团体标准 康养植物芬多精的测定 直接热脱附-气质联用法

团体标准康养植物芬多精的测定直接热脱附-气质联用法ICS65.020.20CCSB61XX省（自治区/直辖市）花卉协会发布2026年3月1日发布2026年6月1日实施前言本文件按照GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》要求撰写。本文件由XX花卉研究院、XX康养园艺有限公司、XX农业大学园艺学院提出。本文件归口于XX省（自治区/直辖市）花卉协会。本项目任务来源于XX康养植物产业标准化专项计划。本文件起草单位：XX花卉研究院、XX康养园艺有限公司、XX农业大学园艺学院、XX城市绿化管理处、XX环境检测有限公司。本文件起草人：张XX、李XX、王XX、赵XX、刘XX、陈XX、杨XX、周XX、吴XX、郑XX。本文件为首次发布。引言芬多精是康养植物（如松、柏、樟、竹类等）通过叶片、茎干等器官释放的挥发性有机化合物（主要为萜类、芳香族化合物等），具有抑菌、抗病毒、净化空气、舒缓情绪、改善人体生理状态等康养功效，是康养植物核心价值的重要体现。目前，康养植物芬多精的测定方法多样，包括溶剂萃取法、顶空进样法、热脱附法等，其中直接热脱附-气质联用法（TD-GC-MS）具有样品无需前处理、无溶剂污染、富集效率高、检测灵敏度高、能同时定性定量多种芬多精组分等优势，已成为挥发性有机物测定的主流方法之一。当前我国尚无统一的康养植物芬多精测定团体标准，不同检测机构采用的检测条件、操作流程、定性定量方法不一致，导致检测结果可比性差、准确性参差不齐，难以满足康养植物产业规模化发展、产品质量管控及市场监管的需求。为规范康养植物芬多精的测定方法，明确直接热脱附-气质联用法的操作要求，确保检测结果的科学性、准确性、可比性和重复性，结合我国康养植物资源特点、检测技术发展现状及产业需求，经文献检索、试验研究、专家咨询、论证修订，制定本标准。本标准的制定遵循科学性、实用性、规范性、创新性原则，明确了直接热脱附-气质联用法测定康养植物芬多精的术语定义、原理、试剂与材料、仪器设备、样品采集与制备、检测步骤、结果计算与表示、精密度与准确度、质量控制、检测报告等内容，适用于各类康养植物（含活体植株、叶片、枝条及相关康养产品原料）中芬多精的定性鉴定和定量测定，可供花卉培育企业、康养机构、环境检测机构、科研单位及相关技术人员使用。本标准研制过程中，课题组开展了不同热脱附条件、色谱条件、质谱条件的优化试验，验证了方法的精密度、准确度和检出限，收集整理了国内外相关技术资料，广泛征求康养植物培育、环境检测、园艺科研等领域专家及生产一线技术人员的意见，优化完善检测方案，确保标准内容贴合实际检测需求、具有较强的可操作性和指导性。课题资金来源于XX康养植物产业标准化专项计划，课题组成员不存在利益冲突。1范围本标准规定了康养植物芬多精测定的术语和定义、原理、试剂与材料、仪器设备、样品采集与制备、检测步骤、结果计算与表示、精密度与准确度、质量控制、检测报告等技术要求。本标准适用于各类康养植物活体植株、新鲜叶片、新鲜枝条中芬多精的定性鉴定和定量测定，也适用于以康养植物为原料的初级加工产品（如干燥叶片、枝条切片）中芬多精的测定，其他同类康养植物及相关产品可参照本标准执行。本标准不适用于康养植物深加工产品（如精油、提取物）中芬多精的测定，此类产品的测定可另行制定专项标准。2规范性引用文件本标准引用下列文件，其最新版本（包括所有修改单）适用于本文件。1.GB/T1.1-2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》2.GB/T6682-2008分析实验室用水规格和试验方法3.GB/T27404-2008实验室质量控制规范食品理化检测4.GB/T3095-2012环境空气质量标准5.NY/T1107花卉种苗6.HJ644-2013环境空气挥发性有机物的测定吸附管采样-热脱附/气相色谱-质谱法3术语和定义下列术语和定义适用于本标准。3.1康养植物具有释放芬多精、负离子等有益物质，能改善环境质量、舒缓人体情绪、促进人体身心健康，可应用于康养产业、城市绿化、庭院景观等场景的植物种类，主要包括松科、柏科、樟科、竹亚科等植物。3.2芬多精康养植物通过叶片、茎干、树皮等器官自然释放的挥发性有机化合物的总称，主要成分为单萜类（如α-蒎烯、β-蒎烯、柠檬烯）、倍半萜类（如石竹烯、雪松烯）及少量芳香族化合物，具有抑菌、抗炎、舒缓情绪等生理活性。3.3直接热脱附（TD）将样品直接放入热脱附装置中，通过程序升温使样品中挥发性芬多精组分脱附，经载气携带进入气相色谱-质谱联用仪进行检测的前处理方法，无需添加溶剂，可实现样品中芬多精的快速富集和脱附。3.4气相色谱-质谱联用（GC-MS）将气相色谱的分离能力与质谱的定性定量能力相结合的分析技术，可实现复杂混合物中各组分的分离、定性鉴定和定量测定，适用于芬多精这类多组分挥发性有机物的检测。3.5检出限（LOD）在规定的检测条件下，样品中芬多精组分能被检出的最低浓度，以信噪比（S/N）≥3时对应的浓度表示。3.6定量限（LOQ）在规定的检测条件下，样品中芬多精组分能被准确定量测定的最低浓度，以信噪比（S/N）≥10时对应的浓度表示。4原理选取代表性康养植物样品（叶片、枝条或活体植株局部），置于热脱附样品池中，通过直接热脱附装置进行程序升温，使样品中挥发性芬多精组分快速脱附；脱附后的芬多精组分经惰性载气携带，进入气相色谱仪，通过毛细管色谱柱实现各组分的分离；分离后的各组分依次进入质谱仪，在电子轰击离子源（EI）作用下离子化，产生特征质谱图；通过与标准质谱库比对进行定性鉴定，采用外标法进行定量测定，计算样品中各芬多精组分的含量。5试剂与材料5.1试剂5.1.1标准品：α-蒎烯（纯度≥98%）、β-蒎烯（纯度≥98%）、柠檬烯（纯度≥98%）、石竹烯（纯度≥98%）、雪松烯（纯度≥98%）等常见芬多精标准品，可根据检测需求选用其他相关标准品。5.1.2溶剂：色谱纯正己烷、甲醇，纯度≥99.9%，无挥发性杂质干扰。5.1.3载气：氦气（He），纯度≥99.999%；氮气（N₂），纯度≥99.999%，用于仪器吹扫和保护。5.1.4实验室用水：符合GB/T6682-2008规定的一级水，无挥发性杂质。5.2材料5.2.1样品容器：玻璃密封瓶（50mL、100mL），带聚四氟乙烯密封盖，使用前用甲醇浸泡30min，晾干后备用，避免污染。5.2.2采样工具：不锈钢剪刀、镊子、采样袋（铝箔袋或聚四氟乙烯采样袋），使用前用氮气吹扫3~5min，去除残留挥发性杂质。5.2.3热脱附样品池：石英材质或不锈钢材质，容积5~20mL，使用前用甲醇清洗，氮气吹干，避免残留杂质干扰检测。5.2.4滤膜：有机相滤膜（孔径0.22μm），用于过滤标准溶液，去除杂质。6仪器设备6.1直接热脱附装置：具备程序升温功能，脱附温度范围50~400℃，控温精度±1℃；可调节载气流速（0~100mL/min），具备分流/不分流进样功能，分流比可调节（0~100:1）。6.2气相色谱-质谱联用仪：气相色谱部分具备程序升温功能，柱温范围-60~400℃，控温精度±0.1℃；配备毛细管色谱柱（推荐DB-5MS或HP-5MS，30m×0.25mm×0.25μm，固定相为5%苯基-95%甲基聚硅氧烷）；质谱部分具备电子轰击离子源（EI），离子源温度200~300℃，质量扫描范围m/z30~500amu，分辨率≥1000，具备质谱库检索功能（推荐NIST质谱库）。6.3分析天平：精度0.1mg，符合JJG1036-2008《电子天平检定规程》要求，定期校准。6.4采样设备：便携式采样箱（带冷藏功能，温度0~4℃），用于样品采集后低温保存；氮气吹扫仪，用于采样工具和样品容器的吹扫。6.5样品处理设备：超声波清洗器（功率200~500W，频率40kHz），用于标准品溶解和容器清洗；离心机（转速≥5000r/min），用于标准溶液的澄清处理。6.6其他设备：干燥器（内置变色硅胶）、移液管（1mL、5mL、10mL，精度±0.01mL）、容量瓶（10mL、50mL、100mL），所有玻璃量器均符合JJG196-2006《常用玻璃量器检定规程》要求，定期校准。7样品采集与制备7.1样品采集7.1.1采样原则：遵循“随机、均匀、代表性”原则，根据康养植物的种类、生长状态、种植密度，确定采样点位和采样数量，确保采集的样品能真实反映该批次或该区域康养植物芬多精的释放水平。7.1.2采样时间：选择晴朗、无风或微风天气，采样时间为上午9:00~11:00（此时植物芬多精释放量相对稳定），避免雨天、高温（≥35℃）、严寒（≤5℃）及大风天气采样。7.1.3采样方法：①活体植株采样：选取生长健壮、无病虫害、长势均匀的康养植物，在植株中上部（距地面1.5~2.0m）随机采集3~5个新鲜叶片或枝条样品，每个样品质量不少于5g，用采样袋密封，做好采样标记（样品名称、采样时间、采样地点、采样人）。②离体样品采样：对于已采摘的新鲜叶片、枝条，在采摘后1h内完成采样，随机选取无损伤、无枯萎的样品，每个样品质量不少于5g，放入玻璃密封瓶中，密封保存，做好标记。7.1.4采样数量：每批次或每区域采样不少于3个平行样品，同时采集空白样品（采样袋或玻璃密封瓶，不装入任何样品），用于空白对照检测。7.1.5样品保存：采样后，将样品立即放入便携式冷藏采样箱（0~4℃）中保存，避免阳光直射和高温环境；样品采集后24h内完成检测，若无法及时检测，可在-20℃冰箱中冷冻保存，保存时间不超过72h，解冻后立即检测，解冻过程中避免样品反复冻融。7.2样品制备7.2.1样品预处理：将采集的新鲜样品取出，用干净的滤纸轻轻擦拭表面灰尘和杂质，去除枯萎、破损部分，避免样品污染；若为枝条样品，用不锈钢剪刀剪成0.5~1.0cm的小段；若为叶片样品，可根据热脱附样品池大小，剪成合适尺寸（直径0.5~1.0cm），避免样品过大无法放入样品池。7.2.2样品称量：用分析天平准确称量2.000g预处理后的样品，放入热脱附样品池中，轻轻压实（避免过度压实影响芬多精脱附），立即密封样品池，做好样品标记，待检测。7.2.3空白样品制备：取空的热脱附样品池，不放入任何样品，密封后作为空白样品，与实际样品同步检测，用于扣除空白干扰。8检测步骤8.1仪器调试8.1.1直接热脱附装置调试：开启热脱附装置，预热30min，设定脱附条件（推荐条件）：脱附温度200~250℃，脱附时间5~10min，载气流速（氦气）30~50mL/min，分流比10:1~20:1，传输线温度220~250℃，避免芬多精组分在传输线中冷凝。8.1.2气相色谱-质谱联用仪调试：开启气相色谱-质谱联用仪，预热60min，设定色谱条件和质谱条件（推荐条件）：①色谱条件：毛细管色谱柱DB-5MS（30m×0.25mm×0.25μm）；柱温程序：初始温度40℃，保持3min，以5℃/min升温至150℃，保持2min，再以10℃/min升温至250℃，保持5min；载气（氦气）流速1.0~1.5mL/min，恒流模式；进样口温度250℃，分流进样，分流比与热脱附装置一致；进样量：脱附气体全部进入色谱柱。②质谱条件：电子轰击离子源（EI），离子源温度230℃；电子能量70eV；检测器电压1.0~1.2kV；质量扫描范围m/z30~500amu；扫描方式：全扫描（定性）和选择离子扫描（SIM，定量）；溶剂延迟时间3~5min，避免溶剂峰干扰检测。8.1.3仪器性能验证：调试完成后，注入1.0μg/mL的芬多精混合标准溶液，进行仪器性能测试，要求各组分分离度≥1.5，峰形对称（对称因子0.9~1.1），质谱响应值稳定，RSD≤5%，方可进行样品检测。8.2标准曲线的绘制8.2.1标准储备液的配制：准确称取各芬多精标准品（α-蒎烯、β-蒎烯等）10.0mg，分别置于10mL容量瓶中，用色谱纯正己烷溶解并定容至刻度，摇匀，得到浓度为1000μg/mL的标准储备液，置于-20℃冰箱中密封保存，保存时间不超过1个月。8.2.2标准工作溶液的配制：取标准储备液，用色谱纯正己烷逐级稀释，配制浓度为0.1μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL的系列标准工作溶液，摇匀，现配现用；配制过程中，使用移液管准确移取，避免稀释误差。8.2.3标准曲线的测定：将系列标准工作溶液分别注入热脱附样品池中，按照8.1设定的仪器条件进行检测，以各芬多精组分的峰面积为纵坐标（y），以标准工作溶液的浓度为横坐标（x，μg/mL），绘制标准曲线，计算回归方程和相关系数（r）。要求相关系数r≥0.999，否则重新配制标准溶液并绘制标准曲线。8.3样品测定8.3.1将制备好的样品池（含样品）和空白样品池，按照热脱附装置的操作要求放入样品位，按照8.1设定的仪器条件进行检测，每个样品平行测定3次，记录各芬多精组分的峰面积。8.3.2检测过程中，每隔10个样品，插入1个中间浓度（1.0μg/mL）的标准工作溶液进行质量控制，若标准溶液的峰面积与标准曲线中对应浓度的峰面积偏差≤10%，继续检测；若偏差>10%，停止检测，重新调试仪器并校准标准曲线后，再继续检测。8.3.3若样品中某芬多精组分的峰面积超出标准曲线的线性范围，需将样品适当稀释（用色谱纯正己烷稀释）后，重新测定，确保测定结果在标准曲线线性范围内。8.4定性鉴定将样品检测得到的质谱图，与NIST标准质谱库进行比对，结合色谱保留时间进行定性鉴定：若样品中某组分的质谱图与标准质谱库中某芬多精标准品的质谱图相似度≥90%，且其保留时间与该标准品在相同检测条件下的保留时间偏差≤±0.05min，则可确认该组分为对应的芬多精。9结果计算与表示9.1结果计算样品中某芬多精组分的含量（以质量分数计，mg/kg），按下列公式计算：X=式中：X——样品中某芬多精组分的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；C——由标准曲线计算得到的样品测定液中该芬多精组分的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；C₀——空白样品测定液中该芬多精组分的浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）；V——样品测定液的体积，单位为毫升（mL）；若样品未稀释，V=1；若样品经稀释，V为稀释后样品测定液的体积，单位为mL；f——样品的稀释倍数；若样品未稀释，f=1；若样品经稀释，f为稀释倍数（如取1mL样品定容至10mL，f=10）；m——样品的取样质量，单位为克（g）；计算结果保留三位有效数字，若含量低于检出限，按“未检出”表示；若含量高于检出限但低于定量限，需注明“检出但未定量”。9.1.2平行样品结果计算：3个平行样品的测定结果，计算平均值作为最终测定结果，平行样品的相对标准偏差（RSD）应符合本标准10.1的要求，否则需重新测定。9.2结果表示9.2.1定性结果：列出样品中检出的各芬多精组分名称、保留时间、质谱相似度。9.2.2定量结果：列出样品中各芬多精组分的含量（mg/kg）、平行样品平均值、相对标准偏差（RSD）；未检出的组分，标注“未检出（LOD：××μg/kg）”；检出但未定量的组分，标注“检出但未定量（LOQ：××μg/kg）”。9.2.3总芬多精含量：若需要表示样品中总芬多精含量，可将检出的各芬多精组分的含量相加，计算总和，保留三位有效数字。10精密度与准确度10.1精密度同一实验室，由同一操作人员，使用同一台仪器，对同一康养植物样品（或加标样品）进行6次平行测定，各芬多精组分测定结果的相对标准偏差（RSD）应符合下列要求：①含量≥10.0mg/kg时，RSD≤5%；②0.1mg/kg≤含量<10.0mg/kg时，RSD≤10%；③含量<0.1mg/kg时，RSD≤15%。10.2准确度采用加标回收试验验证方法的准确度，选取空白样品或已知含量的康养植物样品，加入不同浓度的芬多精标准品，进行加标回收测定，加标回收率应符合下列要求：①含量≥10.0mg/kg时，加标回收率为85%~115%；②0.1mg/kg≤含量<10.0mg/kg时，加标回收率为80%~120%；③含量<0.1mg/kg时，加标回收率为75%~125%。加标回收试验每个浓度水平平行测定3次，计算平均加标回收率和相对标准偏差。11质量控制11.1试剂与材料质量控制：所有试剂均应符合本标准5.1的要求，标准品应具有证书，纯度符合规定；样品容器、采样工具使用前需进行清洁和吹扫，避免污染；热脱附样品池使用前需进行清洗和干燥，确保无残留杂质。11.2仪器质量控制：仪器每次使用前需进行调试和性能验证，确保仪器运行正常；定期对仪器进行校准（分析天平、移液管、容量瓶、气相色谱-质谱联用仪等），校准记录存档备查；检测过程中，定期插入中间浓度标准溶液进行质量控制，及时发现和纠正仪器偏差。11.3样品质量控制：样品采集应遵循“随机、均匀、代表性”原则，做好采样记录；样品保存应符合本标准7.1.5的要求，避免样品变质和芬多精组分流失；样品制备过程中，严格控制取样质量和操作步骤，避免样品污染和损失；每个样品至少测定3个平行样品，平行样品相对标准偏差应符合本标准10.1的要求。11.4空白控制：每次检测均应设置空白样品（采样空白、试剂空白、仪器空白），空白样品中若检出芬多精组分，需排查污染来源（试剂、容器、仪器、环境等），消除污染后重新检测；若无法消除污染，需注明检测结果受污染影响。11.5人员控制：检测人员应经过专业培训，熟悉本标准的操作流程和仪器使用方法，具备相应的检测资质；检测过程中，严格按照本标准的要求操作，做好检测记录，确保检测数据的真实性和可追溯性。12检测报告检测报告应包含下列内容，格式规范、信息完整、数据真实，签字盖章后生效：12.1基本信息：报告编号、检测机构名称、检测日期、委托单位名称、样品名称、样品编号、采样时间、采样地点、样品状态（新鲜/冷冻/干燥）、样品数量。12.2检测依据：本标准编号及名称（T/XXXXXXX-2026《团体标准康养植物芬多精的测定直接热脱附-气质联用法》）。12.3检测条件：直接热脱附条件、气相色谱条件、质谱条件（可附仪器参数表）。12.4检测结果：样品中各芬多精组分的定性结果（组分名称、保留时间、质谱相似度）、定量结果（含量、平行样品平均值、RSD）、总芬多精含量（若有）；未检出或检出但未定量的组分，按本标准9.2.2的要求标注。12.5精密度与准确度：平行样品相对标准偏差、加标回收率（若有）。12.6质量控制说明：空白样品检测结果、中间浓度标准溶液质量控制结果、仪器校准情况等。12.7检测结论：根据检测结果，给出样品中芬多精的检出情况和含量水平评价（若有）。12.8其他信息：检测人员签字、审核人员签字、批准人员签字、检测机构盖章、报告出具日期、备注（如样品保存情况、稀释情况等）。附录A（资料性附录）常见康养植物芬多精组分及特征离子表A.1常见康养植物芬多精组分及特征离子芬多精组分名称分子式保留时间（min）（参考值）特征离子（m/z