病理学技术(中级)考试试题题库及答案

病理学技术(中级)考试试题题库及答案1.单项选择题（每题1分，共40分。每题只有一个最佳答案）1.石蜡切片最常用的透明剂是A.丙酮  B.二甲苯  C.乙醇  D.氯仿  E.正丁醇答案：B2.用于显示含铁血黄素的普鲁士蓝反应中，高铁离子与下列哪种试剂形成蓝色沉淀A.亚铁氰化钾  B.铁氰化钾  C.硫化铵  D.酸性品红  E.高锰酸钾答案：A3.免疫组化染色中，阻断内源性过氧化物酶活性最常使用A.0.3%H₂O₂甲醇液  B.0.1%胰蛋白酶  C.5%牛血清白蛋白  D.3%醋酸  E.1%硝酸答案：A4.下列哪项不是冷冻切片较石蜡切片的优点A.快速出片  B.抗原保存好  C.脂肪组织易切  D.可长期保存  E.酶活性保存好答案：D5.用于显示横纹肌的磷钨酸苏木素（PTAH）染色中，横纹呈现A.蓝色  B.红色  C.绿色  D.黄色  E.紫色答案：A6.组织固定液“B5”中，氯化汞的终浓度约为A.0.5%  B.1%  C.2%  D.6%  E.12%答案：D7.在自动染色机上，最常用的脱蜡试剂组合是A.二甲苯Ⅰ→二甲苯Ⅱ→100%乙醇→95%乙醇B.丙酮→乙醇→水C.正丁醇→乙醇→水D.氯仿→乙醇→水E.二甲苯→丙酮→水答案：A8.用于显示黏液物质的阿尔辛蓝（pH2.5）染色阳性产物呈A.蓝色  B.红色  C.紫色  D.棕色  E.黑色答案：A9.下列哪种抗体在诊断霍奇金淋巴瘤R-S细胞时最具特异性A.CD3  B.CD20  C.CD15  D.CD68  E.S-100答案：C10.组织切片封固时，中性树胶的溶剂是A.二甲苯  B.乙醇  C.丙酮  D.水  E.甘油答案：A11.用于显示神经纤维的Bielschowsky银染法，阳性纤维呈A.黑色  B.红色  C.蓝色  D.绿色  E.黄色答案：A12.下列哪项不是高碘酸-希夫（PAS）反应的阳性对照组织A.肝脏  B.肾小管  C.胰腺  D.胃黏膜  E.甲状腺答案：E13.免疫荧光染色后，切片最适长期保存介质是A.中性树胶  B.甘油-PBS（1:1）  C.二甲苯  D.丙酮  E.水答案：B14.用于显示淀粉样物的刚果红染色，在偏振光下呈现A.苹果绿双折光  B.橘黄双折光  C.蓝色双折光  D.红色双折光  E.无折光答案：A15.石蜡包埋组织切片厚度一般设置为A.2μm  B.4μm  C.8μm  D.10μm  E.15μm答案：B16.下列哪项不是免疫组化抗原修复热方法A.高压锅加热  B.微波加热  C.水浴锅加热  D.胰酶消化  E.蒸汽加热答案：D17.用于显示脂质的油红O染色，阳性脂滴呈A.红色  B.蓝色  C.绿色  D.黑色  E.紫色答案：A18.组织固定后，用流水冲洗的主要目的是A.增强染色  B.去除多余固定液  C.硬化组织  D.脱水  E.透明答案：B19.下列哪种固定液兼有脱钙作用A.10%中性甲醛  B.Zenker液  C.Bouin液  D.4%多聚甲醛  E.乙醇-甲醛液答案：B20.用于显示黑色素的多巴（DOPA）反应阳性产物呈A.黑色  B.红色  C.蓝色  D.黄色  E.绿色答案：A21.免疫组化染色中，DAB显色阳性部位呈A.棕黄色  B.红色  C.蓝色  D.绿色  E.紫色答案：A22.下列哪项不是影响免疫组化非特异性染色的因素A.内源性生物素  B.抗体浓度过高  C.组织干燥  D.抗原修复过度  E.切片过厚答案：D23.用于显示弹性纤维的Verhoeff铁苏木素染色，弹性纤维呈A.黑色  B.红色  C.蓝色  D.绿色  E.紫色答案：A24.组织脱水程序中，下列哪种浓度乙醇最易导致组织脆裂A.70%  B.80%  C.90%  D.100%  E.95%答案：D25.用于显示幽门螺杆菌的改良Giemsa染色，菌体呈A.蓝色  B.红色  C.紫色  D.绿色  E.黑色答案：A26.下列哪项不是免疫组化阳性对照应满足的条件A.与待测组织同批处理  B.已知阳性表达  C.抗体浓度不同  D.组织固定方式一致  E.切片厚度一致答案：C27.用于显示钙盐的VonKossa染色，钙盐呈A.黑色  B.红色  C.蓝色  D.绿色  E.紫色答案：A28.组织切片封片前，最常用的透明剂是A.二甲苯  B.乙醇  C.丙酮  D.水  E.甘油答案：A29.用于显示真菌的Grocott六胺银染色，真菌壁呈A.黑色  B.红色  C.蓝色  D.绿色  E.紫色答案：A30.免疫组化染色中，PBS缓冲液pH一般调至A.6.0  B.7.4  C.8.0  D.5.0  E.9.0答案：B31.下列哪项不是自动封片机优点A.节省人力  B.减少二甲苯暴露  C.增加气泡  D.提高效率  E.标准化答案：C32.用于显示尼氏体的硫堇染色，尼氏体呈A.蓝色  B.红色  C.绿色  D.黑色  E.黄色答案：A33.组织切片烤片温度一般设置为A.37℃  B.45℃  C.60℃  D.80℃  E.100℃答案：C34.用于显示胶原纤维的Masson三色染色，胶原呈A.蓝色  B.红色  C.绿色  D.黑色  E.紫色答案：A35.下列哪项不是免疫组化阴性对照A.空白对照  B.替代对照  C.吸收对照  D.阳性对照  E.自身阴性对照答案：D36.用于显示线粒体的Regaud铁苏木素染色，线粒体呈A.蓝色  B.红色  C.绿色  D.黑色  E.紫色答案：A37.组织切片脱蜡至水后，为防止掉片，可使用的黏附剂是A.APES  B.二甲苯  C.乙醇  D.丙酮  E.水答案：A38.用于显示糖原的Best胭脂红染色，糖原呈A.红色  B.蓝色  C.绿色  D.黑色  E.紫色答案：A39.免疫组化染色中，阻断内源性生物素常使用A.卵白素-生物素封闭试剂  B.0.3%H₂O₂  C.5%BSA  D.胰酶  E.盐酸答案：A40.用于显示神经髓鞘的LuxolFastBlue染色，髓鞘呈A.蓝色  B.红色  C.绿色  D.黑色  E.紫色答案：A2.多项选择题（每题2分，共20分。每题至少有两个正确答案，多选少选均不得分）41.下列哪些属于组织固定液中的“还原剂”成分A.重铬酸钾  B.氯化汞  C.苦味酸  D.甲醛  E.乙醇答案：A、B42.关于免疫组化抗原热修复，下列描述正确的是A.可暴露甲醛交联遮蔽的抗原表位B.高压锅法温度可达120℃C.修复液pH对结果无影响D.微波加热需防止干片E.自然冷却后再取出切片可减少掉片答案：A、B、D、E43.下列哪些染色可显示淀粉样物质A.刚果红  B.甲基紫  C.硫黄素T  D.高锰酸钾  E.结晶紫答案：A、B、C44.关于组织脱水，下列哪些措施可减少组织收缩A.梯度乙醇浓度差缩小B.丙酮-乙醇混合脱水C.4℃低温脱水D.延长100%乙醇时间E.使用异丙醇替代乙醇答案：A、B、C、E45.下列哪些属于特殊染色中的“嗜银染色”A.MassonFontana  B.Gomori网状纤维  C.高碘酸-希夫  D.黑色素bleach  E.Warthin-Starry答案：A、B、E46.免疫组化DAB显色系统组成包括A.过氧化氢  B.DAB底物  C.辣根过氧化物酶  D.氯化钴  E.硝酸银答案：A、B、C47.下列哪些因素可导致切片出现“裂纹”A.切片刀缺口  B.组织脱水过度  C.石蜡温度过高  D.切片速度过快  E.刀角度过小答案：A、B、D、E48.关于冷冻切片，下列哪些说法正确A.使用OCT包埋剂B.切片后立即贴附于载玻片C.可在-20℃长期保存D.丙酮固定后可直接染色E.脂肪组织需低温恒温箱-30℃以下答案：A、B、D、E49.下列哪些属于免疫组化“信号放大”技术A.生物素-亲和素系统B.聚合物法C.TSA酪胺信号放大D.直接法E.间接法答案：A、B、C50.下列哪些染色需使用氧化剂预处理A.黑色素bleach  B.网状纤维染色  C.弹性纤维染色  D.高碘酸-希夫  E.抗酸染色答案：A、B、C3.填空题（每空1分，共20分）51.免疫组化中，DAB显色阳性产物在________和________双重作用下沉积于抗原部位。答案：过氧化氢；辣根过氧化物酶52.石蜡切片常规厚度为________μm，冷冻切片一般厚度为________μm。答案：4；6–853.PAS反应中，高碘酸将多糖乙二醇基氧化为________，后者与________结合形成紫红色产物。答案：醛基；希夫试剂54.组织固定液Bouin液中，苦味酸的主要作用是________和________。答案：沉淀蛋白；软化组织55.免疫组化抗体稀释度常用“效价”表示，若1:100稀释后阳性信号最强且无背景，则效价为________。答案：1:10056.用于显示幽门螺杆菌的________银染法，菌体呈________色。答案：Warthin-Starry；黑褐57.组织脱水程序中，100%乙醇步骤若延长超过________小时，易导致组织________。答案：2；脆裂58.免疫组化热修复液最常用的是pH________的________缓冲液。答案：6.0；柠檬酸钠59.显示钙盐的VonKossa法，银离子被________还原为金属银，使钙盐呈________色。答案：磷酸盐；黑60.组织切片封片时，中性树胶浓度过高易产生________，过低易产生________。答案：气泡；溢胶4.简答题（共30分）61.（封闭型，6分）简述免疫组化染色中“非特异性染色”常见原因及对应消除措施。答案：原因：1.内源性生物素或过氧化物酶；措施：使用卵白素-生物素封闭及0.3%H₂O₂甲醇阻断。2.抗体交叉反应；措施：选用高特异抗体、增加抗体稀释度、使用同型对照。3.组织干燥边缘；措施：湿盒孵育、切片充分水化。4.电荷吸附；措施：使用5%BSA或二抗宿主正常血清封闭。5.切片过厚；措施：调整切片厚度至4μm。62.（开放型，6分）结合实例说明特殊染色在肿瘤病理诊断中的价值。答案：例1：胃肠道间质瘤（GIST）与平滑肌瘤鉴别，CD117免疫组化阳性支持GIST；若CD117失败，可用Masson三色显示胶原纤维与平滑肌分布差异辅助。例2：乳腺浸润性癌与硬化性腺病鉴别，网状纤维染色显示基膜完整性，癌组织破坏基膜，腺病保留。例3：肝细胞癌与胆管细胞癌，PAS-D（淀粉酶消化）显示肝糖原消失，黏液物质在胆管癌阳性。例4：黑色素瘤与基底细胞癌，MassonFontana显示黑色素，结合S-100、HMB45免疫组化提高准确性。综上，特殊染色提供化学组成信息，与免疫组化互补，提高诊断准确率。63.（封闭型，6分）写出Masson三色染色标准步骤及结果判定。答案：步骤：1.切片脱蜡至水；2.Weigert铁苏木素染核5min，水洗；3.0.5%盐酸乙醇分化，水洗返蓝；4.丽春红酸性品红液染5min；5.1%磷钼酸分化2min；6.2%亮绿或2%苯胺蓝染3min；7.0.2%冰醋酸快速冲洗；8.95%→100%乙醇快速脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。结果：胶原纤维呈蓝色（或绿色），肌纤维、红细胞呈红色，胞核呈蓝黑色。64.（开放型，6分）如何优化冷冻切片免疫荧光染色流程以提高信噪比？答案：1.组织获取后立即OCT包埋，液氮-异戊烷速冻，减少冰晶；2.切片厚度6μm，-20℃保存<24h，防止抗原扩散；3.使用丙酮4℃固定10min，保留抗原性；4.PBS充分冲洗，0.2%TritonX-100通透5min，增强抗体进入；5.10%二抗宿主正常血清室温封闭30min，降低背景；6.一抗4℃湿盒过夜，浓度比石蜡切片提高1–2倍；7.荧光二抗避光孵育1h，稀释度预实验优化；8.使用DAPI复染核，甘油-PBS封片，激光共聚焦采集，避免过曝；9.设置阴性、阳性及空白对照，图像定量分析软件计算信噪比，持续迭代条件。65.（封闭型，6分）简述组织切片掉片常见原因及预防措施。答案：原因：1.载玻片未涂黏附剂；措施：使用APES或多聚赖氨酸处理。2.抗原修复沸腾；措施：控制温度≤95℃，防干片。3.组织富含脂肪；措施：冷冻切片延长丙酮固定，石蜡切片延长脱水时间。4.切片过厚；措施：调整至4μm。5.烤片不足；措施：60℃烤片≥1h。6.封片前二甲苯过度干燥；措施：及时封片，保持湿润。5.应用题（共30分）66.（分析类，10分）某三甲医院病理科接收一段乙状结肠息肉，直径1.2cm，需行术中冷冻切片判断良恶。请给出完整技术路线，并指出关键质控点。答案：技术路线：1.接收标本后立即测量、拍照、登记；2.选取可疑区域（质地脆、出血区）0.3cm厚，OCT包埋，液氮-异戊烷速冻；3.低温恒温箱-25℃平衡15min，6μm切片，载玻片APES预处理；4.切片贴附后立即95%乙醇固定30s→水洗→HE染色：苏木素30s→温水返蓝1min→伊红15s→梯度乙醇快速脱水→二甲苯透明→中性树胶封片；5.双人双盲阅片，记录异型程度、浸润深度、切缘；6.剩余组织送石蜡常规。质控点：1.速冻时间≤3min，防冰晶；2.切片完整无皱褶；3.染色核质对比清晰；4.从接收至报告≤15min；5.冷冻剩余组织与石蜡结果符合率>98%，每月统计反馈。67.（计算类，10分）某免疫组化实验需配制0.01mol/L柠檬酸钠缓冲液（pH6.0）1000mL用于抗原修复。实验室有0.1mol/L柠檬酸溶液和0.1mol/L柠檬酸钠溶液，请按Henderson-Hasselbalch方程计算所需体积（柠檬酸pKa₁=3.13，忽略二级解离）。给出计算过程并验证pH。答案：方程：pH=pKa+lg([A⁻]/[HA])6.0=3.13+lg([A⁻]/[HA])lg([A⁻]/[HA])=2.87[A⁻]/[HA]=10^2.87=741设柠檬酸钠体积xmL，则柠檬酸体积(1000-x)mL0.1x/0.1(1000-x)=741x=741(1000-x)x=741000-741x742x=741000x≈998.7mL柠檬酸钠取998.7mL，柠檬酸取1.3mL。验证：n(A⁻)=0.1×0.9987=0.09987moln(HA)=0.1×0.0013=0.00013molpH=3.13+lg(0.09987/0.00013)=3.13+lg768≈3.13+2.8