干细胞制备技师考试试卷及答案

干细胞制备技师考试试卷及答案填空题（共10题，每题1分）1.造血干细胞的主要来源包括骨髓、脐带血和________。2.间充质干细胞常用的分离方法是________法。3.细胞培养的无菌操作应在________中进行。4.胎牛血清在干细胞培养中的主要作用是提供________。5.干细胞冻存时常用的保护剂是________。6.细胞计数的常用工具是________。7.间充质干细胞的表面标志物CD73、CD90、CD105呈________性。8.哺乳动物细胞培养的适宜pH值范围是________。9.检测细胞支原体污染的常用方法是________法。10.干细胞的两大核心特性是自我更新和________。单项选择题（共10题，每题2分）1.下列哪种细胞属于多能干细胞？（）A.造血干细胞B.胚胎干细胞C.神经干细胞D.皮肤干细胞2.干细胞培养中常用的基础培养基是？（）A.RPMI1640B.DMEMC.PBSD.Hanks液3.细胞冻存时的正确降温速率是？（）A.1℃/minB.5℃/minC.10℃/minD.20℃/min4.细胞传代时，消化细胞常用的酶是？（）A.胃蛋白酶B.胶原酶C.胰蛋白酶D.溶菌酶5.间充质干细胞不表达的表面标志物是？（）A.CD34B.CD73C.CD90D.CD1056.下列哪种污染会导致细胞培养基浑浊？（）A.支原体B.细菌C.真菌D.病毒7.干细胞鉴定的关键指标不包括？（）A.表面标志物B.分化能力C.增殖能力D.细胞大小8.无菌操作时，下列哪项是错误的？（）A.操作前洗手消毒B.培养瓶开口朝上放置C.使用无菌吸管D.避免谈话9.干细胞冻存的最佳温度是？（）A.-20℃B.-80℃C.-196℃D.4℃10.下列哪种不是干细胞的应用领域？（）A.再生医学B.药物筛选C.基因治疗D.食品加工多项选择题（共10题，每题2分）1.干细胞的核心特性包括？（）A.自我更新B.多向分化C.无限增殖D.形态均一2.常用的干细胞培养试剂有？（）A.胎牛血清B.双抗（青霉素+链霉素）C.胰蛋白酶D.生理盐水3.细胞污染的预防措施包括？（）A.定期更换培养基B.操作时戴手套C.使用无菌试剂D.培养箱定期消毒4.间充质干细胞的表面标志物阳性的有？（）A.CD73B.CD90C.CD105D.CD455.干细胞冻存的步骤包括？（）A.细胞消化收集B.加入冻存液C.梯度降温D.直接放入液氮6.干细胞分化的诱导因素有？（）A.细胞因子B.化学试剂C.物理刺激D.营养缺乏7.无菌操作的关键要点包括？（）A.环境无菌B.试剂无菌C.操作规范D.人员无菌8.细胞计数的注意事项有？（）A.细胞悬液充分混匀B.计数多个方格取平均值C.避免气泡D.直接计数无需稀释9.干细胞制备的质量控制指标包括？（）A.细胞活力B.纯度C.无菌性D.分化能力10.干细胞在再生医学中的应用包括？（）A.骨组织修复B.神经损伤治疗C.心血管疾病治疗D.免疫调节判断题（共10题，每题2分）1.造血干细胞只能来源于骨髓。（）2.干细胞培养必须在无菌环境中进行。（）3.冻存细胞时可直接放入液氮保存。（）4.间充质干细胞可以分化为脂肪细胞。（）5.细胞汇合度达到50%时适合传代。（）6.胎牛血清可提供干细胞生长所需的营养物质。（）7.支原体污染会导致细胞生长缓慢。（）8.干细胞的自我更新指分裂产生两个相同的干细胞。（）9.干细胞制备过程中无需进行质量检测。（）10.消化细胞时，胰蛋白酶作用时间越长越好。（）简答题（共4题，每题5分）1.简述干细胞冻存的基本步骤。2.简述间充质干细胞的分离方法。3.简述无菌操作的关键要点。4.简述干细胞质量控制的主要指标。讨论题（共2题，每题5分）1.讨论干细胞制备过程中如何避免细胞污染。2.讨论干细胞在再生医学中的应用前景及挑战。答案填空题1.外周血2.贴壁分离3.生物安全柜4.营养物质和生长因子5.二甲基亚砜（DMSO）6.血球计数板7.阳8.7.2-7.49.PCR10.多向分化单项选择题1.B2.B3.A4.C5.A6.B7.D8.B9.C10.D多项选择题1.AB2.ABC3.ABCD4.ABC5.ABC6.ABC7.ABCD8.ABC9.ABCD10.ABCD判断题1.错2.对3.错4.对5.错6.对7.对8.对9.错10.错简答题1.步骤：①消化收集细胞，离心弃上清；②加入含10%DMSO和20%胎牛血清的冻存液混匀；③分装冻存管并标记；④梯度降温（4℃30min→-20℃1h→-80℃过夜→液氮保存）。该过程减少细胞损伤，维持活力。2.常用贴壁分离法：①处理组织样本（剪碎+胶原酶消化）；②过滤得细胞悬液，接种培养瓶；③24-48h换液去除未贴壁细胞；④培养至80%汇合度传代。利用贴壁特性分离，操作简便纯度高。3.要点：①环境无菌（安全柜消毒、台面酒精擦拭）；②试剂无菌（高压或过滤除菌）；③人员无菌（洗手、戴手套口罩）；④操作规范（开口斜放、避免谈话、无菌工具）；⑤定期监测（培养箱消毒、培养基观察）。4.指标：①细胞活力≥90%（台盼蓝染色）；②纯度（流式检测标志物，如间充质干细胞阳性率≥95%）；③无菌性（细菌/真菌/支原体阴性）；④分化能力（诱导分化验证）；⑤增殖能力（传代检测）。讨论题1.避免污染需多环节控制：①环境（安全柜/培养箱定期消毒）；②试剂（无菌处理、变质弃用）；③操作（无菌规范、避免交叉污染）；④样本（无菌清洗、去除杂质）；⑤监测（定期检测污染、及时处理）。同时加强人员培训，标准化操作减少失误。2.前景：①