（正式版）DB1303∕T 125-2001 《绵羊的胚胎移植技术规程》

2001-10-11实施2001-10-11实施本标准在泰皇岛市畜牧局归口.本标准由秦皇岛市畜牧工作站起草。I3供体羊的选择和饲养管理c)体质健壮。繁殖机能正常，无遗传和传染性疾病。年龄在2岁至7岁为宜；3.2.1保持饲养环境稳定，饲养环境卫生，干燥、棚舍温度适宜。避免应激反应。4供体羊的超数排卵及人工授精LHP剂量：根据PSH的注射剂量，肌注100—120IU.ICI80996:肌注0.08mg/次，注射两次/d.4.1.4超数排卵方法FSH—P3天注射法以母羊发情之日作为发情周期的Od,在母羊发情周期的第13d或13.5d(周期大于17.5d的羊在第13.5d)开始，每天早：(6:00—7:00)和晚(18:00—19:00)各注射1次FSH,连续3天，递减注射。FSH、LH用生理盐水稀释.2周期天数剂量时间早发情A.I发情A.I晚发情A.I发情A.I早发情A.I发情A.I晚发情A.I发情A.I注：A.I表示人工授精。在第6次注射FSH一P时即对超排供体羊观察发情。观察时间：早(6:00-7:00),晚(18:00-19:00)。观察方法：试情公羊扎好试情布，放入母羊群中试情，每30-40只供体羊需1只试情公羊，以母羊站立接受试情公羊爬跨作为发情的标准。42人工授精品种优良，谱系清楚，遗传性稳定、生产性能良好，健康无病的规定.5.1手术冲卵5.1.1所需主要器材手术台1:剃须刀·1.:创布2-3块：止血纱布若千：剪毛剪1:手术刀柄1;手术剪1;止血钳3-4:巾帕钳4:持针器1:肠钳(带乳胶管)1:手术刀片若千；缝合线：缝合针；镊子2:φ120mm表面皿若千；中180mm表面皿若干；6#-8#头皮针(尖端磨钝)若千：18#-20#头皮针(尖端磨钝〉若干；φ10mm透明硅胶管若干；10ml注射器2-3:20ml注射器2-3;酒精、碘酊、新洁尔灭、0:9%生理盐水、青霉素、链霉素、液体石蜡、肝素5.1.3冲卵液(保存液)的准备35.1.4手术冲卵技术步骤5.1.4.1制作喇叭口导卵管b)将玻璃管中段放在酒精灯上灼烧，拉长为10cm,直径约3mm-4m即可。泡数.把盛有冲卵回收液的表面皿放在立体显微镜下，仔细观察，不可遗漏，将检出的胚胎放入盛有保存液的435mm培养皿中，超排母羊发情后66h-72h用输卵管冲胚法采集2细胞、4细胞，8细胞及少数16细胞胚胎。上述发育期按国际胚胎移植协会规定的数码均表示为2.5.2.2胚胎的质量鉴定——形态学方法处于发育期2细胞的胚胎，卵裂球轮廓清楚，球体饱满，透明度适中，数目吻合即可定为1级：1/3卵裂球死亡可定为2级：1/2卵裂球死亡可定为3级：其余定为4级。1、2、3级胚胎均可用于鲜胚移植。4立体显微镜、温度计、解冻用水杯、0.25m1塑料细管、吸卵管、细管推杆、装管后2-3分钟内移入受体).6.4胚胎发育期与受体移檀时间的对应关系胚胎发育期受体移植时间(发情之日为0h)紧缩桑椹胚(M)5.5±0.5d早期囊胚(EB)5.5±0.5d扩张囊胚(EXB)6.5±0.5d8.1受体羊的同期化发情处理8.1.1同期化发情处理方法的细管。冷却后用砂片将尖端断齐，再将芯插入管内。注意：管与芯是配套的不能搞混.8.2.3.2.2胚胎的移檀部位将具有黄体一侧的输卵管伞部拨开，找到管口，把装有胚胎的移植器从此插入3cm-4cm,然后将胚胎轻轻推入输卵管即可。6液氮罐冷冻日期日期备注下午IU下午IU下午IU冷冻移植细胞胚8-细胞胚未受精卵冷冻剂：甘油7编号受体耳号品种及地点发情时间时间胚龄、质备注序号鉴定会职务工作单位所学专业现从事专业职务职称1主任委员市畜牧局调研员、畜牧师2副主任委员刘洪玉市畜牧