2026年液相色谱维护保养考试题附答案

2026年液相色谱维护保养考试题附答案填空题（共15题，每空2分，合计30分）1.常规硅胶基质反相色谱柱的耐受pH范围通常为____，超出该范围易导致键合相水解脱落或硅胶基质溶蚀。（答案：2-8）2.液相色谱系统流动相及样品过滤常用的滤膜孔径为____μm，其中水系滤膜仅适用于过滤水相溶液，有机系滤膜可通用于有机相和水相。（答案：0.22）3.常规氘灯的标称使用寿命为____h，当检测器能量低于设定阈值或基线噪声显著增大时需及时更换，频繁开关氘灯会大幅缩短使用寿命，单次开关损耗相当于连续使用2-3h。（答案：2000）4.液相色谱系统正常运行时，压力波动范围应控制在____MPa以内，超出该范围提示系统存在气泡、单向阀污染或密封圈磨损等问题。（答案：±0.2）5.反相液相色谱系统使用含盐流动相后，需先用____比例的水相（如10%甲醇水溶液）冲洗系统30min以上，再切换高比例有机相，避免盐析出堵塞管路和色谱柱。（答案：高）6.反相色谱柱长期闲置时，需用纯甲醇或____冲洗20倍柱体积以上，排空柱内残留水相后密封两端，置于4℃阴凉环境保存，避免柱床干涸坍塌。（答案：乙腈）7.自动进样器的洗针液需每日更换，反相体系常用的洗针液为____，可有效降低样品残留，避免交叉污染。（答案：10%甲醇水溶液）8.泵密封圈连续使用的常规更换周期为____个月，若出现压力持续波动、泵头漏液等现象需提前更换。（答案：3-6）9.液相色谱废液缸盛放废液不可超过总容积的____，避免废液溢出腐蚀仪器台面和电路模块。（答案：2/3）10.新色谱柱首次使用前，需用初始流动相平衡____倍柱体积以上，待基线平稳、压力稳定后方可进样，避免保留时间漂移。（答案：30）11.流动相超声脱气的最佳时长为____min，脱气时间过长会导致有机相挥发，改变流动相比例，影响分离重复性。（答案：10-15）12.紫外检测器流通池污染的典型表现为____、基线噪声增大、空白走样出现杂峰，需及时清洗流通池。（答案：基线漂移严重）13.超高效液相色谱（UPLC）系统使用的色谱柱粒径通常小于2μm，系统最高耐受压力一般为____MPa，运行时不可超过压力上限，避免损坏泵组件和色谱柱。（答案：130）14.进样阀转子密封垫的常规更换周期为____个月，若出现进样后峰面积重复性差、漏液等问题需及时更换。（答案：1-3）15.液相系统日常维护的核心“三防”原则为防污染、防气泡、____，是降低故障发生率的核心要求。（答案：防盐析）单项选择题（共10题，每题2分，合计20分）1.以下哪种流动相不可长时间在常规C18反相色谱柱中运行？A.甲醇B.乙腈C.100%纯水D.四氢呋喃（答案：C，解析：100%纯水会导致C18键合相疏水坍塌，降低柱效和使用寿命）2.氘灯开启后需预热多长时间方可进样分析？A.立即进样B.10-30minC.1hD.2h（答案：B，解析：预热可使氘灯能量稳定，降低基线噪声，保证检测重复性）3.液相系统压力突然升高，以下哪种原因不可能导致该故障？A.色谱柱堵塞B.进样阀堵塞C.流动相脱气不完全D.管路接头堵塞（答案：C，解析：流动相脱气不完全会导致压力波动，不会造成压力突然升高）4.清洗含盐残留的反相系统时，以下哪种试剂不可直接使用？A.纯水B.5%乙腈水溶液C.10%甲醇水溶液D.纯乙腈（答案：D，解析：纯乙腈会导致系统内残留的盐析出，堵塞管路和色谱柱）5.以下哪项维护工作不属于每周需完成的范畴？A.清洗泵头排液阀B.更换在线过滤器滤芯C.检查自动进样器密封垫磨损情况D.检测氘灯能量（答案：D，解析：氘灯能量检测为每月/季度维护内容，无需每周开展）6.以下哪种滤膜可用于过滤纯乙腈流动相？A.水系纤维素滤膜B.有机系尼龙滤膜C.普通滤纸D.以上都可以（答案：B，解析：水系滤膜接触有机相会溶解，造成流动相污染）7.连续进样时峰面积RSD超标，以下哪种原因不可能导致该问题？A.自动进样针堵塞B.进样阀漏液C.流动相比例变化D.氘灯能量过高（答案：D，解析：氘灯能量过高不会影响峰面积重复性，能量不足才会导致重复性差）8.正相色谱柱长期闲置时，应保存在以下哪种试剂中？A.甲醇B.正己烷C.纯水D.10%甲醇水溶液（答案：B，解析：正相色谱柱需保存在非极性有机溶剂中，避免键合相损坏）9.以下关于色谱柱使用的描述，正确的是？A.可直接在柱温箱中设置超过色谱柱最高耐受温度的参数B.色谱柱可随意反接冲洗，无需考虑出厂标识C.更换流动相时需逐步调整比例，避免极性突变损坏键合相D.含盐流动相可直接存放在色谱柱中过夜（答案：C，解析：其余选项均会大幅缩短色谱柱使用寿命）10.流通池清洗时，以下哪种操作是错误的？A.断开色谱柱，接两通后低流速冲洗B.用10%硝酸溶液冲洗后立即用纯甲醇置换C.冲洗时压力超过流通池耐受上限D.污染严重时可拆下流通池窗片用异丙醇擦拭（答案：C，解析：压力过高会损坏流通池窗片，造成漏液）多项选择题（共5题，每题4分，合计20分，多选、少选、错选均不得分）1.以下哪些因素会导致色谱保留时间漂移？A.流动相有机相挥发，比例发生变化B.色谱柱未充分平衡C.柱温箱温度波动超过±0.5℃D.系统管路存在渗漏（答案：ABCD）2.泵压力波动超出正常范围时，可采取的处理措施有？A.开启purge阀排气5-10minB.拆下单向阀用异丙醇超声清洗15minC.更换磨损的泵密封圈D.直接更换新泵（答案：ABC，解析：仅当泵组件不可逆损坏时才需更换新泵，常规故障可通过清洗、更换配件解决）3.色谱柱堵塞后，正确的处理方式有？A.反接色谱柱，用0.1-0.3ml/min的低流速冲洗B.依次用10%甲醇、纯甲醇、异丙醇、二氯甲烷梯度冲洗C.直接用强酸、强碱溶液冲洗D.堵塞严重无法冲洗通畅时更换新色谱柱（答案：ABD，解析：强酸强碱会损坏硅胶基质和键合相，不可用来冲洗常规色谱柱）4.以下属于错误操作的有？A.水相流动相放置一周未更换，继续使用B.含盐流动相用完后直接用纯乙腈冲系统C.色谱柱使用后未密封，直接放置在仪器上半个月D.样品未经过滤直接进样（答案：ABCD，解析：以上操作均会造成系统污染、堵塞，缩短仪器使用寿命）5.液相色谱日常使用时，需每日登记的使用记录包含哪些内容？A.开机时间、使用人、检测项目B.流动相组成、色谱柱型号C.运行压力、基线情况、故障现象D.关机时间、维护操作内容（答案：ABCD）判断题（共10题，每题1分，合计10分，正确打√，错误打×）1.耐碱反相色谱柱可耐受pH=12的流动相，因此可长期在高pH条件下运行。（×，解析：即使是耐碱柱，长期高pH运行也会缩短使用寿命，需尽量减少高pH使用时长）2.氘灯不用时需频繁开关，减少点亮时间延长使用寿命。（×，解析：氘灯开关一次的损耗相当于连续使用2-3h，应尽量减少开关次数，短时间不用可不必关闭）3.超高效液相色谱的系统管路和配件可与常规高效液相通用。（×，解析：UPLC系统压力远高于常规HPLC，管路内径更细，配件耐压要求更高，不可通用）4.自动进样器洗针液需每日更换，避免长菌造成系统污染。（√）5.流动相过滤时，可将有机相和水相混合后再过滤，提高工作效率。（×，解析：混合后过滤会改变流动相比例，影响分离重复性，应分别过滤后再混合）6.系统有盐残留时，应先用高比例水相冲洗，再切换有机相，避免盐析出。（√）7.液相色谱废液可与其他实验室有机废液混合存放，统一处理。（×，解析：含氰化物、重金属、强酸强碱的液相废液需分类存放，避免发生化学反应产生有毒有害物质）8.新色谱柱使用前无需老化，可直接进样分析。（×，解析：新色谱柱需用初始流动相平衡30倍柱体积以上，保证柱床稳定，避免保留时间漂移）9.单向阀污染后可拆下用异丙醇超声清洗，无需直接更换。（√）10.压力超过系统最高压力上限时，应立即停止泵运行，排查故障后再继续使用。（√）简答题（共2题，每题5分，合计10分）1.简述反相高效液相色谱系统每日开关机的标准维护流程。2.简述液相色谱“压力异常升高”故障的排查思路及处理方法。实操案例分析题（共1题，合计10分）某医药企业质量控制实验室2025年采购的超高效液相色谱仪，日常用于化药含量检测，流动相为乙腈-20mM磷酸二氢钾溶液（30:70），色谱柱为1.7μmC18柱，柱温40℃，检测波长254nm。近期运行时出现三类异常：①空白走样时基线漂移超过1mAU/h，且出现多个不规则杂峰；②连续进6针同一份对照品溶液，峰面积RSD为8.7%，保留时间漂移0.6min，不符合药典要求；③系统运行压力较三个月前升高了0.8MPa，压力波动±0.3MPa。请结合液相维护保养知识，分析故障原因，给出完整排查处理方案，并提出后续预防措施。主观题参考答案简答题参考答案1.反相液相色谱每日开关机标准维护流程：开机流程：①开机前检查：确认废液缸余量未超过2/3，剩余空间足够容纳当日实验废液；检查流动相余量，确认无沉淀、变质、长菌现象，若为新配置流动相需分别经0.22μm滤膜过滤后混合，超声脱气10-15min；检查仪器各模块电源、管路连接是否正常。②开机排气：依次开启泵、柱温箱、检测器、自动进样器电源，开启工作站，设置purge流速为5ml/min，开启purge阀排气3-5min，排尽泵和管路内的气泡后关闭purge阀，设置流速为0.2ml/min低流速冲洗系统。③系统平衡：设置柱温到目标温度，开启检测器氘灯预热10-30min，待柱温达到设定值后逐步提升流速到工作流速，用初始流动相平衡系统，待压力波动≤±0.2MPa、基线平稳后方可进样分析。关机流程：①残留冲洗：若当日使用含盐流动相，先将流动相切换为10%甲醇水溶液，设置流速0.5-1ml/min冲洗系统30min以上，完全置换管路、进样阀、色谱柱内的含盐流动相，避免盐析出。②柱保护：切换为纯甲醇或纯乙腈，冲洗20倍柱体积以上，使色谱柱保存在纯有机相环境中。③关机操作：关闭氘灯，待柱温降到室温后将流速逐步降到0，关闭泵，退出工作站，依次关闭各模块电源，清理实验台面，登记仪器使用记录，注明运行情况、故障现象、维护内容等。2.压力异常升高的排查思路按照“从后端到前端”的顺序，避免不必要的拆装，具体如下：①第一步排查色谱柱：断开色谱柱出口，观察压力是否下降，若压力恢复正常，说明为色谱柱堵塞。处理方法：反接色谱柱，用0.1-0.3ml/min低流速的10%甲醇、纯甲醇、异丙醇依次梯度冲洗，若冲洗后压力仍无法恢复，更换新色谱柱。②第二步排查进样阀：若断开色谱柱出口压力仍高，断开色谱柱入口，观察压力，若压力恢复正常，说明为进样阀或色谱柱前的在线过滤器堵塞。处理方法：拆下在线过滤器滤芯，用异丙醇超声15min后更换，或者直接更换新滤芯；拆下进样阀转子和定子，用异丙醇擦拭清洗，去除残留样品和盐结晶。③第三步排查泵端组件：若断开色谱柱入口压力仍高，拆下泵出口的在线过滤器，清洗或更换滤芯；若压力仍高，拆下单向阀，用异丙醇超声15min，更换磨损的泵密封圈，重新安装后测试压力。处理完成后需用初始流动相平衡系统，待压力稳定后再进样，日常使用时需做好流动相、样品过滤，及时冲洗盐残留，避免堵塞。实操案例分析题参考答案（1）故障原因分析：①基线漂移、杂峰多的核心原因为系统污染，包括流动相长菌/变质、色谱柱残留样品、流通池污染、管路残留杂质；②峰面积RSD超标、保留时间漂移的原因包括系统内有气泡、泵密封圈磨损漏液、柱温不稳定、自动进样器进样针堵塞/密封垫磨损、色谱柱未充分平衡；③压力升高、波动大的原因包括色谱柱堵塞、系统内有盐析出、单向阀污染、泵密封圈磨损。（2）排查处理方案：①流动相排查：倒掉原有流动相，重新配置新鲜的乙腈和20mM磷酸二氢钾溶液，分别经0.22μm有机系和水系滤膜过滤后混合，超声脱气10min，更换后开启purge阀排气5min，走空白流动相1h，观察基线是否改善。若基线仍有杂峰，进行下一步。②色谱柱排查：断开色谱柱，接入两通，走空白流动相，若基线平稳、压力下降，说明为色谱柱污染或堵塞。处理色谱柱：先用水-乙腈（95:5）0.2ml/min低流速冲洗40min，去除盐残留，再依次用纯甲醇、甲醇-异丙醇（50:50）、纯异丙醇各冲洗20倍柱体积，最后用纯乙腈冲洗20倍柱体积，重新接回系统平衡，测试压力、基线、保留时间重复性。若接两通后基线仍有杂峰，说明为流通池污染，断开两通和流通池入口，用10%硝酸溶液0.1ml/min低流速冲洗流通池30min，再用纯水冲洗30min，纯甲醇冲洗20min，接回系统测试基线。③保留时间和峰面积异常排查：首先检查各管路接头、泵头、进样阀是否有漏液，若有漏液拧紧接头或更换密封圈；观察压力波动情况，若波动超过±0.2MPa，重新purge排气，拆下单向阀用异丙醇超声15min，更换磨损的泵密封圈；检查柱温箱温度是否稳定，若波动超过±0.5℃，联系工程师维修温控模块；检查自动进样器：更换洗针液为10%甲醇水溶液，清洗进样针，更换进样口密封垫，测试进样重复性。④压力升高排查：按照压力升高排查流程，依次排查色谱柱、进样阀、在线过滤器、单向阀，清洗或更换