实验一 鸡胚接种

1、了解鸡胚预防接种，第一，实验目的，鸡胚预防接种的优缺点。掌握鸡胚疫苗接种方法。鸡胚培养病毒的优缺点，(a)优点1，低组织分化2，选择不同年龄和接种途径3，病毒容易增殖4，病毒感染的组织和液体中有很多病毒5，容易收集和处理6，充分的来源7，设备和操作简单，(2)缺点1，可能被胚胎内部污染3、空气室呼吸和压力调节，4、绒毛膜胚胎呼吸系统的功能，氧气的交换是通过膜血管内的蛋壳孔实现的。5，尿囊胚胎的排泄器官，里面含有尿液，最初是透明液体，是简单的生理盐溶液，之后尿液中尿酸迅速增加，在胚胎发育12-13天后尿囊液开始变模糊。6、羊膜和羊膜含有羊水。胎体7，蛋黄在胚胎发育初期提供鸡胚胎营养。8、卵白在胚

2、胎发育末期提供鸡胚营养。接种途径，1，绒毛膜接种2，尿囊接种3，卵黄囊接种4，静脉接种蓝舌病病毒5，羊膜接种阳性和副粘病毒6，脑接种狂犬病病毒7，眼球接种，1，鸡胚9-11日2，病毒新城疫病毒3，病毒2.用铅笔画出画室和胚胎的位置，在要接种的部位做标记。3、消毒鸡胚。(a)卵黄囊预防方法，主要用于鹦鹉螺(chlamydia)和里克次氏(riches)的分离和增殖。方法1: 1)采集6-8天的鸡胚，利用花兰灯直观显示气室和胚胎的位置，然后使用蛋座垂直放置(头上)2)碘酊和酒精气体室侧3)锥子，用气室中央锥的小孔4)注射器抽取病毒悬浮液，沿着气室末端的小孔垂直刺3厘米，0(5)融化的石蜡包工，放入

3、孵化箱内继续孵化，每天翻转1-2次卵，24小时内死亡人员将被丢弃。(。方法2: 1)同样，3)把蛋放在旁边，把胚胎的位置往下放。在蛋的1/2点用碘酊和酒精消毒。(4)用锥子扎一个小洞，把针扎到约1.5厘米，注入病毒液0.1-0.5毫升。(5)用融化的石蜡包球继续孵化，24小时内死亡的人报废。(。(b)绒毛基底膜接种，主要用于水痘v和疱疹v的分离和增殖。方法1: 1)取10-12天的鸡胚，在毒气室末端的蛋壳上张开1 . 51 . 5厘米(3.5英寸)，用杀菌的眼科镊子拔掉小内壳的碎片。(。4)注射接种物。5)用胶带或透明胶带封闭切口。方法2:(必须用人工毒气室制作)1，在胚胎附近的毒气室中选择血

4、管较少的部位，在蛋壳上烙上直径约3-4毫米的口花圈。2、用碘酊和酒精消毒后，小心地用刀尖抬起蛋壳，做蛋窗。3、在气室末端中央钻孔。4.用针尖选择位于阿尔昌中心的凯斯膜，不要损坏其下的绒毛基底膜，将它放在刺穿生理盐水的地方。5、用橡胶乳头紧贴气室中央孔呼吸，诱发气室负压，导致阿尔昌部位绒毛下陷，形成人工气室，此时可以看到落入壳体的盐水迅速渗入。用6，1毫升注射器将2-3滴接种物注入绒毛膜。7，用透明胶带密封阿尔窗，用玻璃纸复盖阿尔窗，或用周围融化的石蜡密封，气室中央的小孔用石蜡密封。8、胚胎横躺在蛋盒里，不要翻，保持蛋仓向上。(c)尿囊预防接种主要用于流感v、新城疫v的分离增殖等量的粘着性v和副粘着性v。选择1，10-11岁的鸡胚，在毒气室附近的胚胎中，用碘酊和酒精消毒3，用锥子消毒4个小孔，沿着注射器孔注射0.1-0.2毫升接种物5，用石蜡密封，放入孵化箱内，每天翻转一次卵进行检查，24小时内死亡。5.新城疫病毒接种鸡胚后病变1，停止鸡胚生长。2、全身出血(头部、颈部、背部)。3、尿囊液体增加。4、病毒尿囊接种后36h，鸡胚胎死亡率最高107个。5、鸡胚死亡(病毒接种量大)。6、接受毒药前，将冰箱直立30分钟以上，冷冻胚胎，防止出血。根据接种途径，相应材料1，保姆