实验室生物安全柜

20XX/XX/XX实验室生物安全柜汇报人:XXXCONTENTS目录01

生物安全柜基础认知02

生物安全柜的设备作用03

生物安全柜的操作规范04

生物安全柜的维护要点05

常见风险场景提示06

教学实操考核要求01生物安全柜基础认知设备定义与分类生物安全柜定义生物安全柜是防护生物样本操作的负压通风设备，能保护操作人员和环境免受生物危害。一级生物安全柜可保护人员与环境，防护等级低，仅用于低风险微生物操作，不保护实验。二级生物安全柜目前应用最广，多数生物安全等级中等，可用于二级到三级病原微生物实验操作。三级生物安全柜最高防护等级，百分百完全密闭，用于高致病性病原操作，保障绝对安全防护。核心构造组成

高效HEPA过滤器它能过滤掉空气中99.99%以上0.3μm大小的颗粒物，是保障生物安全柜安全操作的核心部件。

下沉式负压风道系统该系统保证柜内空气单向流动，避免污染外溢，保护操作人员和周边环境安全。

前窗操作口升降玻璃它能调节操作开口高度，通过控制开口面积保障工作面风速稳定，满足不同操作需求。

紫外杀菌灯组它一般安装在安全柜内部顶端，用于操作前后对柜内工作区域进行紫外线杀菌消毒。02生物安全柜的设备作用避免样本交叉污染生物安全柜通过定向气流隔离不同操作区，可防止不同实验样本间发生交叉混淆污染。隔绝环境杂质干扰高效过滤系统能过滤空气中浮尘、杂菌等杂质，避免外来杂质污染正在处理的实验样本。防止环境因素致样本降解稳定可控的柜内气流环境，可减少核酸、蛋白等易降解样本受外界影响发生变质降解。保护实验样本保护操作人员与环境阻挡有害气溶胶溢出生物安全柜工作时形成定向气流屏障，可拦住感染性气溶胶，避免操作人员吸入污染物。过滤排出的污染气体其配备的HEPA过滤器能截留空气中的微生物，排出洁净气体，避免污染外界实验环境。防止样本交叉污染柜内持续定向洁净气流循环，可避免不同操作样本间的污染物扩散，降低交叉污染风险。03生物安全柜的操作规范操作前准备要求

个人防护准备进入实验室操作生物安全柜前，需穿戴好一次性实验手套、无纺布隔离衣与防护口罩。

环境物品核查提前三十分钟开启生物安全柜的通风系统，酒精擦拭柜内台面，确认过滤器运行正常。

材料提前整理将操作所需的试剂、耗材提前放入安全柜，避免操作过程中频繁进出，打乱气流平衡。操作前准备操作前需提前30分钟开启紫外线消毒，开启通风系统，调整柜内温湿度至合格范围。柜内物品放置所有放入生物安全柜的物品需提前用75%酒精擦拭表面，物品需放置在柜内前后区域，不过度拥挤。操作过程要求操作需在柜内工作区中心开展，手臂不要快速进出，避免破坏柜内的单向气流防护层。操作后收尾操作结束后需对柜内壁、物品表面消毒，关闭紫外，继续通风10分钟后再关闭设备。操作流程规范操作的禁止事项

禁止存放无关私人物品生物安全柜内不可堆放饮料、私人笔记本等无关物品，避免阻挡空气循环，增加生物污染风险。

禁止在柜内使用明火在生物安全柜操作不能使用酒精灯明火，明火会干扰气流，还可能引发易燃易爆生物试剂燃烧爆炸。

禁止操作运行中开启前窗严禁在生物安全柜运行时开启超过规定高度的前窗，会破坏防护气流，导致有害气溶胶泄漏。

禁止操作完成后不及时清场禁止操作结束后不及时对柜内灭菌消毒、不清理废弃物，会残留有害生物因子污染后续实验。不同样本操作要点液体样本操作操作时要调低工作台流速，避免液体溅出，使用后及时消毒内壁，防止残留污染。感染性气溶胶样本操作操作前开启柜体通风30分钟，全程佩戴防护装备，严禁开启前窗玻璃，避免气溶胶外泄。固体废物样本操作操作时垫放吸水防护垫，切割样本控制力度防止碎屑飞溅，废物及时密封高压灭菌处理。物品清理消毒操作结束后需将所有物品移出柜内，用75%酒精对柜内壁、操作台面进行全面擦拭消毒。设备状态复位关闭紫外灯与风机后，整理操作记录，将生物安全柜运行参数调整至日常待机预设状态。废弃物规范处理操作产生的感染性废弃物需装入高压灭菌袋密封，标注信息后单独进行高压灭菌处理。操作结束收尾要求04生物安全柜的维护要点日常清洁消毒要求

操作前后表面清洁每次实验结束后，需用75%医用酒精擦拭生物安全柜内外表面，去除残留污染物。

滤网更换后的消毒更换HEPA滤网后，要对柜体内部空间进行福尔马林熏蒸消毒，清除潜在致病微生物。

长期停用后的消毒停用超过两周重新启用前，需对内壁、操作台及排风通道全面擦拭消毒，检测合格再使用。过滤器更换规范

高效过滤器完整性检测更换每次更换后必须进行PAO气溶胶扫描检测，确认无泄漏后才能投入使用。

更换前安全防护操作更换前需开启安全柜紫外消毒30分钟，操作人员穿戴全套个人防护装备操作。

更换后使用记录更新更换完成后要及时登记更换日期、过滤器型号和编号，更新设备维护档案。下沉风速校准每半年由专业人员使用风速仪多点检测工作区下沉风速，调整参数至标准范围0.38-0.5m/s。洁净度检测校准检测时会对安全柜内操作区进行洁净度测试，确认其符合对应级别的颗粒物浓度要求。高效完整性检漏采用PAO气溶胶法检测高效过滤器的密封与滤材完整性，避免泄漏引发生物污染风险。定期性能校准检测长期存放养护要点

01柜体清洁密封长期存放前需清除柜内所有杂物，用75%医用酒精擦拭内壁，晾干后套上防尘密封罩放置。

02滤膜防潮保护长期存放需将高效HEPA滤膜接口密封，放在干燥通风环境，避免滤膜受潮滋生微生物失效。

03电源线路检查长期存放前要切断外接电源，整理包裹好电源线，放置在干燥区域避免线路受潮老化。05常见风险场景提示操作不当导致污染

操作前未开启紫外消毒实验人员提前半小时开柜通风后未开启紫外照射30分钟，易残留杂菌造成样本污染。

操作时手臂频繁出入安全柜实验过程中手臂快速频繁进出安全柜，会破坏柜内气流平衡，引入外部污染物。

操作后未彻底清场实验结束后仅清理表面垃圾，未对柜内壁、操作区消毒，易造成后续实验样本交叉污染。设备老化失效风险

密封胶条老化生物安全柜使用多年后，密封胶条会老化开裂，破坏柜内负压环境，导致有害气溶胶泄漏。

HEPA过滤器堵塞失效长期过滤有害颗粒物会造成HEPA过滤器堵塞，效率下降，使排风带菌，污染实验室环境。

紫外线灯管老化紫外线灯管使用超一千小时后辐照强度不足，无法有效灭菌，会造成柜内操作的样本交叉污染。违规放置物品风险违规存放易燃易爆生物试剂某高校实验室曾因违规将酒精放在生物安全柜内，遇电机火花引发燃烧，造成设备损坏。超量堆叠实验耗材样品部分操作人员违规在安全柜内堆积大量培养皿、样品盒，阻挡气流循环，导致防护失效。放置与生物操作无关的杂物不少实验室会将手机、背包等杂物违规放入安全柜，干扰气流，增加了生物污染扩散风险。消毒不彻底残留风险

不同操作人员交替使用时的消毒残留两位实验人员间隔使用同一安全柜，仅简单擦拭，会残留上一位使用者的致病菌，引发样本污染。

消毒药剂更换不及时带来的残留重复使用过期消毒药剂擦拭生物安全柜内壁，无法杀灭致病菌，残留风险会大幅提升。

角落缝隙处消毒遗漏的残留日常消毒仅擦拭操作台面，忽视边框缝隙、过滤器接口，残留的病原微生物会逐步扩散污染。06教学实操考核要求开机前设备检查操作要求学员依次检查过滤器密封性、电源接地、风速，确认设备状态符合操作标准才能开机。无菌操作流程执行要求在超净台内完成菌种转接操作，全程符合无菌规范，避免杂菌污染样本。使用后清洁消杀操作考核结束后按规范对台面进行酒精消杀，关闭风机及电源，清理医疗废弃物至指定区域。实操考核要点常见错误纠正