试验室猫的猫杯状病毒感染疾病的诊疗防治

试验室猫的猫杯状病毒感染疾病的诊疗防治

猫杯状病毒感染(Feiinecalicivirusinfection)又称

嵌杯病毒病或猫传染性鼻结膜炎。是由猫杯状病毒引起的猫

的一种多发性口腔和呼吸道的传染病，临床症状以口腔溃疡

和眼鼻部的病理性变化为主。感染FCV后大多数的幼猫患急

性呼吸道疾病及口腔溃疡，而成年猫则表现轻微临床症状或

无症状。此病广泛存在于全世界的猫群中。本病于1957年

由Fastier等首先报告并分离出猫杯状病毒。从此以后，从

许多国家和地区的家猫及澳大利亚的猎豹中分离出此病毒。

猫杯状病毒是一种变异度极高的单股RNA病毒。它的基

因存在于蛋白衣壳中，囊膜表面具有多变的抗原决定簇，使

得疫苗交叉保护效力变差。不同的毒株引起的临床症状不同,

主要和毒株的毒力、动物的抵抗力大小等有关。单独FCV不

引起猫严重致死性疾病，主要引起猫口腔或上呼吸道感染，

某些毒株会导致肺炎，但混合感染时往往会加重病况。因此，

此病的发病率极高，但死亡率相对较低。

病原猫杯状病毒(Feiinecalicivirus,FCV)属于杯状

病毒科(Calicivirdae)水疮性病毒属(Vesivirus)©该科

分为四个属，分别是以兔出血病病毒

(Rabbithemorrhagicdiseasevirus)为代表的Lagovirus；

以诺瓦克病毒(Norwalkvirus)为代表诺瓦克样病毒；以

Sapporovirus为代表的扎幌样病毒；以猪水泡疹病毒

(Swinevesicularexanthemvirus)为代表的Vesiviruso

猫杯状病毒只有一个血清型，但其抗原型因其抗原容易

变异便显出多相性，因此同一猫群体分离出的两个毒株也不

一定完全相符的。

病毒形态为对称的球形，无囊膜病毒，直径35〜39nm,

感染性病毒粒子衣壳共由180个VP1蛋白和1到10个左右

的VP2蛋白组成，无基因组的空病毒颗粒直径大约为23nm,

并且具有T二1的二十面体对称性，由60个VP1蛋白组成。

FCV基因组为全长7683bp的单股正链线性RNA(ssRNA),在

其5'端结合有基因组链接蛋白VPg,VPg之后是5'-UTR,随

后是三个开放阅读框(OpenReadingFrame,ORF)，分别为ORF1、

ORF2和0RF3o

FCV在氯化钝口浮密度为1.37-1.42g/cm3。对乙醛、

氯仿以及温和的洗涤剂不敏感，酸度为pH-3时不稳定，pH4〜

5时稳定,50℃30min即可灭活。l-2mol/LNaCl可以提高病

毒的耐热性，但MgCl2可加速它的灭活，2%NaOH可以有效

地灭活病毒，除此之外，FCV对干燥和紫外线也很敏感。FCV

的0RF1位于基因组RNA的5'端，起始位点是从第20位到第

5311位核甘酸，是位于5'UTR后的第一个ORF,ORF1编码

FCV的非结构蛋白，ORF1首先翻译出一个200kDa的多聚蛋

白，随后在蛋白酶爰合酶(ProteasePolymerase,PP)的作

用下能够将多聚蛋白切割成单独非结构蛋白，FCV共有7个

非结构蛋白，从左到右大小依次为5.6kDa.32kDa.38.9kDa>

30.lkDa,12,7kDa和75.7kDa,它们分别被命名为p5.6、p32、

p39(NTPas。)、p30、pl3(VPg)、p76(Pro-Pol)oFCV的

0RF2和ORF3分别编码主要结构蛋白VP1和次要结构蛋白VP2O

VP1和VP2是经一条亚基因组基因翻译得到的。0RF2编码的

衣壳蛋白前体大小约为73kDa,被PP切割成一个14kDa大小

的衣壳蛋白前导区和衣壳蛋白成熟区VP1,大量成熟的VP1

加上少量VP2能够与结合VPg的病毒基因组共同组装得到完

整的有感染性的病毒粒子。

中和试验表明，FCV的抗原是很容易变异的，即使同一

猫群分离的两个毒株也不一定完全相同，但在中和试验中，

所有FCV分离株之间广泛交叉，这种广泛的交叉反应还常见

于补体结合反应和免疫荧光试验。所以，一般认为FCV只有

1个血清型，各种不同毒株都是此单血清型的变异株，不同

毒株可用琼扩试验区别。FCV不能凝集各种动物的红细胞。

FCV与其他杯状病毒适应很多种细胞的特性有所不同，

FCV只在F81、CRFK等多种猫肾传代细胞中进行增殖培养，

且滴度较高。在猫肾细胞上出现圆缩、脱落，产生葡萄串样

的细胞病变。

流行病学FCV是最常见的能够引起猫呼吸系统疾病的病

原，临床上高度流行，血清抗体阳性率可高达90%,常感染

进行间接性传播。家养猫相对较少分离到FCV,流浪猫、野

猫、繁殖场、开放式饲养或者经常到美容院美容的猫是FCV

感染的主要对象。猫常因进食一些污染的食物或吸入带有病

毒的小水滴而感染，而这些细微的小水滴在空中可传播到

1.2米以外的范围。间接感染主要通过被分泌物污染得的猫

笼、食盆、饲料、清洁用具或者饲养人员进行传播。直接感

染主要通过急性感染的猫传染给易感染猫。

该病已呈全世界性分布。几乎所有的猫科动物都会感染,

一周岁以下的猫最容易感染。FCV在猫群中肆虐，猫群的患

病率有所差异从50%〜90%。

发病机理FCV通过口、鼻、结膜感染猫，并主要在口腔

和呼吸道系统中复制增值殖，于感染3〜4d后发生短暂的病

毒血症，与此同时也可以在其他的组织中检测出病毒存在，

该病毒会使上皮细胞坏死，在典型情况下，舌头边缘出现水

泡，之后会形成溃疡。在感染局部，真皮层会有嗜中性粒细

胞的浸润，要超过2〜3周才会消除。

急性疾病复原后的猫大多数会在30d内消除感染，但有

少部分会排放较长时间的病毒，也可能会终身带毒并持续排

毒，在这些健康的苛毒猫身上，猫杯状病毒会局限在扁桃腺

上皮细胞，即使进行扁桃腺切除手术也不可能终结带毒状况,

说明病毒可能会持续在其他部位存在。

临床症状FCV感染会引起口腔和上呼吸道症状，临床表

现取决于感染毒株毒力和猫的年龄。轻微症状包括：神经郁

闷、浆液性的眼和鼻分泌物、发烧（39.5。（2〜40.5C）流涎、

打喷嚏、郁闷、厌食。严重症状包括：呼吸困难、沉郁、肺

部会有啰音，容易引发继发性感染，从而造成肺水肿和间质

性的肺炎。也可能伴随眼、鼻的症状而出现舌头和硬腭溃疡。

4〜8周龄的猫咪最容易死亡，1岁以上猫常出现温和型或者

隐性经过。幼猫会转变成病毒性肺炎，表现出厌食、沉郁和

死亡前的呼吸困难等。被感染5周龄〜6月龄的幼猫症状：

感染FCV所产生的临床症状是很难与猫瘟区别的，死亡通常

发生在发病的几天之后，症状包括：呕吐、下痢、沉郁，还

会出现溃疡性的舌炎等。

急性口腔及上呼吸道疾病：当感染猫发生亚临床感染时,

大多数的临床病程会表现出典型的舌头溃疡和轻微的急性

呼吸道疾病症状，较为严重的症状则类似猫疱疹病毒所引起

的呼吸道症状。

慢性口炎：主要特征表现在增生性及溃疡性的牙龈炎和

咽喉炎，但目前无法通过人工试验方式引发慢性口炎，所以，

猫杯状病毒慢性口炎中所扮演的角色也无法确认。

恶性全身性猫杯状病毒疾病：主要特征就是全身性炎症

反应候群、弥漫性血管内凝血（DIC）、多器官衰竭及死亡，

其死亡率高达67%o其临床症状是有差异存在的，最初通常

呈现严重急性上呼吸道疾病。

病理变化1.口腔溃疡和上呼吸道症状：是FCV最常见的

病理变化。口腔溃疡由小囊泡开始，一般出现在舌头的边缘，

随着小囊泡破裂伴随着上皮细胞坏死，坏死边缘中性粒细胞

浸润，2〜3周后溃疡部位愈合。肺部发生病变的病例是十分

罕见，病程从局部肺炎开始，引起急性渗出性肺炎，然后发

生间质性肺炎。

2.全身性疾病：特征性的症状为皮肤水肿，主要在鼻部、

嘴唇、耳朵附近、眼睛周围等，也伴有其他坏死。肝脏、脾

脏坏死或者胰腺炎；有些猫则可能因为肺部浸润水肿而引发

呼吸道窘迫。而弥漫性血管内凝血则会造成凝血功能障碍及

血栓栓塞，临床表现主要是紫斑、鼻血、血样粪便。

诊断根据本病的流行病学、临床症状等可做出初步诊断。

FCV的临床诊断主要包括眼窝塌陷、毛杂乱、结膜、角膜炎、

口腔溃疡、呼吸困难及肺炎等。常规的FCV检测方法有病毒

分离鉴定、电镜观察、RT-PCR和qRT-PCR,基于血清学的实

验有中和试验、琼扩试验、免疫荧光和补体结合试验等。应

用较为广泛的是普通RT-PCR方法。

1.病毒的分离鉴定：可采集感染猫的口鼻拭子接种F81

细胞等，观察细胞是否发生病变。细胞变圆，聚缩成葡萄状

凋零等典型的细胞病变。分离鉴定的优点是费用低，操作简

单容易，避免了隐性的感染；但缺点是耗费实验时间长，细

胞病毒后仍然需要用PCR鉴定，一般在15d以上才可以得到

实验结果。

2.电镜镜检：甩镜负染可见FCV有很明显的杯状结构,

呈20面体对称，无囊膜。电镜检测对病料的采集时间、部

位都有很高的要求。该方法的优点是准确、直观、明了，但

缺点是耗费实验时间长、费用较高、需要定量的病毒、并且

不能够识别区分异源株、不适合用流行病学大量的检测。

3.ELISA：鉴于VP1蛋白良好的抗原性，近几年多个实

验室成功建立了很多基于VP1蛋白的检测方法。目前有间接

法、夹心ELISA方法，后者对猫群FCV的检出率高达80%。

4.中和实验：口和试验常用的有两种检测方法，一种是

固定病毒量与等量系列倍比稀释的血清混合；另一种是固定

血清用量与等量系列对数稀释的病毒混合。中和实验有相对

较好的特异性。

5.免疫荧光：抗原、抗体反应与形态学相结合，这种方

法将血清学特异性、荧光色素敏感性、显微镜检测法融为一

体扩大了免疫学诊断的效果。免疫酶染色法(IEA)和免疫

荧光发(IFA)特点是：特性强、敏感度高、速度快。但缺

点是非特异性染色问题尚未完全解决，结果判断的客观性不

够，技术程序比较的复杂等。

6.荧光定量PCR：是检测FCV的一种新方法，是通过在

普通PCR中添加荧光物质，应用积累的荧光强度实时检测全

部PCR产物的过程，并且根据标准线对未知样本进行相对定

量分析的一种方法c该方法的优点是特异性高、敏感性高、

具有高通量，但缺点是偶尔也会出现假阳性的现象。

7.巢式PCR：巢式PCR与普通PCR很相似，使用两对特

异性引物进行扩展，减少了第一轮扩增出现的错误片段，但

可以在很大程度上提高敏感性。与PCR相比，此种方法敏感

性和准确性都更高。

8.PCR：PCR技术因其敏感性高、特异性强、费用较低等

优点已经成为一种经典的检测方法了。此技术同样也可用于

猫杯状病毒的检测。

防控措施本病目前还没有特殊的治疗方法，加强预防措

施可减少感染机会。疫苗接种是预防FCV的主要方法。在猫

数量较少时，疫苗接种是特别有效的方式，但在数量多的猫

群中使用疫苗预防就需要详细的免疫程序。国外有弱毒株疫

苗和灭活疫苗，弱每疫苗都来源于自然弱毒，仅引起温和的