰下紫罗兰合

施轴细胞、八e原生质体\PEG

原

）处理.生

油菜下/油菜原/质

体

胚轴细胞生质体

紫罗兰一油菜—愈伤组织一杂种细胞

植株

A.制备原生质体时，可使植物细胞处于微弱的质壁分离状态后再用酶解法处理

B.原生质体融合依赖膜的流动性，融合的原生质体形成细胞壁后再进行有丝分裂

C.制备人工种子时，需将愈伤组织和养分、生长调节剂等物质一起用人工种皮包裹

D.融合原生质体后，可以利用选择培养基从混合细胞郴体中箍选山所需杂种植株

【答案】C

【解析】A.用酹解法制备原生质体时，需先用较高渗透压的溶液处理植物细胞，使细胞处

于微弱的质壁分离状态，然后用施消化去除细胞壁，获得原生质体，A正确：B.原生质体

融合依赖细胞膜的流动性，融合的原生质体只有重新形成细胞壁后，才可进行有丝分裂，多

次分裂形成的小细胞团可通过胚胎发生或器官发生的途径再生植株，B正确：C.制备人工

种子时，需将愈伤组织培养成胚状体，再通过人工种皮包装得到人工种子，C错误：D.融

合原生质体后，可以利用选择培养基从混合细胞群体中筛选出所需杂种植株，D1E确。故选

Co

7.植物组织培养技术常用于商业化生产，其过程一般为：无菌培养物的建立一培养物增殖

一生根培养一试管苗移栽及鉴定。下列相关叙述错误的是（）

A.为我得无菌培养物，外植体要消毒处理后才可接种培养

B.组织培养过程中也可无明显愈伤组织形成，宜接形成胚状体等结构

C.提高培养基中生长素和细胞分裂素的比值，有利于诱导生根

D.用同一植株体细胞离体培养获得的再生苗不会出现变异

【答案】D

【解析】A.植物组织培养过程中应注意无菌操作，为获得无菌培养物，外植体要经过表面

消毒处理后，才能进行培养，所用的培养基必须彻底灭菌，A正确；B.组织培养过程中也

可无明显愈伤组织形成，直接形成胚状体等结构，胚状体若包裹上人工种皮，可制作成人工

种子，B正确：C.生长素和组胞分裂素的比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成，因

此提高培养基中生长素和细胞分裂素的比值，有利于诱导生根，C正确；I）.用同一植株体

细胞离体培养获得的再生苗会出现变异，如在愈伤组织的培养过程中可能发生基因突变等变

异，D错误。故选D。

8.大熊猫是我国的国宝，尽管采取了许多保护措施，但由于其繁殖能力及幼仔成活率均较

低，数量仍然非常少。有科学家尝试采用体细胞核移植技术来克隆大熊猫。下列相关叙述错

误的是（）

A.在体细胞核移植过程中，普遍使用的去核方法是显微操作法

B.用体细胞核移植技术克隆大熊猫，体现了动物细胞具有全能性

C.由于体细胞分化程度高，因而体细胞核移植难度明显高于胚胎细胞核移植

I）.在保护濒危物种方面，体细胞核移植技术有望增加濒危物种的存活数量

【答案】B

【解析】A.在体细胞核移植过程中，采集的卵母细胞需培养到减数第二次分裂中期时，用

显微操作去核法去除卵母细胞的核，A正确；B.用体细胞核移植技术克隆大熊猫，体现了

动物细胞的细胞核具有全能性，不能体现细胞具有全能性，B借误；C.相对于■胚胎细胞，

体细胞分化程度高，全能性不容易恢复，因此利用体细胞进行核移植的难度明显大于胚胎细

胞的核移植，C正确；D.动物体细胞核移植技术的应用前景包括加速家畜遗传改良进程；

培养可用于移植的组织、器官:体细胞核移植技术还可以保护濒危物种，增加动物存活数量，

D正确。故选B。

9.寒兰为名贵的兰花品种，•般生长在深山幽谷的山腰谷壁。由于人类的过度采摘，现在

很难找到寒兰，偶尔能发现的也只有较小的植株。为了增加野生寒兰数量，科研人员希望对

其进行人工大量繁殖，再移栽至原有生境。在人工繁殖时可以应用的最适合的生物工程技术

手段是（）

A.将寒兰体细胞与繁殖力强的其他植物细胞进行融合

B.将寒兰的组织放置在培奔基中进行植物组织培养

C.将寒兰的体细胞核移植到其他植物的去核卵细胞中

D.将生长素基因转入野生寒兰获得生长速度快的寒兰

【答案】B

【解析】A.若将寒兰体细胞与繁殖力强的其他植物细胞进行融合，需要进行体细胞杂交，

技术要求较高，且成功率不一定高，A错误；B.将寒兰的组织放置在培养基中进行植物组

织培养，是最快也最简单的方式，B正确；C.由于植物体细胞全能性易体现，因此将寒兰

的体细胞核移植到其他植物去核卵细胞中，对于植物细胞来说太过繁琐，一般核移植多用于

动物克隆，C错误；D.将生长素基因转入野生寒兰获得生长速度快的寒兰，要求的技术较

高，成功率低，D错误。故选B。

10.抗体偶联药物（ADC）是将高特异性的单克隆抗体和小分子细胞毒性药物，通过接头进

行高活性结合而成，抗体部分与肿瘤细胞表面的靶向抗原结合后，肿瘤细胞会将ADC内吞。

之后ADC药物会在溶酹体中分解，释放出小分子细胞毒性药物，破坏DNA或阻止肿瘤细胞分

裂，起到杀死细胞的作用，下图是ADC作用原理简图。下列叙述不正确的是（）

A.单克隆抗体可对肿瘤细胞进行靶向治疗

B.ADC中的单克隆抗体是杀死肿瘤细胞的有效成分

C.ADC中接头稳定性偏低会导致其在运输过程中药物分了•脱落造成“脱靶毒性”

D.用特定的选择培养基筛选出朵交瘤细胞后，还需要克隆化培养和抗体检测

【答案】B

【解析】A.ADC中的单克隆抗体的作用是特异性识别肿瘤细胞表面的抗原并与之结合，从

而实现靶向治疗，A正确：B.ADC中的单克隆抗体能特异性识别肿瘤细胞表面的靶向抗原并

与其结合，显然题中ADC中的抗体的作用是能特异性识别肿瘤抗原，B错误；C.ADC中接头

稳定性偏低可能会导致单克隆抗体在运输过程中与药物分子脱离造成药物显示“脱靶毒性”,

从而无法实现靶向治疗.,C正物；D.用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞后，因为与杂

交瘤细胞有多种，因而还需要克隆化培养和抗体检测，从而选择出能够产生相应的抗体的杂

交瘤细胞，D正确。故选瓦

11.SOD是•种广泛分布于各种细胞中的抗氧化前，它能催化超氧阴离子自由基形成HQ2,

增强植物的抗逆性。下图为培育能够产生SOD农作物新品种的•种方式，有关叙述错误的是

()

植物细胞(二倍体)新细胞F-愈伤组织胚状体一新品种

A.①过程中最常用的方法是采用感受态细胞法将SOD基因导入植物细胞

B.②需要进行照光培养，以诱导形成叶绿素

C.③表示再分化过程，无需严格的无菌操作

D.该育种方式利用了细胞工程和基因工程，能体现细胞的全能性

【答案】ABC

【解析】分析题图可知SOD基因是目的基因，图中①表示采用基因工程技术将目的基因导入

受体细胞的过程：②③表示植物组织培养过程，其原理是植物细胞具有全能性，其中②表示

脱分化形成愈伤组织的过程；③表示再分化形成胚状体的过程,因此，A.①过程中最常用

的方法是采用农杆菌转化法将SOD基因导入植物细胞，A错误；B.②表示脱分化过程，不

需要在光照条件下进行，B错误；C.②③分别表示脱分化、再分化过程，均需要在严格的

无菌条件下完成，C错误；D.该育种方式利用了细胞工程和基因工程，从植物细胞培育成

植物个体，能体现细胞的全能性，D正确。故选ABC。

12•人参是•种名贵药材，具有良好的滋补作用。干扰素在慢性乙肝、丙肝及部分肿瘤的治

疗中有一定疗效。下图为科研人员制备能合成干扰素的人参愈伤组织细胞的流程。①〜④表

示相关的操作，EcoRKBamHI为限制酹，它们的识别序列及切割位点如下表所示。下列有

关叙述错误的是（）

限制酶识别序列及切割位点

EcoRIG1A/XTTC

BamHIG1GATCC

合干扰素基因的DNA片段

BamHI

①PCR扩墙

。质粒

T扰素基因

EcoRIEcoRI

BamtiIBarntiI

启动子②।

人参电伤检测、筛选一能合成干扰素的

因表达

组织细胞一©人拶电伤组织细胞

标记基因载体

A.过程①所需的两种引物中分别加hGAATTC和GGATCC序列有利于后续操作

B.构建基因表达载体时，目的基因必须位于启动子和终止子之间才能进行复制

C.过程③利用的是T-DNA的特性将目的基因整合到受体细胞的染色体DNA中

D.过程④需控制培养基中植物激素的种类和比例，以防止愈伤组织细胞发生再分化

【答案】BC

【解析】A.结合图示可知，FCR的产物用EcoRi和Bamlll来筋切，因此可在基因的引物两

侧力口上酶切位点GIAATTC和GIGATCC,A正确;B.启动子负责与RNA聚合酶结合启动表达，

终止了负责终止表达，因此构建基因表达载体时，目的基因必须位丁启动了和终止了之间才

能进行表达，B错误；C.过程③是利用TRNA的特性将目的基因导入到农杆菌中，农杆根

瘤菌是原核生物，无染色体，C错误：D.整个过程最终需要利用愈伤组织细胞生成干扰素，

因此应控制培养基中植物激素的种类和比例，以防止愈伤组织细胞发生再分化，D正确。依

选BC。

二、非选择题

13.研究小组利用团头鲂（2n=48,早）与翘嘴的（2n=48,6）进行属间杂交，建立了鲂舶

杂交品系，并以可育的鲂知件（杂交子一代）为材料，通过对减数分裂过程中染色体特征、

相关基因序列和表达水平的研究，初步揭示了异源二倍体杂交鱼可育的细胞学和遗传学机制。

请分析并回答下列问题：

（1）一般情况下，属间杂交后代是不育的，原因是这两个物种之间存在_________,从减

数分裂的过程分析，其主要原因可能是。而本研究小组所得到的鲂如吟可育的

重要原因可能是__________。为证实这一想法，研究人员从团头鲂和翘嘴船的基因组中提取

了与减数分裂有关的Dmcl和Rec8基因片段并进行•PCR扩增，为确保扩增序列的准确性，需

设计，在__________的作用下获得大量目的基因。经过测序和对比分析可知，两

者基因序列相似性非常高。

（2）研究人员通过对鲂舶R精巢染色体制片，观察发现部分细胞中的染色体出现了联会配

对的现象，具体表现为形态大小相近的“同源”染色体两两配对，此时细胞的名称为

。此外，还发现少量分裂细胞中仅含有24条染色体，这些染色体均以“X”的形

态存在，推测此细胞的名称为细胞，这些观察结果表明__________0

（3）研究人员还对与减数分裂有关的Dmcl和Rec8基因进行了相关研究。结果表明，Dmcl

利Rec8蛋白是减数分裂过程中与同源染色体联会和分离相关的重要蛋白质。Dmcl基因在减

数第一次分裂前期特异性表达并发挥作用，据此推测Dmcl蛋白的作用与有关。

Rec8蛋白能确保同源染色体分离时姐妹染色单体不分离，据此可推测Rec8蛋白发挥作用的

时期主要在。在减数第二次分裂时，Rec8蛋白会被降解，姐妹染色单体顺利分

离，推测Rc8蛋白作用部位是。

【答案】（1）生殖隔离减数分裂过程中异源染色体配对和分离发生紊乱团头鲂

与翘嘴剑的染色体组组成及所含基因大体相同特异性引物热稳定DNA聚合酎

（Taq酶）

（2）初级精母细胞次级精母鲂剑居能正常进行减数第一次分裂（得到正常的

次级精母细胞）

（3）与同源染色体配对（联会）有关减数第一次分裂后期染色体的着丝粒

【解析】（1）两种生物朵交后代不育，可判断这两种生物之间存在生殖隔离，是两个物种。

从减数分裂的过程分析，其土要原因可能是减数分裂过程中异源染色体配对和分离发生紊乱。

而本研究小组所得到的鲂如R可育的重要原因可能是团头鲂与翘嘴蛇的染色体组组成及所

含基因大体相同。PCR扩增需要设计特异性引物，在Taq前的作用下获得大量目的基因。

(2)联会发生在减数第•次分裂前期，此时细胞名称为初级精母细胞；还发现少量分裂细

胞中仅含有24条染色体，减数第一次分裂结束后子细胞染色体数目减半，由题干“这些染

色体均以'X，的形态存在”可知，每条染色体上都有两条姐妹染色单体，所以是减数第二

次分裂前期或中期的细胞，名称为次级精母细胞。这些观察结果表明鲂舶件能止常进行减

数第一次分裂(得到正常的次级精母细胞)。

(3)减数第•次分裂前期最明显的特征是同源染色体两两配对进行联会，所以推测Dmc]

蛋白的作用与同源染色体配对(联会)有关。同源染色体分离发生于减数第•次分裂后期，

Rec8蛋白能确保同源染色体分离时姐妹染色单体不分离，据此可推测Rec8蛋白发挥作用的

时期主要在减数第•次分裂后期。在减数第二次分裂时，Rec8蛋白会被降解，娟妹染色单

体顺利分离，推测Rc8蛋白作用部位是染色体的着丝粒。

14.为研究水稻D基因的功能，研究者将T-DNA插入到D基因中，致使该基因失活，失活后

的基因记为丸现以野生植株和突变植株作为亲本进行杂交实殓，统计母本植株的结实率，

结果如下表所示。

杂交编号亲本组合结实数授粉的小花数结实率

①早DDX&dd16/15810%

②辛ddXaDD77/15450%

③第DDX&DD71/14150%

(1)表中数据表明，D基因失活使配子行性降低。为确定配子育性降低是由D

基因失活造成的，可将____________作为目的基因。与载体连接后。导入到_____________(填

，，野生”或，，突变”)植株的幼芽经脱分化形成的愈伤组织中。观察转基因水稻配子育性是

否得到恢复。

(2)进一步研究表明，配子育性降低是因D基因失活直接导致配子本身受精能力卜.降，若

让杂交①的件给杂交②的R授粉。预期结实率为，所获得的艮植株的基因型及

比例为o

(3)为验证F2植株基因型。研究者根据D基因，T-DNA的序列，设计了3种引物，如图所

示

T-DNA插入位置I5L-GATCCC--3,

5---CCGTGT--pl--ATGCCT--3*5--GGGATC--3,J]5'--AGGCAT--31

3，-,,,GGCACA",,4r,,,TACGGA,,,-5，3,-,,CCCTAG**-5,

I」I1]]]5--CCGTGT--3*

D基因T-DNA3种引物

随机选取F2植株若干，提取各植株的总DM。分别用引物“【+川”组合及“n+in”组合进

行PCR,检测是否扩增（完整的T-DNA过大，不能完成PCR）。若,则相应植株

的基因型为Dd：同理可判断其他基因型.

【答案】（1）雄D基因突变

(2)30%DD：Dd：dd=5：6：1

（3）两种引物组合均可完成犷增

【解析】（1）②③两组中雄性个体的基因型均为DD,不论雌性个体的基因型是什-么，后代

结实率均为50乐说明D基因失活与雌配子的育性无关：又已知①中雄性个体的基因型为dd

（D基因失活），后代结实率只有10%,说明D基因失活使雄配子育性降低。愈伤组织是外

植体脱分化形成的。为确定配子育性降低是由于D基因失活造成的，可将D基因作为目的基

因，与载体连接后，导入到突变植株的愈伤组织中，最后观察转基因水稻配子育性是否得到

恢复。

（2）在（1）中，DD做父本，结实率都为50即可以得出D的难配子中可育的占1/2：dd

做父本，结实率为10%,可以得出d的雄配子中可行的占1/10,若让杂交①的K（Dd）给杂

交②的居（Dd）授粉，则结实率为（10%+50%）4-2=30%,若让杂交①的H（Dd）给杂交②的

Fl（Dd）授粉，两者基因型都为Dd,产生的配了都为D：d=l：1.但是雄配了的可行性D

是d的5倍，所以可行的雄配子D：d=5：1,可育的雌配子D：d=l：1,则杂交结果如下:

①的F]«)②的F](?)

DdXDd

八A

可育DdDd

配子

56

DNA"Q置

I

5'--CCGTGT--ArGeer-ry-^GGATC--r

3)r-<iGCACA-

TACGGA--S'3'iCCCTAG…-S'

।_______________।

I

mD珏凶T-DNA

I、II、HI引物的结合位点如上图所示,根据题中信息，“完整的T-DM过大，不能完成

PCR”，且d基因的产生是T-DNA插入了D基因内部，所以如果以D基因为模板，II、HI引

物组合可以扩增出一种片段，以突变后的D基因（d基因）为模板，【、HI引物组合可以扩

增出另外一种片段.如果某植株的基因型是Dd.则从其体内提取出来的作为扩增的模板就

有两种，两种引物组合都能够进行扩增。

15.双酚A（BPA）是一种含酸有机物，是重要的工业原料，在环境中不易降解，科研人员

对上壤中细菌等微生物降解BPA进行了相关研究。

（1）BPA由多种途径进入环境，沿着在生态系统中传递，并逐级积累，产生

现象。

（2）为探究BPA对土壤中的细菌数量及种类的影响，科学家进行了以下实验。

①首先测定不同浓度BPA对土.壤细菌生长情况的影响，结果如图1所示，实验结果表明

（注：电泳条带宽度与细菌相对数量的多少有直接关系）

②16srDNA基因存在于所有绢菌中，该基因包含多个恒定区和可变区，恒定区序列在所有

细菌间无显著差异，可变区序列具有种的特异性。为探究BPA对细菌群落多样的膨响，利用

16SrD\A基因的（选填“恒定区”或“可变区”）序列设计引物，PCR扩增16s

rDNA片段，电泳结果如图2。如图A、B、C条带是各处理所共有的，说明各处理土壤中具有

相同的细菌种类。不同浓度BPA处理出现了特有条带，如d、e、f、g和h条带，说明

o且共有条带中如C宽度不同，可推测不同浓度BPA导致,该

细菌群落在发生0

（3）经过筛选，科研人员得到3株具有降解BPA能力的菌株，下列叙述正确的是0

A.分离BPA降解菌的培养基需要以BPA为唯一碳源

B.依据菌落的形状、大小、颜色等可进行菌种的初步鉴定

C.比较3株菌株降解BPA能力后，剩余菌液可宜接倒掉

D.常温下用斜面培养基可长期保存筛选得到的目的菌种

【答案】（1）食物链生物富集

（2）BPA抑制细菌生长，并且殖浓度升高抑制作用越强恒定区BPA处理形成了新

种类的细菌细菌的优势种群发生改变（不同细菌的相对数量发生改变）演替

（3）AB

【解析】（1）双酚A在环境中不易降解，因此会沿着食物链在生态系统中传递，并逐级积

累，产生生物富集现象。

（2）①由图1可知，与对照组相比，不同浓度的BPA下，细菌相对数量减少，说明不同浓

度的BPA均可抑制细菌数量的增加，而且随浓度升高抑制作用越强。

②根据题意可知，怛定区序列在所有细菌间无显著暴异，可变区序列具有种的特界性。为探

究BPA对细菌群落多样的影响，由于细菌群落包含多种细菌，因此应利用16SrDNA基因的恒

定区序列设计引物,PCR扩增16SrDNA片段。

③A、B、C条带是各处理所共有的，说明各处理土壤中具有相同的细菌种类。而不同浓度BPA

处理出现了特有条带，如d、e、f、g和h条带，说明BPA处理形成了新种类的细菌。若共

有条带中如C宽度不同，可推则不同浓度BPA导致不同细菌的相对数量发生改变，由于有新

的菌体出现，因此该细菌群落也在发生演替。

（3）A.双酚A（BPA）是一和含碳有机物，可为能分解双酚A的微生物提供碳源，因此分

离BPA降解菌的培养基需要以BPA为唯一碳源，A正确；B.不同菌体形成的菌落的形状、

大小、颜色等不同，因此依据菌落的形状、大小、颜色等可进行菌种的初步鉴定，B正确；

C.剩余菌液不可直接倒掉，需要经过高压蒸汽灭菌处理，防止污染环境，C错误：D.常温

下可用斜面培养基临时保存菌种，不可长期保存，【）错误。故选AB。

16.A、B是染色体数目相同的两种二倍体药用植物，A含有效成分X,B含有效成分Y。某

研究小组拟培育同时含有X和Y的新型药用植物。回答下列问题：

（1）为了培育该新型药用植物，可取A和B的叶片，先用酶去除细胞壁,

获得具有活力的,再用化学诱导剂诱导二者融合，形成的融合细胞经

过脱分化培养形成愈伤组织，然后经过再分化形成完整的朵种植株C。这种培育技术称为

（2）上述杂种植株C属于多倍体，含有个染色体组。假设A与B能通过有性杂交产

生后代植株D,且产生的后代植株D是不育的，而上述杂种植株C是可育的，造成这种差异

的原因是o请简要写出解决后代植株D不育的方法：。

（3）经植物组织培养得到的等材料用人工薄膜包装后可得到人工种子，

人工种子中除了充入各种营养物质外，还应该充入（填两种）等植物激素。

【答案】（1）纤维素酹和果胶酎原生质体植物体细胞杂交技术