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病理学技术中级考试历年真题题库及答案1.临床病理常规送检组织标本最常用的固定剂10%中性缓冲福尔马林,其所含甲醛的实际终浓度为A1%B4%C10%D20%E40%【答案】B【考点解析】市售福尔马林为甲醛质量分数37%~40%的饱和水溶液,临床常规配置的10%中性缓冲福尔马林是将1份市售福尔马林原液与9份pH7.2~7.4的磷酸盐缓冲液混合稀释所得,甲醛实际终浓度约为4%,该配方可最大程度避免组织长期固定过程中酸化产生福尔马林黑色素沉淀,兼顾固定穿透力与组织形态保存效果,适合绝大多数常规病理标本的固定需求。2.下列类型组织中,常温下固定时长不宜超过24h,否则易出现细胞过度收缩、间质硬化,后续切片碎裂、核质染色对比度下降问题的是A大脑半球脑组织B股骨皮质骨组织C腹股沟肿大淋巴结组织D大网膜脂肪组织E跟腱肌腱组织【答案】C【考点解析】淋巴结属于高细胞密度、少间质的软组织,过量固定会导致细胞内蛋白交联过度致密,不仅会破坏细胞核内染色质的正常形态,还会提升组织硬度导致切片过程中出现带状碎裂、细胞挤压变形;脑组织需要固定1~2周充分硬化后才能进行常规取材切片,骨组织需经过脱钙处理才能达到切片要求,脂肪组织和纤维性肌腱组织对长期固定的耐受度较高,适当延长固定时间不会对后续制片质量造成显著负面影响。3.常规石蜡包埋组织脱水流程中,梯度乙醇脱水步骤的最终浓度要求为A75%乙醇B85%乙醇C95%乙醇D100%无水乙醇E100%丙酮【答案】D【考点解析】梯度脱水的核心逻辑是从低浓度到高浓度逐步置换组织细胞内的游离水分,避免直接将含水组织投入高浓度脱水剂导致细胞骤缩变形,最终必须经过2~3次100%无水乙醇处理,将组织内残留的水分完全置换清除,防止后续加入的透明剂被水分稀释,出现透明不充分、石蜡渗透障碍的问题,最终导致包埋组织内部出现软点、切片时碎裂脱落。4.石蜡组织透明环节最常用的透明剂二甲苯,针对厚度3~4mm的常规取材组织,适宜的透明时长范围是A1~2minB5~20minC1~2hD4~6hE12~24h【答案】B【考点解析】二甲苯对组织的穿透性强,透明作用速度快,过度透明会导致组织脆化、后续切片呈碎屑状脱落,常规大小病理组织的透明时长严格控制在5~20min区间,以组织块呈现均匀透亮的琥珀色为透明完成标准,体积较大的纤维性硬组织可适当延长透明时间,但最长不宜超过30min。5.常规HE染色所用的苏木素染液中,起到媒染作用的核心成分是A碘酸钠B冰醋酸C硫酸铝钾D蒸馏水E甘油【答案】C【考点解析】苏木素本身无染色能力,经过氧化形成苏木红后,需要与铝离子结合形成带正电荷的苏木红-铝复合物,才能与细胞核内带负电荷的脱氧核糖核酸通过氢键结合完成细胞核染色,硫酸铝钾(钾明矾)是经典苏木素配方中最常用的铝离子供应媒染剂,碘酸钠是苏木素的氧化剂,冰醋酸的作用是降低染液pH值,提升细胞核染色的特异性。6.HE染色过程中,分化液的标准配置方案为A75%乙醇+1%盐酸B95%乙醇+1%盐酸C无水乙醇+1%盐酸D蒸馏水+1%盐酸E丙酮+1%盐酸【答案】B【考点解析】HE染色的分化步骤目的是将细胞核表面附着的过量苏木素染色洗脱,避免细胞核染色过深、胞质出现非特异性蓝染,1%盐酸乙醇分化液采用95%乙醇作为溶剂,可精准控制分化速度,避免水分进入组织导致的脱片、细胞结构弥散问题,分化完成后需立刻用流水冲洗返蓝,终止分化反应。7.临床常规石蜡切片的标准厚度要求为A1~2μmB4~5μmC8~10μmD15~20μmE25~30μm【答案】B【考点解析】常规HE诊断用石蜡切片厚度要求控制在4~5μm,该厚度下细胞无明显重叠,核质形态显示清晰,符合病理诊断的形态学评估标准;肾小球、眼球组织等特殊取材为显示完整组织结构可将切片厚度调整至2~3μm,神经组织、脂肪染色切片厚度可适当提升至8~10μm。8.骨组织脱钙过程中,适合后续开展免疫组化、核酸分子检测的脱钙液是A10%硝酸脱钙液B10%甲酸脱钙液C14%乙二胺四乙酸(EDTA)中性脱钙液D盐酸-甲醛混合脱钙液E三氯乙酸脱钙液【答案】C【考点解析】EDTA为中性螯合类脱钙剂,通过螯合羟基磷灰石中的钙离子达到脱钙效果,整个脱钙过程无强酸碱成分,不会破坏组织内的抗原蛋白与核酸结构,虽然脱钙速度较慢,3~5mm厚度骨组织需要3~7天才能完成脱钙,但是是目前需要保留生物大分子活性的骨组织标本的首选脱钙试剂;强酸类脱钙液虽然脱钙速度快,但是会完全破坏抗原与核酸结构,仅适合常规HE染色标本使用。9.病理冷冻切片技术中,临床术中快速诊断的冰冻切片机常规设定的工作温度范围为A-80℃~-70℃B-30℃~-20℃C0℃~4℃D4℃~10℃E-10℃~-5℃【答案】B【考点解析】常规软组织的最优冷冻切片温度区间为-20℃~-30℃,脂肪含量较高的脂肪组织、乳腺组织可适当下调温度至-35℃,骨组织、钙化组织冷冻温度可调整至-40℃,温度过高会导致组织硬度不足切片出现挤压变形,温度过低会导致组织脆化切片碎裂。按照临床病理操作规范,术中冷冻切片需在标本送达后30分钟内出具诊断报告。10.糖原染色(PAS反应)过程中,使用的氧化剂是A1%高碘酸B1%过碘酸C1%高锰酸钾D1%重铬酸钾E1%冰醋酸【答案】A【考点解析】PAS反应的原理是高碘酸作为强氧化剂,将多糖分子中的乙二醇基氧化为两个游离醛基,游离醛基与Schiff试剂结合形成紫红色产物,特异性显示组织内的糖原、糖蛋白、黏多糖成分,经过唾液淀粉酶37℃消化30分钟后再进行PAS染色,糖原阳性信号会完全消失,可用于鉴别糖原与其他多糖类成分。11.抗酸染色法能够区分分枝杆菌属细菌的核心原理是A分枝杆菌细胞壁含大量脂质,石炭酸复红着色后不易被盐酸酒精脱色B分枝杆菌细胞核DNA含量高,着色后不易脱色C分枝杆菌细胞质内含有大量酸性蛋白,特异性结合红色染料D分枝杆菌细胞壁含大量肽聚糖,对染色液亲和力极强E分枝杆菌胞质内含有大量嗜酸性颗粒,特异性红染【答案】A【考点解析】结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌等抗酸菌的细胞壁含有大量分枝菌酸脂质,常规革兰染色不易着色,经过加热促使石炭酸复红渗透进入细胞壁后,可耐受3%盐酸酒精的脱色作用保持红色,非抗酸菌和背景组织会被脱色后复染为蓝色,染色结果呈现阳性菌红色、背景蓝色的典型表现。12.免疫组织化学染色操作中,最常用的抗原热修复试剂是ApH6.0枸橼酸盐缓冲液BpH8.0EDTA缓冲液CpH9.0Tris-HCl缓冲液DpH7.4磷酸盐缓冲液E碱性修复液【答案】A【考点解析】经过福尔马林固定的组织,蛋白分子之间会形成大量醛基交联,遮蔽抗原表位导致免疫组化染色信号丢失,pH6.0枸橼酸盐缓冲液热诱导抗原修复是临床应用范围最广的修复体系,可覆盖80%以上常规抗体的抗原修复需求,仅针对核蛋白、抗原表位稳定性较强的抗体才会选择pH8.0或pH9.0的EDTA高温修复体系。13.免疫组化染色过程中,Ki-67抗原的典型阳性定位模式是A细胞膜阳性表达B细胞质阳性表达C细胞核阳性表达D细胞间质阳性表达E细胞膜与细胞质共表达【答案】C【考点解析】Ki-67是反映细胞增殖活性的核蛋白抗原,仅在细胞增殖周期的G1、S、G2、M期表达,静止期G0期细胞无表达,阳性信号严格定位于细胞核,临床病理中常用Ki-67阳性比例评估肿瘤的增殖活性与恶性程度。细胞角蛋白CK的阳性定位为细胞质,白细胞共同抗原CD45的阳性定位为细胞膜。14.下列选项中,属于临床病理技术操作二级生物安全防护核心要求的是A实验操作全过程必须在生物安全柜内完成B病理操作区配备高压灭菌消毒设备,实验人员佩戴一次性手套、口罩、工作服C所有实验废弃物直接经生活垃圾通道丢弃D实验区空气保持常压状态,无需定向通风E临床病理标本无需进行消毒处理直接开展操作【答案】B【考点解析】临床病理接触的所有人体组织标本都属于潜在生物危害样本,操作过程必须符合BSL-2级生物安全防护要求,操作区配备高压灭菌设备对废弃标本进行灭活处理,实验人员必须佩戴个人防护用品,污染的实验台面每日用1000mg/L含氯消毒剂擦拭消毒,避免临床病原体暴露导致职业感染。15.按照我国《病理科建设与管理指南》要求,临床病理普通石蜡切片档案的法定保存期限为A5年B10年C15年D30年E永久保存【答案】C【考点解析】我国现行病理管理规范要求门诊病理档案保存期限不少于15年,住院病理档案保存期限不少于30年,石蜡组织块属于病理核心档案,要求永久留存,便于后续开展回顾性研究、二次病理诊断、分子检测等工作。16.常规制片过程中,切片沿走行方向出现间隔规律的平行带状颤痕,最常见的诱因是A组织块固定不充分B切片机刀片出现缺口、紧固螺丝松动C切片厚度设置过大D展片水温过高E蜡块边缘修切过度【答案】B【考点解析】切片机刀片刃口出现微小缺口、刀架固定螺丝松动、机头推进轴存在间隙,都会导致切片过程中刀台或组织台出现规律性高频抖动,最终在切片上形成等间距的平行颤痕,及时更换新刀片、重新紧固所有固定螺丝即可完全解决该类问题。17.HE染色后整张切片出现普遍无染、核质对比不清的问题,最不可能的诱因是A苏木素染液氧化过度、有效染色成分耗尽B组织在流水冲洗环节长时间浸泡在碱性水中C分化液中盐酸浓度过高,分化时间过长D组织透明时间不足,石蜡未完全渗透E返蓝步骤操作不当,细胞核染色被完全洗脱【答案】D【考点解析】透明不足导致的石蜡渗透障碍,只会造成切片过程中组织碎裂脱落,不会直接导致染色后核质对比不清的问题,其余选项均是染色过程中常见的整体染色质量缺陷诱因。18.免疫组化染色后背景非特异性染色过重,下列解决措施中无效的是A适当延长一抗孵育后的PBS洗涤次数与时长B降低一抗的工作浓度,缩短一抗37℃孵育时间C提前用5%牛血清白蛋白对组织切片进行封闭处理D提升DAB显色液的显色时长至20min以上E更换特异性更强、经过纯化的单克隆抗体试剂【答案】D【考点解析】延长显色时间会进一步增加非特异性产物的沉积,加重背景染色深度,控制DAB显色反应必须在显微镜下实时监测,待特异性信号充分显示后立刻用流水冲洗终止显色,避免背景显色过度。19.核酸原位杂交技术中,针对甲醛固定石蜡包埋组织的核酸靶序列,最常用的变性试剂是A70%甲酰胺B100%乙醇C无水甲醇D丙酮E二甲苯【答案】A【考点解析】甲酰胺能够降低核酸双链的解链温度,避免高温变性对组织形态结构的破坏,70%甲酰胺水溶液在72℃条件下可将组织内的基因组DNA双链充分解离为单链,保证荧光标记的探针能够与靶序列特异性结合,是目前荧光原位杂交检测的核心变性试剂。20.透射电子显微镜病理标本的戊二醛固定液适宜浓度为A2.5%B10%C20%D40%E1%【答案】A【考点解析】电镜标本要求超微结构完整保留,2.5%戊二醛固定液能够快速渗透进入组织,稳定细胞内的膜性结构、细胞器形态,后续经过1%锇酸后固定,可完整保存细胞膜、线粒体、内质网、细胞核等超微结构,满足电镜下亚细胞水平的病理诊断需求。21.下列关于流式细胞术样本制备的描述,错误的是A新鲜组织标本需经过机械法或酶法处理制备成单细胞悬液B细胞悬液的最佳细胞浓度调整为1×10^6~1×10^7个/mLC细胞固定必须选用4%戊二醛固定24h以上D染色前需对细胞表面的非特异性结合位点进行封闭E检测过程中需设置同型对照管排除非特异性荧光干扰【答案】C【考点解析】戊二醛会改变细胞膜表面抗原的蛋白构象,导致荧光抗体无法与抗原结合,流式细胞术标本固定需选用预冷的70%乙醇4℃固定,既能够保持细胞形态完整,又不会破坏细胞膜表面抗原的天然构象,保障检测结果准确性。22.血清蛋白电泳染色后出现蛋白条带拖尾模糊的问题,最常见的诱因是A电泳缓冲液使用时间过长,离子强度偏离标准范围B电泳电压设置过低,电泳时间不足C凝胶浓度过高,蛋白分子迁移速度过慢D样本上样量过少,蛋白区带信号强度不足E染色液配置时间过短,未充分溶解【答案】A【考点解析】电泳缓冲液经过多次使用后缓冲能力下降,离子强度分布不均,带电蛋白分子在电场中迁移速度不稳定,最终会导致电泳条带弥散拖尾,定期更换新鲜配制的电泳缓冲液,可完全避免该类问题的发生。23.特殊染色中显示胶原纤维的经典染色方法是AVGVanGieson染色法B油红O染色法C普鲁士蓝染色法D弹力纤维染色法E阿辛蓝染色法【答案】A【考点解析】VanGieson染色采用酸性品红与丽春红作为染色剂,可将组织内的胶原纤维特异性染为鲜红色,肌纤维染为黄色,细胞核染为蓝黑色,是临床病理中最常用的胶原纤维显示技术,常用于鉴别纤维源性肿瘤与肌源性肿瘤的成分区分。油红O染色用于显示中性脂肪成分,普鲁士蓝染色用于显示组织内的含铁血黄素成分。24.下列试剂中,属于病理技术常用的强致癌性试剂,操作过程必须严格做好个人防护的是A二甲苯B甲醛C3-3'二氨基联苯胺(DAB)显色剂D乙醇E苏

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