2026年物医药细胞治疗技术员岗位试题(附答案)

2026年物医药细胞治疗技术员岗位试题(附答案)一、单项选择题（每题2分，共30分）1.以下哪种细胞是CAR-T疗法中最常用的效应细胞？A.自然杀伤细胞（NK细胞）B.T淋巴细胞C.树突状细胞（DC细胞）D.间充质干细胞（MSC）答案：B2.细胞治疗产品无菌检测时，需同时进行需氧菌、厌氧菌和真菌培养，培养时间至少为？A.3天B.5天C.7天D.14天答案：D3.用于细胞治疗的无血清培养基中，通常不包含以下哪种成分？A.重组生长因子B.人血清白蛋白C.动物源水解物D.微量元素答案：C4.细胞冻存时，常用的冷冻保护剂是？A.二甲基亚砜（DMSO）B.甘油C.乙二醇D.山梨醇答案：A5.流式细胞术检测CAR-T细胞表面靶点表达时，荧光抗体标记的最佳温度是？A.4℃B.25℃C.37℃D.56℃答案：A6.原代细胞培养时，若采用酶消化法分离组织，最常用的酶是？A.胰蛋白酶B.胃蛋白酶C.胶原酶D.透明质酸酶答案：C7.支原体污染对细胞培养的主要影响是？A.导致细胞快速死亡B.干扰细胞代谢和功能检测结果C.使培养基明显浑浊D.引发内毒素超标答案：B8.细胞治疗产品放行前，需检测的微生物指标不包括？A.细菌内毒素B.支原体C.分枝杆菌D.噬菌体答案：D9.间充质干细胞（MSC）的典型表面标志物是？A.CD34B.CD45C.CD73D.CD19答案：C10.病毒载体转导T细胞时，为提高转导效率，常用的辅助手段是？A.添加抗生素B.使用转导增强剂（如Retronectin）C.降低细胞密度D.延长培养时间至72小时答案：B11.细胞复苏时，正确的操作是？A.从液氮中取出冻存管后直接放入37℃水浴B.冻存管完全融化后立即离心去除DMSOC.融化后静置10分钟再离心D.复苏后直接加入新鲜培养基培养答案：B12.细胞治疗用生物反应器中，微载体培养适用于以下哪种细胞？A.悬浮生长的T细胞B.贴壁生长的MSCC.原代PBMCD.NK细胞答案：B13.以下哪项不属于细胞治疗产品的关键质量属性（CQA）？A.细胞活率B.细胞表型（如CD3+CD8+比例）C.生产车间温湿度D.细胞杀伤功能答案：C14.检测细胞治疗产品中外源病毒污染时，常用的方法是？A.革兰氏染色B.实时荧光定量PCR（qPCR）C.台盼蓝染色D.MTT法答案：B15.细胞治疗产品运输时，若采用液氮罐保存，温度需维持在？A.-20℃B.-80℃C.-150℃以下D.4℃答案：C二、多项选择题（每题3分，共30分，少选、错选均不得分）1.以下属于细胞治疗中“无菌操作”核心要求的是？A.操作前用75%乙醇擦拭超净台B.实验服定期高压灭菌C.所有接触细胞的耗材需经过辐照灭菌D.操作人员需戴无菌手套答案：ABCD2.影响CAR-T细胞扩增效率的因素包括？A.初始T细胞的活力B.培养基中IL-2的浓度C.病毒载体的滴度D.培养体系的气体环境（O2/CO2比例）答案：ABCD3.间充质干细胞（MSC）的鉴定标准包括？A.贴壁生长特性B.表达CD105、CD90、CD73C.不表达CD45、CD34、CD11bD.具备成骨、成脂、成软骨多向分化能力答案：ABCD4.细胞冻存时，导致细胞活力下降的常见原因有？A.冻存液中DMSO浓度过高（＞10%）B.降温速率过快（未使用程序降温盒）C.细胞密度过低（＜1×106/mL）D.冻存前细胞未完全汇合（贴壁细胞）答案：ABCD5.流式细胞术检测细胞表型时，可能导致假阳性的原因是？A.抗体非特异性结合B.同型对照设置错误C.细胞自发荧光过强D.流式细胞仪电压参数设置过低答案：ABC6.细胞治疗产品的质量控制文件应包括？A.生产工艺规程B.中间产品检验标准C.不合格品处理流程D.员工培训记录答案：ABCD7.以下哪些操作可能导致细胞培养污染？A.打开培养瓶时瓶口未过火B.超净台风机未提前开启30分钟C.培养基在4℃保存超过2周D.从液氮中取冻存管时未戴防冻手套答案：ABC8.病毒载体（如慢病毒）制备的关键质量指标包括？A.病毒滴度（TU/mL）B.无菌性C.内毒素水平D.目的基因插入片段的完整性答案：ABCD9.细胞治疗用血清的质量要求包括？A.来源明确（如胎牛血清需注明国家/地区）B.经过支原体检测C.无特定病原体（如BVDV）D.血红蛋白含量（反映溶血程度）答案：ABCD10.细胞治疗产品放行前需进行的功能检测包括？A.CAR-T细胞的体外杀伤实验（如LDH释放法）B.MSC的免疫抑制功能检测（如混合淋巴细胞反应）C.NK细胞的脱颗粒实验（CD107a表达）D.细胞活率（台盼蓝染色）答案：ABC三、判断题（每题2分，共20分，正确填“√”，错误填“×”）1.细胞治疗中，原代细胞可无限传代培养。（）答案：×2.支原体污染可通过常规革兰氏染色检测。（）答案：×3.细胞冻存时，DMSO的作用是降低细胞内冰晶形成。（）答案：√4.无血清培养基可完全替代含血清培养基，且不存在批次差异。（）答案：×5.CAR-T细胞制备中，T细胞激活常用抗CD3/CD28磁珠。（）答案：√6.细胞治疗产品的内毒素检测应采用革兰氏染色法。（）答案：×7.间充质干细胞（MSC）具有免疫原性，回输前需进行HLA配型。（）答案：×8.病毒载体转导后，需去除未转导的细胞以提高产品均一性。（）答案：√9.细胞复苏时，快速融化（37℃水浴）可减少冰晶对细胞的损伤。（）答案：√10.细胞治疗用生物反应器的关键参数包括pH、溶氧（DO）、搅拌速度。（）答案：√四、简答题（每题6分，共30分）1.简述细胞治疗产品中“微生物限度检测”的主要项目及标准。答案：主要项目包括无菌检测（需氧菌、厌氧菌、真菌）、支原体检测（培养法或qPCR法）、内毒素检测（鲎试剂法）。标准：无菌检测需培养14天无微生物生长；支原体检测结果为阴性；内毒素水平≤5EU/kg（或按产品注册标准）。2.无血清培养基相较于含血清培养基的优势有哪些？答案：优势包括：①减少动物源成分污染风险（如病毒、支原体）；②成分明确，批次间差异小，利于工艺稳定；③便于下游纯化（无血清蛋白干扰）；④降低免疫原性（回输时减少过敏反应）；⑤支持特定细胞的定向分化或功能维持。3.列举CAR-T细胞制备过程中需控制的关键步骤及质量控制点。答案：关键步骤及控制点：①外周血单核细胞（PBMC）分离：控制细胞得率、活率（＞90%）；②T细胞激活：CD3/CD28磁珠比例（通常1:1）、激活时间（24-48小时）；③病毒转导：病毒滴度（≥1×108TU/mL）、转导效率（≥30%）；④细胞扩增：培养基成分（如IL-2浓度）、扩增倍数（通常＞50倍）；⑤收获与制剂：活率（＞85%）、表型（CAR+比例）、功能（杀伤活性）。4.间充质干细胞（MSC）鉴定时，为何需同时检测表面标志物和多向分化能力？答案：表面标志物（如CD73、CD90、CD105阳性，CD34、CD45阴性）仅反映细胞的表型特征，但无法完全证明其功能活性；多向分化能力（成骨、成脂、成软骨）是MSC的核心功能属性，两者结合可综合确认细胞的“间充质干细胞”特性，避免因表型相似但功能缺失的细胞被误判。5.细胞培养过程中发现培养基pH异常偏酸，可能的原因及解决措施有哪些？答案：可能原因：①细胞密度过高，代谢产酸（乳酸）过多；②CO2培养箱浓度异常（如低于5%）；③培养基缓冲能力不足（如HEPES含量低）；④污染（如细菌代谢产酸）。解决措施：镜检观察细胞状态及是否有污染；检测CO2浓度并校准；若细胞密度过高，及时传代；若污染，丢弃培养物并彻底消毒环境。五、案例分析题（每题10分，共20分）案例1：某实验室在制备CAR-T细胞时，发现病毒转导效率仅15%（目标≥30%），且转导后细胞扩增倍数低（＜10倍，目标≥50倍）。请分析可能原因及改进措施。答案：可能原因：①病毒载体滴度不足（如保存不当导致活性下降）；②T细胞激活不充分（激活时间过短或磁珠比例不当）；③转导时细胞密度过低（最佳密度1×106-2×106/mL）；④培养基中存在抑制转导的成分（如抗生素浓度过高）；⑤细胞状态差（初始PBMC活率低）。改进措施：检测病毒滴度（qPCR法），确保使用新鲜或正确冻存的病毒；延长激活时间至48小时，调整磁珠与细胞比例（1:1）；优化转导时细胞密度；更换无抗生素培养基（或降低浓度）；确保PBMC分离后活率＞90%，24小时内开始激活。案例2：某批次MSC冻存后复苏，发现细胞活率仅60%（目标≥80%），且贴壁能力显著下降。请分析可能的操作失误及预防方法。答案：可能操作失误：①冻存时细胞密度过低（＜1×106/mL，最佳2×106-5×106/mL）；②冻存液中DMSO浓度不准确（如＞10%导致毒性）；③降温速率过快（未使用程序