2013 种子活力测定

1、实验九 种子生活力的快速鉴定,种子生活力是指种子发芽、生长的潜在能力或种胚具有的生活能力。 了解种子有无生活力需测定种子的发芽率，但所需时间较长，且无法预知是否处在深休眠状态。 利用化学反应、生理反应与物理方法的快速鉴定法，短时间获得种子是否具有生活力的结果。 本实验学习几种种子生活力的快速鉴定方法。,实验目的,TTC法,红墨水法,荧光观察法,检测种子活力,实验1TTC（氯化三苯基四氮唑）法,实验材料 ：小麦种子 实验试剂：0.5%TTC溶液 实验用具：培养皿，单面刀片，恒温箱,实验步骤1,浸种：待测种子在280C温箱中温水（30-350C）浸种2-6小时，以增强种胚的呼吸强度，使显色迅速。

2、（已做）,胚,果毛,腹沟,小麦籽粒纵切面图（示胚的结构） A. 籽粒纵切面；B. 胚的纵切面 1. 胚；2. 胚乳；3. 果皮与种皮的愈合层；4. 糊粉层；5. 淀粉贮藏细胞；6. 盾片；7. 胚芽鞘；8. 幼叶；9. 胚芽生长点；10. 胚轴；11. 外胚叶；12. 胚根；13. 胚根鞘,实验步骤2(显色),取吸涨的小麦种子30粒，每粒沿胚的中心线纵切（使胚部一分为二），分成二份，分别放在两个培养皿中； 取其中一个培养皿（30个半粒），加入0.5%TTC溶液浸没种子，置于35温箱中30min。,实验步骤3,倒去TTC溶液，用自来水冲洗种子一次，肉眼观察胚部着色情况； 胚部呈玫瑰红色的种子是有

3、生活力的种子； 胚部呈淡红色的种子，生活力较弱，有的可发芽； 胚部未着色的种子，不能发芽。 统计结果，以百分率表示。,TTC法,注意事项,将胚一分为二； 显色时要使漂浮的种子全部浸入试剂中； 显色温度25-350C为宜； 显色结束后，要立即观察，因TTC光下久放会变色。,实验2红墨水染色法,有生活力的种子胚细胞的原生质膜具有选择透性，有选择吸收外界物质的能力，一般染料不能进入细胞内，胚部不染色； 丧失生活力的种子，胚部细胞原生质膜丧失了选择吸收能力，染料可以自由进出细胞使胚部染色； 根据胚部是否被染色来鉴定种子有无生活力。,实验原理,实验材料：小麦种子实验试剂：5红墨水实验用具：同TTC法。,

4、实验步骤 1（浸种）,浸种：同TTC法。,实验步骤 2（染色）,取另外一个培养皿中30个半粒小麦种子； 加入红墨水溶液染色10min。,实验步骤 3,10min后，倾去染色液并冲洗，至冲洗液无色为止，检查种子染色情况； 胚根、胚芽、子叶都不着色或仅胚根、胚芽尖端着色而子叶大部分不着色的是活种子；以上三部分全部或大部分着色的是死种子； 统计结果，以百分率表示。,注意事项,染料的浓度要适当，染色时间不能太长，否则不易区别被染色与否。 染色法测定种子生活力，适用于禾谷类、豆类、麻类、瓜类、十字花科、棉花、果树等植物种子。,TTC法,红墨水法,实验3荧光法（直接观察法）,植物种子中存在着许多能够在紫外

5、线照射下产生荧光的物质，如核酸、蛋白质、黄酮类、酚类、香豆素等物质； 有些种子（尤其是禾本科、松柏科、某些蔷薇科） 在衰老过程中，这些荧光物质结构和成分往往会发生变化，导致荧光丧失或荧光颜色改变； （活种子有蓝紫色荧光，死种子无荧光或荧光呈黄褐色） 具此特点的种子可用“荧光观察法”鉴定种子生活力。,实验原理,有些种子（尤其是十字花科植物） 衰老死亡时，荧光物质性质虽未改变，但由于细胞原生质透性加大，浸种后种子中的荧光物质很容易外渗； 可观察浸种后衰老死亡种子漏出“荧光团”的数量,确定种子生活力。,实验材料：小麦干种子 实验用具：单面刀片，培养皿，紫外分析仪,实验步骤,取小麦干种子15粒，用刀片沿胚的中心线将种子纵切成两半，放在培养皿中，使切面向上，放在紫外分析仪下照射并进行观察； 有生活力的种子产生明亮的蓝色、蓝紫色或蓝绿色的荧光；死种子多半是黄色、褐色以至暗淡无光，并带有斑点； 记录有生活力种子及丧失生活力种子的数量，计算百分率。,紫外分析仪,放入培养皿,观察窗口,30粒湿种子,15粒干种子,30个半粒,TTC法,红墨水法,荧光观察,30个半粒,30个半粒,30min 恒温箱,10min,切面向上,不同方法测定种子生活力结果,思考题,1、还有哪些方法、生理过程、生化原理可用来快速鉴定种子