不明原因感染检验医学诊断手册

不明原因感染检验医学诊断手册

一、概述

不明原因感染是指患者出现感染症状，但经过标准病原学检测仍无

法明确病原体的状况。检验医学在不明原因感染的诊断中扮演关键

角色，通过多学科协作和综合性检测手段，提高诊断效率和准确

性。本手册旨在为临床医生和检验人员提供诊断流程和方法指导。

二、诊断流程

(一)临床信息收集

1.详细病史采集

(1)感染症状：发热、咳嗽、乏力等。

(2)旅行史：近期是否前往疫区或接触过疑似感染者。

(3)接触史：职业暴露、动物接触、医疗暴露等。

2.实验室检测指标初筛

(1)血常规：白细胞计数、淋巴细胞分类等。

(2)C反应蛋白(CRP)：评估炎症水平。

(二)病原学检测

1.常规病原学检测

(1)病毒核酸检测：如PCR检测流感病毒、冠状病毒等。

(2)细菌培养：血培养、痰培养等。

(3)真菌检测：真菌培养、G试验/GM试验。

2.特殊病原学检测

(1)寄生虫检测：粪便寄生虫卵检查、血清抗体检测。

(2)新兴病毒检测:如埃博拉病毒、SARS-CoV-2等。

(三)影像学及组织学检查

1.影像学检查

(1)胸部CT：观察肺部炎症表现。

⑵腹部超声：排除腹腔感染。

2.组织学检查

(1)纤维支气管镜活检：获取呼吸道组织样本。

(2)肺穿刺活检：适用于疑难病例。

三、诊断标准

(一)排除标准

1.经标准检测明确病原体者。

2.合并其他明确感染性疾病者。

(二)疑似标准

1.具备典型感染症状，但常规检测阴性。

2.有潜在暴露风险，且持续出现感染指标异常。

(三)确诊标准

1.特异性病原学检测阳性。

2.影像学或组织学检查支持感染诊断。

四、实验室操作要点

(-)样本采集与处理

1.血液样本：采集静脉血5mL,避免溶血。

2.痰液样本：清晨咳痰，使用无菌容器收集。

3.组织样本：活检后立即固定于10%甲醛溶液。

(二)检测方法选择

1.核酸检测：优先选择PCR技术，灵敏度为95%-98%。

2.培养检测：需延长培养时间至7T0天，提高阳性率。

3.抗体检测：IgM阳性提示近期感染，IgG阳性提示既往感染。

五、诊断流程图

1.收集临床信息一常规病原学检测一特殊病原学检测

2.如仍阴性一影像学检查一组织学检查

3.结合结果一排除/疑似/确诊一多学科会诊

六、注意事项

1.检测过程中需严格遵循生物安全三级标准。

2.避免样本交叉污染，优先采用单人单管检测。

3.对于疑似病例，建议动态监测病原学指标变化。

七、参考文献

（略）

一、概述

不明原因感染是指患者出现明确的感染相关症状或体征，但经过标

准化的、针对性的病原学检测流程后，仍未确定具体致病病原体的

临床状况。这类病例在临床实践中时有发生，可能涉及多种罕见或

新兴病原体，也可能与检测技术的局限性、样本采集的不当或疾病

早期阶段有关。检验医学在不明原因感染的诊断中处于核心地位，

通过运用先进的检测技术和方法，结合临床信息，为疾病的鉴别诊

断和精准治疗提供关键依据。本手册旨在系统性地梳理不明原因感

染的检验诊断思路、常用技术及操作要点，为临床医生和实验室工

作人员提供一份实用的操作指南，以提升诊断效率和准确性。

二、诊断流程

（一）临床信息收集与评估

1.详细病史采集是诊断的起点，需系统、深入地进行，主要包

括：

（1）症状学特征：

发热模式：起病时间、发热频率（持续性、间歇性）、最高体

温、伴随寒战情况c不同病原体引起的发热曲线可能具有特征性，

例如，某些病毒感染可能呈现双相热，而立克次体感染常表现为波

浪热。

呼吸道症状：咳嗽的性质（干咳、湿咳）、咳痰量与颜色、呼吸

困难、胸痛等。注意症状的严重程度和进展速度。

消化道症状：恶心、呕吐、腹泻（频率、性状、颜色）、腹痛

等，需注意症状出现的顺序和持续时间。

神经系统症状：头痛、意识模糊、抽搐、乏力、肌肉酸痛等，

有助于提示中枢神经系统受累。

其他症状：如皮疹（注意分布、形态、出疹时间）、关节肌肉疼

痛、淋巴结肿大等。

（2）流行病学史：

时间线：发病前具体日期及活动范围，包括居住地、工作场

所、旅行史（目的地、时间、当地疾病流行情况）。

暴露史：是否接触过已知或疑似感染者、动物（特别是啮齿

类、鸟类、节肢动物）或流浪动物，是否从事高风险职业（如兽

医、实验室工作人员），是否前往过特殊环境（如洞穴、疫水）。

饮食史：近期饮食情况，是否食用生食或未充分煮熟的食物、

水源情况。

2.实验室检测指标初筛有助于评估感染的可能性和严重程度:

(1)血常规分析：

白细胞计数(WBC)：升高(>10xIO,9/L)通常提示细菌感染

或炎症；降低(<4x10^9/L)可见于病毒感染、某些细菌感染或免

疫抑制状态：正常范围(4-10x10^9/L)不能完全排除感染。

白细胞分类：中性粒细胞比例和绝对值升高提示化脓性细菌感

染；淋巴细胞比例和绝对值升高提示病毒感染或某些真菌/寄生虫感

染；嗜酸性粒细胞升高可能与寄生虫感染、过敏或某些皮肤病相

关；嗜碱性粒细胞变化较少见，但可见于某些寄生虫感染或过敏状

态。

血小板计数(PLT)：降低(<100x10^9/L)可能提示感染、脾

功能亢进或消耗性疾病。

(2)炎症标志物检测：

C反应蛋白(CRD：是常见的急性期反应蛋白，在感染或组织

损伤后迅速升高，其升高程度通常与炎症程度成正比，但对特定病

原体无特异性。CRP>10mg/L常提示存在感染或炎症。

血沉(ESR)：也是急性期反应蛋白，但受多种因素影响，不如

CRP敏感，但在某些感染(如结核病、布鲁氏菌病)中可有显著升

高。

降钙素原(PCT)：在细菌感染(特别是革兰氏阴性菌)时升高

较晚(通常在感染后6-12小时)，对病毒感染的敏感性较低，可用

于区分细菌感染与病毒感染，以及评估感染严重程度。

(二)病原学检测策略

病原学检测是明确诊断的关键环节，需要根据临床suspicion和初

步检测结果，有针对性地选择检测项目和层次。

1.常规病原学检测（基础筛查）：应作为首选和必做项目，覆盖

最常见的人类病原体。

（1）病毒核酸检测：

技术：主要采用实时荧光聚合酶链式反应（Real-timePCR）或

反转录PCR（RT-PCR）技术。

检测项目（根据地区和季节调整）：常见的呼吸道病毒如流感病

毒A/B型、人偏肺病毒、腺病毒、鼻病毒、呼吸道合胞病毒

（RSV）、冠状病毒（通用型筛查，如2019-nCoV通用引物）等；肠

道病毒；肝炎病毒（HAV,HBV,HCV）；人亘细胞病毒（HCMV）；EB

病毒病BV）等。

样本类型：根据症状选择，如呼吸道症状取鼻咽拭子、唾液或

痰液；消化道症状取粪便；全身症状或疑似血液传播取血液。

（2）细菌培养与药敏：

技术：传统微生物培养结合生化鉴定和血清学分型。必要时进

行分子生物学鉴定（如16SrRNA基因测序）。

检测项目：血培养（用于败血症疑诊）、痰培养（用于社区获得

性肺炎）、尿培养（用于尿路感染）、粪便培养（用于腹泻病）、脑脊

液培养（用于脑膜炎/脑炎疑诊）等。

药敏试验：对培养阳性菌株进行药敏测试，指导临床用药。

（3）真菌检测：

技术：真菌培养（最常用，需较长时间）、真菌抗原检测（如G

试验、GM试验，用于隐球菌）、真菌抗体检测（辅助诊断）、真菌分

子生物学检测（如PCR检测特定真菌DNA）。

样本类型：血液（真菌血症）、脑脊液（隐球菌性脑膜炎）、痰

液（肺部真菌感染）、尿液（隐球菌尿）、组织活检样本。

2.特殊病原学检测（深入排查）：当常规检测阴性，但临床高度

怀疑感染时，应考虑以下更特殊或广泛的检测手段。

（1）寄生虫学检测：

技术：粪便检查（查找虫卵、卵囊、成虫、包囊，如阿米巴、

钩虫、绦虫等）；血液/体液/组织涂片染色（如血涂片查找疟原虫、

利什曼原虫）；血清学检测（检测寄生虫抗体，如弓形虫、疟原虫、

棘球绦虫等）；分子生物学检测（如PCR检测寄生虫DNA）。

样本类型：根据怀疑的寄生虫种类选择，如粪便.血液、骨髓

穿刺液、脑脊液、活检组织等。

（2）新兴或少见病毒检测：

技术：针对特定病毒基因的PCR检测、病毒抗原检测、病毒抗

体检测（TgM/TgG）.病毒分离培养、基因测序与溯源分析。

检测项目：可根据流行病学线索或基因库信息，选择检测如埃

博拉病毒、马尔堡病毒、SARS相关冠状病毒、HIV（如果高危因

素）、人畜共患病相关病毒（如汉坦病毒、Crimean-Congo出血热

病毒）等。

（3）立克次体检测：

技术：外斐试验（非特异性，但常阳性）、血清学检测（检测立

克次体抗体IgM/IgG）、分子生物学检测（PCR检测血液或组织中的

立克次体DNA）。

（4）分枝杆菌检测：

技术：肺炎支原体（MP）抗原/抗体检测、结核分枝杆菌

（MTB）培养（金标准,但周期长）、MTB快速分子检测（如Xpert

MTB/RIF检测）、MTB抗体检测（辅助）、MTB核酸检测（如PCR）。

（5）非典型病原体检测：

技术：常规细菌培养的增菌培养（延长培养时间至7T4天）、

特殊培养基、分子生物学检测（如16srRNA基因测序、宏基因组测

序）。

涵盖范围：如卡他莫拉菌、嗜肺军团菌、空肠弯曲菌、厌氧菌

等。

（三）影像学及组织学检查

影像学和病理学检查有助于评估感染部位、程度和性质，为病原学

诊断提供重要线索，尤其是在病原学检测阴性时。

1.影像学检查：

（1）胸部影像学：

X射线胸片：初步筛查，可发现肺炎、肺结核、肺栓塞、间质

性改变等。

胸部CT（计算机断层扫描）：提供更详细的信息，能够显示肺

部的细微病变，如磨玻璃影、实变、胸腔积液、淋巴结肿大等。高

分辨率CT（HRCT）对间质性肺病尤为重要。CT引导下穿刺活检可用

于获取组织样本。

（2）腹部影像学：

超声检查：无创检查，适用于观察腹腔内器官（肝、脾、肾、

肠道）有无肿大、积液、占位性病变等。

CT扫描：提供更全面的腹部信息，用于诊断腹腔感染（如肝脓

肿、脾脓肿）、腹腔脓肿、肠梗阻、腹水等。

磁共振成像（MRI）：在某些情况下（如盆腔感染、对CT造影剂

过敏者）作为替代检查方法。

（3）其他部位影像学：根据受累部位选择，如脑部CT/MRI（中枢

神经系统感染）、骨关节MRI（骨骼肌肉系统感染）。

2.组织学检查：

（1）获取方式：

呼吸道：纤维支气管镜检查（纤支镜）可进行活检（支气管肺

泡灌洗液BALF、支气管黏膜活检）、刷检、灌洗，是获取下呼吸道

组织/细胞样本的重要方法。

肺部：胸腔穿,刺活检（适用于胸腔积液），经皮肺穿刺活检（适

用于周围型肺部病变）、开胸肺活检（诊断金标准，但有创伤）。

（2）其他部位：根据需要选择，如淋巴结穿刺活检、腹膜活检、脑

组织活检（通常在立体定向引导下进行）、皮肤活检（查找病原伍或

炎症反应特征）、肌肉活检等。

（3）实验室检测：

组织病理学：光镜下观察组织结构破坏、炎症细胞浸润类型与

分布、有无特异性病原体形态（如细菌、真菌菌丝/泡子、寄生虫虫

体/卵囊）。

免疫组化（IHC）：检测组织中的特定抗原或抗体，有助于识别

细胞类型或病原体C

特殊染色：如Gram染色（细菌）、Giemsa染色（寄生虫、某些

病毒包涵体）、抗酸染色（分枝杆菌）、PAS染色（真菌）、银染色

（真菌、阿米巴）等。

分子病理学：如组织内病原体DNA/RNA检测（PCR）、原位杂交

（ISH）o

三、诊断标准

不明原因感染的诊断是一个动态和迭代的过程，通常不依赖单一标

准，而是结合临床、实验室和影像学信息进行综合判断。

（一）排除标准

1.经过系统性、标准的病原学检测（包括至少一项常规病原学检

测）后，能够明确找到致病病原体者，应诊断为已明确病原体的感

染。

2.患者症状轻微，或存在其他明确的非感染性病因（如自身免疫

病，肿瘤、药物反应等）能够完全解释其临床表现者，应排除不明

原因感染诊断。

3.临床病情迅速好转，或出现明确的非感染性病程演变特征者，

可能无需进一步复杂的病原学搜索。

（二）疑似标准

1.患者具有明确的感染相关症状或体征（如持续发热、不明原因

的器官功能损害等）。

2.经标准化的常规病原学检测（至少包括一项覆盖常见呼吸道病

毒、常见细菌和结核菌的检测）结果均阴性。

3.临床医生根据病史、体格检查和初步实验室结果，仍高度怀疑

存在感染性疾病，或存在潜在的特殊病原体暴露风险。

4.排除了已知的非感染性诊断。

（三）确诊标准

1.在疑似基础上，通过一项或多项特殊病原学检测（如针对特定

病毒的PCR、特殊细菌/真菌的培养、寄生虫学检查、立克次体/非

典型病原体检测等）结果阳性，且该病原体与临床表现相符。

2.对于部分难以培养或检测的病原体，若临床表现典型，且影像

学、组织病理学检查结果高度支持，结合分子生物学检测（如

PCR）在血液或组织中阳性，也可考虑确诊。

3.获得病原体分离培养，并经鉴定确证。

4.在特定情况下，若患者死亡，可通过尸体解剖（尸检）发现病

原体或明确病理改变，从而确诊生前未能明确诊断的不明原因感

染。

四、实验室操作要点

在不明原因感染的检测过程中，严格遵循标准化操作规程（SOP）和

生物安全规范至关重要。

（一）样本采集与处理

1.规范采集：

血液样本：避免使用含抗凝剂或促凝剂的采血管（除非检测特

定项目要求），采集量需满足所有预定检测项目需求（通常5-

10mL,根据检测项目数量调整）。采集时避免溶血，若已溶血应注明

并可能需要重新采样。及时分离血清或血浆，若无法立即检测应妥

善保存（如低温）。

呼吸道样本：鼻咽拭子应深入鼻腔后部和中后部咽部；痰液样

本应鼓励患者深咳获取脓性痰，避免唾液污染。样本采集后应立即

处理或冷藏保存（根据检测要求）。

粪便样本：使用干净容器收集，量约3-5g。若怀疑寄生虫，应

留取新鲜粪便不同部位多次取样（如“三线法”）。及时处理或冷藏

保存。

尿液样本：首次晨尿通常最优。若怀疑泌尿系统感染，需中段

尿采样。及时处理或冷藏保存。

脑脊液样本：动作轻柔，避免血液污染。采集量根据检测项目

决定，一般3-5mL。立即送检或冷藏。

组织样本：活检后立即置于1096中性甲醛溶液中固定（注意标

本大小和数量需满足所有检测需求），标记清晰，并尽快送检病理

科。需冷冻保存的组织（如进行分子检测）应立即置于RNAlater

溶液或液氮中。

2.样本处理与保存：

及时性：样本采集后应尽快处理或送检，避免因时间过长导致

细胞自溶、病原体死亡或污染。

保存条件：严格按照不同样本和检测项目的要求进行保存（如

室温、冷藏、冷冻、加抗凝剂/促凝剂等）。

避免污染：严格遵守无菌操作原则，防止样本间交叉污染。优

先采用单人单管检测策略，尤其是在检测疑似高致病性病原体时。

（二）检测方法选择与优化

1.优先选择高灵敏度、高特异性的方法：对于诊断，尤其是初

筛，优先选择PCR等分子生物学技术，因其灵敏度和特异性通常优

于培养和血清学方法。

2.综合运用多种检测技术：不应依赖单一检测方法。应根据临床

情况、样本类型和可用的技术平台，组合使用不同类型的检测（如

培养+分子检测+血清学）。

3.关注检测限（LOD）和线性范围（L0Q）：选择适合样本浓度范

围的检测方法，避免假阴性。对于低浓度病原体，需要高灵敏度的

方法。

4.室内质控（IQC）与室间质评（EQA）：所有检测项目必须建立

完善的IQC方案，并定期参加EQA计划，确保检测结果的准确性和

可靠性。

5.特殊情况下的检测策略：

疑似细菌感染但培养阴性：可考虑延长培养时间（如7-10

天）、使用选择培养基、进行16srRNA基因测序辅助鉴定。

疑似真菌感染但培养阴性：可进行血清学检测（G试验/GM试

验）、分子生物学检测（如组织PCR）、影像学检查寻找典型征象°

疑似病毒感染但PCR阴性：考虑检测病毒抗体（IgM/IgG）,病

毒抗原、或进行病毒分离培养。需注意采样时间和病毒载量可能影

响结果。

疑似寄生虫感染但常规检查阴性：考虑使用分子生物学方法

（如粪便或血液PCR）或血清学方法。

五、诊断流程图

以下是一个简化的不明原因感染检验诊断流程图，实际操作中需根

据具体情况灵活调整：

开始一〉［收集详细临床信息&初步实验室检查（血常规，CRP

等）］

V

［常规病原学检测（病毒，细菌，真菌）］--〉［结果?］

Yes->［根据结果诊断或

继续特殊检测］

［评估常规结果&临床怀疑程度］No

II

V|—>「进行特殊病原学检测

（按需选择）］

［选择特殊检测项目（如病毒/寄生虫/立克次体等）］->［结果?］

II

V|Yes—>［根据结果诊断或

结合临床/影像/病理］

［结果?］

INo

V|

［阴性—>排除感染或考虑非感染性病因］一〉［结合临床、影

像、组织学信息综合判断］

I

V

［可能需要多学科会诊］

六、注意事项

1.生物安全：所有涉及病原体样本的采集、处理、检测和运输过

程，必须严格遵守相应的生物安全等级（通常为二级或三级）操作

规程，特别是对于疑似或已知的高致病性病原体。实验室人员需接

受专业培训，正确穿戴个人防护装备（PPE）o

2.沟通协作：检验科与临床科室需保持密切沟通，检验人员应充

分理解临床需求，临床医生应提供详尽的临床信息以指导检验选

择。必要时组织多学科会诊（MDT）,整合各学科信息。

3.动态监测：对于病情复杂或检测结果不确定的病例，应进行动

态监测,包括重复检测、追踪病原学指标变化（如病毒载量、抗体

滴度）、观察病情演变。

4.结果解读：检验结果解读需结合临床信息，注意排除假阳性

（如标本污染、检测交叉反应）和假阴性（如采样时机不当、病原

体载量过低、检测方法局限）。阴性结果并不完全排除感染可能。

5.资源整合：不明原因感染诊断往往需要整合医院内不同科室

（检验、临床、影像、病理、微生物等）的资源和能力。建立快速

响应机制和跨部门协作流程有助于提高诊断效率。

七、参考文献

（此处可根据实际需要列出相关的专业书籍、指南或文献，但根据

要求，具体文献列表省略。）

一、概述

不明原因感染是指患者出现感染症状，但经过标准病原学检测仍无

法明确病原体的状况。检验医学在不明原因感染的诊断中扮演关键

角色，通过多学科协作和综合性检测手段，提高诊断效率和准确

性。本手册旨在为临床医生和检验人员提供诊断流程和方法指导。

二、诊断流程

（一）临床信息收集

1.详细病史采集

(1)感染症状：发热、咳嗽、乏力等。

(2)旅行史：近期是否前往疫区或接触过疑似感染者。

(3)接触史：职业暴露、动物接触、医疗暴露等。

2.实验室检测指标初筛

(1)血常规：白细胞计数、淋巴细胞分类等。

(2)C反应蛋白(CRP)：评估炎症水平。

(二)病原学检测

1.常规病原学检测

(1)病毒核酸检测：如PCR检测流感病毒、冠状病毒等。

(2)细菌培养：血培养、痰培养等。

(3)真菌检测：真菌培养、G试验/GM试验。

2.特殊病原学检测

(1)寄生虫检测：粪便寄生虫卵检查、血清抗体检测。

(2)新兴病毒检测：如埃博拉病毒、SARS-CoV-2等。

(三)影像学及组织学检查

1.影像学检查

(1)胸部CT：观察肺部炎症表现。

(2)腹部超声：排除腹腔感染。

2.组织学检查

(1)纤维支气管镜活检：获取呼吸道组织样本。

(2)肺穿刺活检：适用于疑难病例。

三、诊断标准

（一）排除标准

1.经标准检测明确病原体者。

2.合并其他明确感染性疾病者。

（二）疑似标准

1.具备典型感染症状，但常规检测阴性。

2.有潜在暴露风险，且持续出现感染指标异常。

（三）确诊标准

1.特异性病原学检测阳性。

2.影像学或组织学检查支持感染诊断。

四、实验室操作要点

（一）样本采集与处理

1.血液样本：采集静脉血5mL,避免溶血。

2.痰液样本：清晨咳痰，使用无菌容器收集。

3.组织样本：活检后立即固定于10%甲醛溶液。

（二）检测方法选择

1.核酸检测：优先选择PCR技术，灵敏度为95%98%。

2.培养检测：需延长培养时间至7-10天，提高阳性率。

3.抗体检测：IgM阳性提示近期感染，IgG阳性提示既往感染。

五、诊断流程图

1.收集临床信息一常规病原学检测一特殊病原学检测

2.如仍阴性一影像学检查一组织学检查

3.结合结果一排除/疑似/确诊一多学科会诊

六、注意事项

1.检测过程中需严格遵循生物安全三级标准。

2.避免样本交叉污染，优先采用单人单管检测。

3.对于疑似病例，建议动态监测病原学指标变化。

七、参考文献

（略）

一、概述

不明原因感染是指患者出现明确的感染相关症状或体征，但经过标

准化的、针对性的病原学检测流程后，仍未确定具体致病病原体的

临床状况。这类病例在临床实践中时有发生，可能涉及多种罕见或

新兴病原体，也可能与检测技术的局限性、样本采集的不当或疾病

早期阶段有关。检验医学在不明原因感染的诊断中处于核心地位，

通过运用先进的检测技术和方法，结合临床信息，为疾病的鉴别诊

断和精准治疗提供关键依据。本手册旨在系统性地梳理不明原因感

染的检验诊断思路、常用技术及操作要点，为临床医生和实验室工

作人员提供一份实用的操作指南，以提升诊断效率和准确性。

二、诊断流程

（一）临床信息收集与评估

1.详细病史采集是诊断的起点，需系统、深入地进行，主要包

括：

（1）症状学特征:

发热模式：起病时间、发热频率（持续性、间歇性）、最高体

温、伴随寒战情况c不同病原体引起的发热曲线可能具有特征性，

例如，某些病毒感染可能呈现双相热，而立克次体感染常表现为波

浪热。

呼吸道症状：咳嗽的性质（干咳、湿咳）、咳痰量与颜色、呼吸

困难、胸痛等。注意症状的严重程度和进展速度。

消化道症状：恶心、呕吐、腹泻（频率、性状、颜色）、腹痛

等，需注意症状出现的顺序和持续时间。

神经系统症状：头痛、意识模糊、抽搐、乏力、肌肉酸痛等，

有助于提示中枢神经系统受累。

其他症状：如皮疹（注意分布、形态、出疹时间）、关节肌肉疼

痛、淋巴结肿大等C

（2）流行病学史：

时间线：发病前具体日期及活动范围，包括居住地、工作场

所、旅行史（目的地、时间、当地疾病流行情况）。

暴露史：是否接触过已知或疑似感染者、动物（特别是啮齿

类、鸟类、节肢动物）或流浪动物，是否从事高风险职业（如兽

医、实验室工作人员），是否前往过特殊环境（如洞穴、疫水）。

饮食史：近期饮食情况，是否食用生食或未充分煮熟的食物、

水源情况。

2.实验室检测指标初筛有助于评估感染的可能性和严重程度:

（1）血常规分析：

白细胞计数(WBC)：升高(>10xIO'9/L)通常提示细菌感染

或炎症；降低(<4x1CT9/L)可见于病毒感染、某些细菌感染或免

疫抑制状态；正常范围(4-10x10^9/L)不能完全排除感染。

白细胞分类：中性粒细胞比例和绝对值升高提示化脓性细菌感

染；淋巴细胞比例和绝对值升高提示病毒感染或某些真菌/寄生虫感

染；嗜酸性粒细胞升高可能与寄生虫感染、过敏或某些皮肤病相

关；嗜碱性粒细胞变化较少见，但可见于某些寄生虫感染或过敏状

态。

血小板计数(PLT)：降低(<100x10^9/L)可能提示感染、脾

功能亢进或消耗性疾病。

(2)炎症标志物检测：

C反应蛋白(CRD：是常见的急性期反应蛋白，在感染或组织

损伤后迅速升高，其升高程度通常与炎症程度成正比，但对特定病

原体无特异性。CRP>10mg/L常提示存在感染或炎症。

血沉(ESR)：也是急性期反应蛋白，但受多种因素影响，不如

CRP敏感，但在某些感染(如结核病、布鲁氏菌病)中可有显著升

高。

降钙素原(PCT)：在细菌感染(特别是革兰氏阴性菌)时升高

较晚(通常在感染后6-12小时)，对病毒感染的敏感性较低，可用

于区分细菌感染与病毒感染，以及评估感染严重程度。

(二)病原学检测策略

病原学检测是明确诊断的关键环节，需要根据临床suspicion和初

步检测结果，有针对性地选择检测项目和层次。

1.常规病原学检测（基础筛查）：应作为首选和必做项目，覆盖

最常见的人类病原体。

（1）病毒核酸检测：

技术：主要采用实时荧光聚合酶链式反应（Real-timePCR）或

反转录PCR（RT-PCR）技术。

检测项目（根据地区和季节调整）：常见的呼吸道病毒如流感病

毒A/B型、人偏肺病毒、腺病毒、鼻病毒、呼吸道合胞病毒

（RSV）、冠状病毒（通用型筛查，如2019-nCoV通用引物）等；肠

道病毒；肝炎病毒（HAV,HBV,HCV）；人巨细胞病毒（HCMV）；EB

病毒（EBV）等。

样本类型：根据症状选择，如呼吸道症状取鼻咽拭子、唾液或

痰液；消化道症状取粪便；全身症状或疑似血液传播取血液。

（2）细菌培养与药敏：

技术：传统微生物培养结合生化鉴定和血清学分型。必要时进

行分子生物学鉴定（如16srRNA基因测序）。

检测项目：血培养（用于败血症疑诊）、痰培养（用于社区获得

性肺炎）、尿培养（用于尿路感染）、粪便培养（用于腹泻病）、脑脊

液培养（用于脑膜炎/脑炎疑诊）等。

药敏试验：对培养阳性菌株进行药敏测试，指导临床用药。

（3）真菌检测：

技术：真菌培养（最常用，需较长时间）、真菌抗原检测（如G

试验、GM试验，用于隐球菌）、真菌抗体检测（辅助诊断）、真菌分

子生物学检测（如PCR检测特定真菌DNA）。

样本类型：血液（真菌血症）、脑脊液（隐球菌性脑膜炎）、痰

液（肺部真菌感染）、尿液（隐球菌尿）、组织活检样本。

2.特殊病原学检测（深入排查）：当常规检测阴性，但临床高度

怀疑感染时，应考虑以下更特殊或广泛的检测手段。

（1）寄生虫学检测：

技术：粪便检查（查找虫卵、卵囊、成虫、包囊，如阿米巴、

钩虫、绦虫等）；血液/体液/组织涂片染色（如血涂片查找疟原虫、

利什曼原虫）；血清学检测（检测寄生虫抗体，如弓形虫、疟原虫、

棘球绦虫等）；分子生物学检测（如PCR检测寄生虫DNA）。

样本类型：根据怀疑的寄生虫种类选择，如粪便、血液、骨髓

穿刺液、脑脊液、活检组织等。

（2）新兴或少见病毒检测：

技术：针对特定病毒基因的PCR检测、病毒抗原检测、病毒抗

体检测（IgM/lgG）,病毒分离培养、基因测序与溯源分析。

检测项目：可根据流行病学线索或基因库信息，选择检测如埃

博拉病毒、马尔堡病毒、SARS相关冠状病毒、HIV（如果高危因

素）、人畜共患病相关病毒（如汉坦病毒、Crimean-Congo出血热

病毒）等。

（3）立克次体检测:

技术：外斐试验（非特异性，但常阳性）、血清学检测（检测立

克次体抗体IgM/lgG）、分子生物学检测（PCR检测血液或组织中的

立克次体DNA）。

（4）分枝杆菌检测：

技术：肺炎支原体（MP）抗原/抗体检测、结核分枝杆菌

（MTB）培养（金标准，但周期长）、MTB快速分子检测（如Xpert

MTB/RIF检测）、MTB抗体检测（辅助）、MTB核酸检测（如PCR）。

（5）非典型病原体检测：

技术：常规细菌培养的增菌培养（延长培养时间至7T4天）、

特殊培养基、分子生物学检测（如16srRNA基因测序、宏基因组测

序）。

涵盖范围：如卡他莫拉菌、嗜肺军团菌、空肠弯曲菌、厌氧菌

等。

（三）影像学及组织学检查

影像学和病理学检查有助于评估感染部位、程度和性质，为病原学

诊断提供重要线索，尤其是在病原学检测阴性时。

1.影像学检查：

（1）胸部影像学：

X射线胸片：初步筛查，可发现肺炎、肺结核、肺栓塞、间质

性改变等。

胸部CT（计算机断层扫描）：提供更详细的信息，能够显示肺

部的细微病变，如磨玻璃影、实变、胸腔积液、淋巴结肿大等。高

分辨率CT（HRCT）对间质性肺病尤为重要。CT引导下穿刺活检可用

于获取组织样本。

（2）腹部影像学：

超声检查：无创检查，适用于观察腹腔内器官（肝、脾、肾、

肠道）有无肿大、积液、占位性病变等。

CT扫描：提供更全面的腹部信息，用于诊断腹腔感染（如肝脓

肿、脾脓肿）、腹腔脓肿、肠梗阻、腹水等。

磁共振成像（MR1）：在某些情况下（如盆腔感染、对CT造影剂

过敏者）作为替代检查方法。

（3）其他部位影像学：根据受累部位选择，如脑部CT/MRI（中枢

神经系统感染）、骨关节MRI（骨骼肌肉系统感染）。

2.组织学检查：

（1）获取方式：

呼吸道：纤维支气管镜检查（纤支镜）可进行活检（支气管肺

泡灌洗液BALF、支气管黏膜活检）、刷检、灌洗，是获取下呼吸道

组织/细胞样本的重要方法。

肺部：胸腔穿刺活检（适用于胸腔积液）、经皮肺穿刺活检（适

用于周围型肺部病变）、开胸肺活检（诊断金标准，但有创伤）。

（2）其他部位：根据需要选择，如淋巴结穿刺活检、腹膜活检、脑

组织活检（通常在立体定向引导下进行）、皮肤活检（查找病原伍或

炎症反应特征）、肌肉活检等。

（3）实验室检测:

组织病理学：光镜下观察组织结构破坏、炎症细胞浸润类型与

分布、有无特异性病原体形态（如细菌、真菌菌丝/泡子、寄生虫虫

体/卵囊）。

免疫组化（IHC）：检测组织中的特定抗原或抗体，有助于识别

细胞类型或病原体C

特殊染色：如Gram染色（细菌）、Giemsa染色（寄生虫、某些

病毒包涵体）、抗酸染色（分枝杆菌）、PAS染色（真菌）、银染色

（真菌、阿米巴）等。

分子病理学：如组织内病原体DNA/RNA检测（PCR）、原位杂交

（ISH）o

三、诊断标准

不明原因感染的诊断是一个动态和迭代的过程，通常不依赖单一标

准，而是结合临床、实验室和影像学信息进行综合判断。

（一）排除标准

1.经过系统性、标准的病原学检测（包括至少一项常规病原学检

测）后，能够明确找到致病病原体者，应诊断为已明确病原体的感

染。

2.患者症状轻微，或存在其他明确的非感染性病因（如自身免疫

病、肿瘤、药物反应等）能够完全解释其临床表现者，应排除不明

原因感染诊断。

3.临床病情迅速好转，或出现明确的非感染性病程演变特征者，

可能无需进一步复杂的病原学搜索。

（二）疑似标准

1.患者具有明确的感染相关症状或体征（如持续发热、不明原因

的器官功能损害等）。

2.经标准化的常规病原学检测（至少包括一项覆盖常见呼吸道病

毒、常见细菌和结核菌的检测）结果均阴性。

3.临床医生根据病史、体格检查和初步实验室结果，仍高度怀疑

存在感染性疾病，或存在潜在的特殊病原体暴露风险。

4.排除了已知的非感染性诊断。

（三）确诊标准

1.在疑似基础上，通过一项或多项特殊病原学检测（如针对特定

病毒的PCR、特殊细菌/真菌的培养、寄生虫学检查、立克次体/非

典型病原体检测等）结果阳性，且该病原体与临床表现相符。

2.对于部分难以培养或检测的病原体，若临床表现典型，且影像

学、组织病理学检查结果高度支持，结合分子生物学检测（如

PCR）在血液或组织中阳性，也可考虑确诊。

3.获得病原体分离培养，并经鉴定确证。

4.在特定情况下，若患者死亡，可通过尸体解剖（尸检）发现病

原体或明确病理改变，从而确诊生前未能明确诊断的不明原因感

染。

四、实验室操作要点

在不明原因感染的检测过程中，严格遵循标准化操作规程（SOP）和

生物安全规范至关重要。

（一）样本采集与处理

1.规范采集：

血液样本：避免使用含抗凝剂或促凝剂的采血管（除非检测特

定项目要求），采集量需满足所有预定检测项目需求（通常5-

10mL,根据检测项目数量调整）。采集时避免溶血，若已溶血应注明

并可能需要重新采样。及时分离血清或血浆，若无法立即检测应妥

善保存（如低温）。

呼吸道样本：鼻咽拭子应深入鼻腔后部和中后部咽部；痰液样

本应鼓励患者深咳获取脓性痰，避免唾液污染。样本采集后应立即

处理或冷藏保存（根据检测要求）。

粪便样本：使用干净容器收集，量约3-5g。若怀疑寄生虫，应

留取新鲜粪便不同部位多次取样（如“三线法及时处理或冷藏

保存。

尿液样本：首次晨尿通常最优。若怀疑泌尿系统感染，需中段

尿采样。及时处理或冷藏保存。

脑脊液样本：动作轻柔，避免血液污染。采集量根据检测项目

决定，一般3-5mL。立即送检或冷藏。

组织样本：活检后立即置于10%中性甲醛溶液中固定（注意标

.本大小和数量需满足所有检测需求），标记清晰，并尽快送检病理

科。需冷冻保存的组织（如进行分子检测）应立即置于RNAlater

溶液或液氮中。

2.样本处理与保存：

及时性：样本采集后应尽快处理或送检，避免因时间过长导致

细胞自溶、病原体死亡或污染。

保存条件：严格按照不同样本和检测项目的要求进行保存（如

室温、冷藏、冷冻、加抗凝剂/促凝剂等）。

避免污染：严格遵守无菌操作原则，防止样本间交叉污染。优

先采用单人单管检测策略，尤其是在检测疑似高致病性病原体时。

（二）检测方法选择与优化

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