药物分析第10章甾体激素类药物分析

药物分析课程甾体激素类药物分析结构

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鉴别

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检查

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含量测定汇报时间：2026CONTENTS课程导览甾体激素类药物分析·学习路径01结构与分类甾体母核与药物分类框架02各类药物分析结构特征与分析方法对应03鉴别与检查鉴别方法体系与特殊杂质04含量测定测定方法体系与前沿技术结构与分类结构决定性质，性质决定方法01药物分析·甾体激素类药物甾体母核与药物分类母核骨架环戊烷并多氢菲·A、B、C、D四环全反式稠合·各碳位固定编号三种基本母核按C10、C13、C17取代情况区分雌甾烷仅C18甲基雄甾烷C18、C19两个角甲基孕甾烷雄甾烷基础上另有C20、C21乙基分类框架97《中国药典》收载品种按药理作用分肾上腺皮质激素与性激素两大类肾上腺皮质激素性激素雄激素及蛋白同化激素孕激素雌激素A环与

C17位差异决定各药物的理化性质与分析方法选择甾体激素类药物分析04/19药物分析·第10章结构特征决定分析路线甾体激素分析的本质，是对母核与官能团的系统把握。结构差异直接决定分析方法的选择。A环共轭体系多数药物C4–C5双键与C3酮基共轭，构成Δ4-3-酮，240纳米附近有紫外吸收，可与羰基试剂反应；雌激素类A环为苯环，另成体系。C17官能团分类肾上腺皮质激素：α-醇酮基，具还原性雄激素：β-羟基，可成酯孕激素：甲酮基，与亚硝基铁氰化钠呈色雌激素：羟基或乙炔基合成修饰位点C6、C9可引入卤素C16引入甲基或羟基C1–C2形成双键这些差异使衍生物制备、熔点与比旋度、紫外与红外光谱各自承担鉴别与定量职责。甾体激素类药物分析05/19各类药物分析从官能团出发，锁定分析方法02药物分析·第10章皮质激素的结构特征肾上腺皮质激素以皮质酮为母体，共

21个碳原子，结构特征集中在三个位点。AA环共轭体系Δ4-3-酮基形成共轭体系，240nm附近有紫外吸收；C6–C7引入双键时吸收红移。BC17α-醇酮基具还原性，多数药物带C17-α-羟基；部分与酸成酯，如醋酸地塞米松、醋酸曲安奈德。C卤素修饰C6或C9的α位引入卤素，可显有机卤化物反应：丙酸倍氯米松C9-Cl地塞米松C9-F醋酸氟轻松C6-F与C9-F骨架补充：C10、C13位有角甲基，C11位为羟基或酮基；C1–C2或C6–C7双键修饰进一步改变活性与光谱行为。甾体激素类药物分析07/19药物分析·第10章皮质激素的鉴别与测定C17-α-醇酮基仅存在于肾上腺皮质激素，具还原性——由结构决定鉴别与含量测定方法1鉴别反应斐林试液橙红色氧化亚铜沉淀多伦试液黑色银镜四氮唑盐有色甲臜2四氮唑比色法药典选型ChP用红四氮唑（2,3,5-三苯基氯化四氮唑）USP用蓝四氮唑测定实例：醋酸泼尼松龙乳膏485nm波长测定吸光度关键条件显色物与被测物浓度保持恒定比例有色螯合物稳定、摩尔吸收系数足够大pH、温度、时间与杂质均影响结果甾体激素类药物分析08/19甾体激素类药物的分析雄激素与蛋白同化激素1母核碳数定归属天然雄激素·睾酮19个碳C10位有角甲基蛋白同化激素18个碳C10位一般无角甲基典型药物：苯丙酸诺龙2共有官能团A环均具

Δ⁴-3-酮基，有紫外吸收，可与羰基试剂反应C17位无侧链，多为

β-羟基3结构改造与代表药羟基可被酯化（丙酸睾酮、苯丙酸诺龙）或引入

α-甲基（甲睾酮）；雄激素经改造降低雄性化作用、保留蛋白同化活性，衍生出蛋白同化激素类。甲睾酮丙酸睾酮十一酸睾酮酯键与酮基为含量测定和专属鉴别提供切入点雄激素与蛋白同化激素的结构特征与分析指向09/19药物分析·甾体激素类药物孕激素的结构与分析黄体酮天然孕激素代表药，母核含

21个碳原子结构特征1A环具

Δ4-3-酮基，C17位为甲酮基2部分药物C17有α-羟基，可与醋酸、己酸成酯：醋酸甲地孕酮、己酸羟孕酮3有些具乙炔基，如

炔诺酮专属鉴别反应灵敏且专属C17甲酮基与亚硝基铁氰化钠在碱性条件下反应，黄体酮显蓝紫色；其他常用甾体激素不显蓝紫色，或仅呈淡橙色或不显色。含量测定·HPLC固定相十八烷基硅烷键合硅胶流动相甲醇-水检测254纳米内标己烯雌酚给药与改造黄体酮口服易被迅速代谢，仅可注射给药醋酸甲地孕酮C17引入乙酰氧基后获得口服活性孕激素的结构与分析10/19药物分析·甾体激素类药物雌激素的结构与专属反应母核差异18个碳原子A环为苯环C10无角甲基关键官能团C3酚羟基可成酯或醚，如

苯甲酸雌二醇、戊酸雌二醇C17β-羟基或酮基部分成酯；部分药物含C17乙炔基，如

炔雌醇两组专属反应1酚羟基的偶合显色酚羟基+重氮苯磺酸盐→红色偶氮染料2乙炔基的沉淀反应乙炔基活泼氢+硝酸银试液→白色炔化银沉淀适用于炔雌醇、炔诺酮光谱鉴别280nm雌激素：A环苯环带酚羟基，最大吸收约280nmvs240nmΔ⁴-3-酮类的最大吸收为240nm甾体激素类药物分析11/19鉴别与检查鉴别定身份，检查控纯度03药物分析·第10章化学鉴别方法体系通用母核反应甾体母核与强酸呈色，适用硫酸、磷酸、高氯酸、盐酸分类官能团反应1C17-α-醇酮基还原性→氧化亚铜、银镜或还原四氮唑盐呈色肾上腺皮质激素专属2C3/C20酮基与异烟肼、2,4-二硝基苯肼、硫酸苯肼缩合→黄色腙（甾酮类）3甲酮基与亚硝基铁氰化钠反应→蓝紫色（孕激素专属）4酚羟基与重氮苯磺酸盐反应→红色偶氮染料雌激素5乙炔基与硝酸银反应→白色沉淀含卤素药物经有机破坏后检验卤离子，有机氟经茜素氟蓝反应呈蓝紫色甾体激素类药物分析13/19药物分析·第10章仪器鉴别方法与性状参数性状参数性状白色至微黄色结晶性粉末；除钠盐外水中几乎不溶，可溶于三氯甲烷、甲醇或乙醇熔点丙酸睾酮

118～123℃，炔诺酮

202～208℃比旋度炔诺酮丙酮溶液

-37°

至-32°光谱特征UVΔ⁴-3-酮约

240nm，雌激素苯环约

280nmIR据

C17官能团及羰基、羟基特征峰区分具体药物色谱鉴别TLC对照品比对主斑点HPLC保留时间一致为判据，多用于制剂甾体激素类药物分析14/19药物分析·第10章特殊杂质检查甾体激素多经半合成制备，原料、中间体、异构体与降解产物均可引入杂质。有关物质其他甾体是主要特殊杂质。药典以

TLC为主、HPLC为辅，采用自身稀释对照法判定。氢化可的松：杂质斑点不得多于

3个，颜色不得深于对照主斑点。游离磷酸盐磷钼酸比色法。磷酸与钼酸生成磷钼酸铵，还原为磷钼酸蓝，于

740nm

测定。适用：地塞米松磷酸钠等。残留溶剂甲醇与丙酮GC内标法；甲醇不得出峰，检测限

3.1ng；丙酮不得过

5.0%药典限度甲醇不得过

0.3%，乙醇与丙酮均不得过

0.5%含硒杂质源于二氧化硒脱氢，经氧瓶燃烧后显色测定。雌酮残留炔雌醇中借助

Zimmermann反应

检查。甾体激素类药物分析·特殊杂质检查15/19含量测定方法选择，源于结构特征04药物分析·第10章高效液相色谱法含量测定首选方法HPLC因样品用量少、准确、灵敏、分离效能好、专属性强，成为各国药典测定甾体激素含量的首选方法。色谱条件本类药物高亲脂、电中性，普遍采用反相液液分配色谱——十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，乙腈-水或甲醇-水为流动相，检测波长

240～250nm。定量方式以对照品法为主。外标法依托定量阀进样精度高而广泛使用；内标法用于部分品种校正进样波动。系统适用性实例品种流动相检测波长理论板数分离度醋酸泼尼松龙乙腈-水（35:65）246nm≥3000与醋酸氢化可的松峰>2.0醋酸可的松乙腈-水（36:64）254nm≥3500>4.0甾体激素类药物分析17/19药物分析·第10章紫外法与比色法含量测定紫外法利用

Δ4-3-酮

在

240纳米

附近的吸收直接测定单方药物，如氢化可的松片、醋酸地塞米松片。比色法分两条路径：四氮唑比色法、异烟肼比色法均需严格控制显色比例、螯合物稳定性与摩尔吸收系数1紫外法方法简便、对仪器要求低，广泛用于生产过程质控与药房快速分析2四氮唑比色法专用于皮质激素，依赖C17-α-醇酮基将四氮