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文档简介
1、橘皮中黄酮类化合物的提取和研究,指导教师:孙伟青答词:西姜岩,绿,根据中央三碳的氧化程度、b环连接位置以及三碳链是否形成环状,对主要天然类黄酮进行分类。分别是黄酮类、类黄酮、二氢黄酮、二氢黄酮,大部分以糖原存在。生物活性,黄酮广泛分布在饲料、水果、蔬菜和药用植物中,植物是长期自我选择过程中产生的一些次代谢产物。到目前为止,植物中发现了具有近10000种独特结构的黄酮类化合物。类黄酮不仅有很多结构,而且根据种类的不同,具有不同的生物功能和活性。主要有抗氧化自由基效果,抗炎,抗过敏,抗菌,抗病毒活性,肝脏保护活性,类黄酮,维生素c在生物系统中有相互作用,雌激素作用,抗癌活性。国内研究人员停留在研究
2、现状及发展趋势、黄酮、柠檬等粗制品的研究上,大部分公司HLPC纯度的黄酮或其变体大部分是外国产品。对癌细胞抵抗力强的多甲氧基黄酮价格昂贵,国内没有纯度标准的产品。从橙皮中提取的辛弗林,橙皮苷已经在临床上用作药物;黄酮类化合物能提高饮料的味道,橙皮苷加氢产品的甜味是蔗糖的1500倍。与银杏黄酮、大豆黄酮类似的健康产品也已在国内外市场上上市。在欧美、日本、其他国家或地区,黄酮类化合物和柠檬酚在人体内清除有害自由基、杀死癌细胞的药物研究被认为是医学界最重要的领域,我国很多大学、医院和研究所的科学工作者也在尝试这项研究。研究的目的和意义,黄铜化合物具有抗癌、抗心脑血管病、抗炎镇痛药、免疫调节、降糖、骨
3、质疏松治疗、抗菌抗病毒、抗氧化、抗衰老、辐射等高药用价值的天然抗氧化剂。黄酮也广泛用于食品、化妆品、药物等领域。材料和方法;(1)测试材料和药物及仪器实验材料:橘皮药:饱和石灰水、盐酸、氢氧化钠、石油醚(30-60)、醚、乙醇、正丁醇、大孔树脂。(2)利用试验方法试验选定的浸泡时间、pH值、固液质量体积比、超声波时间四个因素,研究黄酮的溶解度。各实验组用电子秤计量5种原料粉,每种2.00克在150毫升光球玻璃瓶中。然后添加饱和石灰水,调节pH值的一定体积,一定浓度的水溶液,静态浸泡,超声波过滤一段时间。然后从4000rpm到20min,大孔树脂吸附,100ml容量的瓶子中提取上等液,取2mL萃
4、取物,通过NaNO-Al(NO)3比色法,测定波长510nm的吸光度。材料和方法,(3)黄酮含量测定方法使用rutin标准液体(0.115mg.ml)准确地将0.0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0,1.2,1.4ml放入25ml试管中,5测定了510nm处的吸光度值。使用吸光度值(a)作为坐标y,使用例程质量浓度作为横坐标x绘制标准曲线(请参见图1)。获得芦丁质量浓度x与吸光度y关系曲线的回归方程为y=8.3437x 0.0033,R=0.9932,材料和方法,测定提取物中总黄酮:脱脂柑橘皮粉2.00g,提取后容量瓶为100毫升,2毫升提取物通过测定吸光度测定。根据公式(1),计算从标
5、准曲线中提取的总黄酮的浓度,根据c=y-0.0038.3437 (2) y-单因素测试或正交测试测量的吸光度(a)公式(2),计算提取物中总黄酮的提取率。计算公式:w (%)=c 2.00 (3) w-柑橘皮中总黄酮的提取速度(%) c-标准曲线转化的总黄酮浓度(mg/ml),结果和分析,单因素实验中,每5个品质相同的橘皮粉提取2.00g然后从4000rpm中离心20min,大孔树脂吸附,100ml容量的瓶子中提取上等液,取2ml萃取物,经过NaNO-Al(NO)3色,在波长510nm处测定吸光度。结果和分析,浸泡时间对黄酮类提取物吸光度的影响,结果和分析,提取物pH值对黄酮类提取物吸光度的影
6、响,结果和分析,超声波时间对黄酮类提取物吸光度的影响,结果和分析,正交试验等正交性,在综合实验中选择了代表性的部分,这些点具有均匀均匀分布的特性。正交实验设计是实验优化的一般方法。实验优化是在优化思想的指导下进行优化设计的优化方法。从不同的优越性出发,合理设计测试计划,有效控制测试干扰,科学处理测试数据,全面优化分析,实现直接优化目标,成为现代优化技术的重要方面。本文采用三级L9 (34)四元三级正交试验确定最佳提取工艺。结果和分析、黄酮提取工艺的影响因素和水平、结果和分析、正交试验表、结果和分析、提取物pH对黄酮提取的影响最大,而固体-液体质量比、浸泡时间最少的影响是超声波处理时间。影响提取
7、的主要和次要因素是BCAD。最佳元素级别为A1B3C2D2。即,最佳提取工艺为浸泡时间8h,提取物pH12,卷45毫升,超声波处理时间15min。讨论和结论,本研究以红石灰水为溶剂,从桔皮中提取黄酮,影响浸泡时间、提取物pH值、固体-液体质量比、超声波处理时间等因素,在单因素实验中,各因素的最佳条件范围为22.5倍原料干重量提取物、pH值11.0左右的石灰水,常温侵犯9h后超声波处理15分钟。正交试验中最好的组合是浸泡时间8h,提取物pH 11.0,提取物体积45毫升,超声波处理时间15min。黄酮类化合物的提取过程对提取物的pH高额质量比浸泡时间对超声波处理时间的影响也很大。在优良组合中,黄酮的提取速度最高,为3.586%。在这个实验的设计、运行及论文撰写过程中,受到了长江大学生命科学院孙伟青老师的仔细指导。选
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