生物制药发酵罐操作技师考试试卷及答案

生物制药发酵罐操作技师考试试卷及答案一、填空题（每题1分，共10分）1.发酵罐常用灭菌方式包括湿热灭菌和______灭菌。2.搅拌的主要作用是增加______传递和混合均匀性。3.发酵pH控制常通过添加______或酸液实现。4.种子罐与发酵罐接种比通常为1:______（范围）。5.溶解氧检测常用______电极。6.通气量通常以______（VVM）表示。7.培养基灭菌后需在______条件下冷却。8.搅拌轴密封常用______密封。9.湿热灭菌温度一般为______℃。10.发酵终点判断指标包括______浓度（产物/菌体）。二、单项选择题（每题2分，共20分）1.不能用于培养基灭菌的是？A.湿热灭菌B.干热灭菌C.过滤除菌D.紫外线灭菌2.搅拌转速过高会导致？A.氧传递不足B.菌体损伤C.温度降低D.泡沫减少3.导致溶解氧下降的是？A.通气量增加B.搅拌转速提高C.菌体浓度增加D.温度降低4.接种时种子液与培养基温差不超过？A.1℃B.2℃C.5℃D.10℃5.灭菌时排气阀应？A.全开B.半开C.关闭D.间歇开启6.剪切力最小的搅拌器是？A.推进式B.涡轮式C.锚式D.桨式7.pH持续下降最可能原因是？A.菌体产酸B.菌体产碱C.通气不足D.搅拌不够8.培养基冷却过慢会导致？A.染菌B.营养破坏C.泡沫增加D.溶解氧升高9.pH电极校准用？A.纯水B.标准缓冲液C.发酵液D.培养基10.不属于发酵异常的是？A.菌体快速下降B.产物稳定上升C.溶解氧骤降D.pH剧烈波动三、多项选择题（每题2分，共20分）1.影响氧传递的因素有？A.搅拌转速B.通气量C.温度D.发酵液粘度2.灭菌前准备工作包括？A.阀门密封性检查B.培养基配制C.仪表校准D.接种工具灭菌3.消泡方法有？A.机械消泡B.添加消泡剂C.降低搅拌转速D.减少通气量4.发酵终点指标包括？A.产物浓度B.菌体浓度C.残糖含量D.pH变化5.种子罐质量要求包括？A.菌体浓度高B.无杂菌C.活力强D.代谢旺盛6.发酵罐主要部件有？A.搅拌系统B.通气系统C.灭菌系统D.检测系统7.发酵异常情况有？A.DO长时间低于临界值B.pH异常波动C.菌体不增长D.产物上升慢8.培养基灭菌目的是？A.杀死所有微生物B.破坏营养C.保持无菌D.去除杂质9.温度控制方法有？A.夹套换热B.盘管换热C.接种量调节D.通气量调节10.机械密封优点有？A.密封好B.寿命长C.维护方便D.成本低四、判断题（每题2分，共20分）1.发酵罐只需灭菌培养基，罐体无需灭菌。（）2.搅拌转速越高，氧传递系数越大。（）3.接种量越大，发酵周期越短。（）4.发酵泡沫越多越好。（）5.pH电极使用后无需校准。（）6.通气量越大，溶解氧越高。（）7.种子菌需处于对数生长期。（）8.灭菌后冷却需通无菌空气。（）9.消泡剂添加越多效果越好。（）10.温度波动不影响产物生成。（）五、简答题（每题5分，共20分）1.简述发酵罐灭菌操作步骤。2.如何判断发酵杂菌污染？3.简述溶解氧（DO）控制方法。4.接种前种子液质量检查内容。六、讨论题（每题5分，共10分）1.发酵DO骤降的原因及处理措施。2.如何优化搅拌参数提高氧传递效率？---答案部分一、填空题1.干热2.氧3.碱液4.10-205.极谱式6.每分钟通气体积与发酵液体积比7.无菌8.机械9.12110.产物二、单项选择题1.D2.B3.C4.B5.A6.C7.A8.A9.B10.B三、多项选择题1.ABCD2.ABC3.ABCD4.ABCD5.ABCD6.ABCD7.ABCD8.AC9.ABD10.ABC四、判断题1.×2.√3.√4.×5.×6.×7.√8.√9.×10.×五、简答题1.①检查罐体及阀门密封性，关闭进出料阀，开排气阀；②通蒸汽预热至50-60℃，升温至121℃维持30-60分钟；③灭菌时排气阀全开排冷空气；④结束后关蒸汽，通无菌空气维持正压，冷却至接种温度；⑤冷却持续通无菌空气防负压染菌。2.①镜检发现非目标菌体；②pH骤变、DO异常下降、残糖消耗异常；③产物不增长或下降；④发酵液异味、变色；⑤无菌检测有杂菌生长。3.①调节通气量/搅拌转速；②适当降温（DO溶解度随温度升高降低）；③控制菌体浓度（避免耗氧过度）；④及时消泡；⑤调整补料速率（减少碳源补加）。4.①无菌检查（无杂菌）；②菌体浓度（OD≥0.5）；③活力（活菌体≥90%）；④代谢活性（前体消耗/产物积累正常）；⑤温度匹配（温差≤2℃）。六、讨论题1.原因：①菌体过度生长（补料过多）；②通气/搅拌故障；③泡沫过多；④温度过高。处理：①排查通气/搅拌设备；②提高通气/转速（设备正常时）；③机械消泡或加少量消泡剂；④降温；⑤降低补料速率。2.①选搅拌器：