血液样本采集和血涂片制备PPT医学课件

1、收集血液样本，准备血液涂片，1，(1)血液的组成血液由(红细胞、白细胞、血小板)和血浆组成的血浆：血液加入凝固剂后分离的浅黄色液体血清：离子后血液自然凝固的浅黄色透明液体血浆和血清的差别：血清缺乏以下特定的凝血因子：一，血液生理摘要，2，3，(2)血液理化性质血容量：成人约4-5L，体重约6-8%，血浆55%，血细胞45%颜色：红色，动脉鲜红色严重贫血患者，红色变浅一氧化碳或氰化物中毒者的血液带有樱花红色酸性：成人PH 7.37.45，动脉血PH 7.40静脉血pH 7.35秘密和渗透量：男性约1.0551.063，女性约1.0511.060相对粘度为45；血浆秘密约1.0251.030。血液

2、秘密与红细胞含量、红细胞内的血红蛋白含量有关的血浆秘密与血浆内的血红蛋白有关。血浆渗透量：约290310mOsmkgHO，4，(3)血液特性悬浮稳定性红细胞血浆中悬浮稳定性均匀悬浮状态粘性全血粘度是生理盐水的45倍。血浆粘度是生理盐水的1.6倍左右，凝固性血液可以从血管流出，自行凝固。(4)血液生理功能运输功能调节功能维持机体内环境稳定防御功能，5，2，采血方法，(1)静脉采血方法1，采血部位：肘静脉，手背静脉2。操作方法：准备试管检查注射器，进行静脉消毒，脉搏，穿刺，抽血和混合。、7，3，注意事项：(1)在采血之前，要对患者耐心地说明，以消除怀疑和恐惧心理。(2)所用的针必须锋利、光滑、柔软

3、。发现静脉后，用手感的方向穿刺(3)抽血时，只能往外拔，不能往里推，不能往里推，8，(2)皮肤采血法：1，概述：毛细血管采血，也称为微动脉、微静脉、毛细血管的混合采血部位：世界卫生组织建议采集左手无名指内侧血液，婴幼儿可以采集大脚趾或脚后跟内侧边缘血液，严重烧伤患者可以选择整个皮肤进行采血。目前可用激光无通彩止血仪采血。9，2，操作方法：准备适当的试管，放入微量稀释液连接到乳胶吸入头的微量试管，检查空气是否漏气，接受一次性微量血管按摩，按摩左手中指或无名指内侧。为了部分组织充血消毒，用75%的乙醇棉棒擦拭采血部位，干燥，10，用针扎左手，抓住采血指尖，如果血流不畅，可以用左手对采血部位远端施加

4、压力，使血液流出。11，用稀释用无菌干棉球擦拭吸管外部的血液，将吸管伸到装有稀释液的试管底部，慢慢排出试管内的血液，用清液冲洗管内剩余的血液23次，最终混合试管内的血液，12，3，3，3，3，3，3。(3)消毒后乙醇挥发后采血。否则血不好流。(4)第一滴血混合有组织液，需要擦拭。结果的准确性，13，(3)真空采穴法：真空采穴装置有套管式、头皮静脉式两种。封闭式采血避免了容器间的移动，减少了溶血现象，有效保护了血液类型成分，确保了被检查样品原始性质的完整性，比检查结果更可靠。可以有效预防医护人员和患者之间的交叉感染。各种真空采血容器根据需要用不同的颜色编码标明，适用于其他检查项目(表1-1-1)

5、。14，15，(4)方法学评价1，皮肤采血法：缺陷对溶血、凝血、混合组织液、局部皮肤擦、刺深等影响检查结果。结果重复性差异，准确性下降2，静脉采血法：开放式采血法，操作过程多，难以规范，容易造成血液污染。封闭型采血法，操作规范，有利于样品运输和保存，预防院内血源性传染病。16，(5)质量控制1，患者活动状态、精神状态、药物等可能影响检查结果2，采血止血带结扎1min 3，溶血容器不洁净，剧烈振动，操作不当，溶血对血细胞数、血浆、血清化学成分变化等多种指标检查结果的变更，110抗凝剂：通过物理或化学方法去除或抑制血液中特定凝血因子的活性，防止血液凝固。抗凝剂或抗凝剂：能阻止血液凝固的物质常用的抗

6、凝剂包括：19，1，乙二胺四乙酸(EDTA)盐钠盐(EDTANaHO)钾盐(EDTAKHO)可以与血液中的钙离子结合，形成钙离子，有效抗凝剂浓度为12mg/ml血液。血细胞分析仪使用EDTA-K2作为抗凝剂，EDTA- K22H2O 1.52.2mg/ml血，20，2，草酸盐根离子形成样品的钙离子和草酸钙沉积，使钙离子失去作用，阻止血液凝固。草酸盐：溶解度好、便宜，但对凝血因子的保护作用不好，影响凝血酶时间测定，因此草酸盐不适用于凝血检查。21，3，草酸盐双醋酸酯：在不影响红细胞形态和体积的情况下，血细胞容量、红细胞计数、网状红细胞计数血小板聚集，影响白细胞形态，血小板计数、白细胞分类计数、2

7、2，4，肝素强化抗凝血酶(AT)停用肝素，抗凝血能力强，不影响红细胞体积，溶血不容易可以投射白细胞集合书，染色后形成蓝色背景，CBC，细胞形态检查，23，5，柠檬酸盐中经常有柠檬酸钠，与血液中的钙离子结合，形成螯合物，防止血液凝固。适用范围：穴位针刺、凝血相、血小板功能检查及血液管理液。凝固： 109mmol/L水溶液，对血液的比率1:9；血针： 106mmol/L水溶液，血雨1:4。24，4，准备血液涂片，(1)清洁幻灯片1。新幻灯片1mol/L HCl泡沫24小时水洗干燥。2.在旧材料幻灯片肥皂水或其他合成洗衣粉水中煮20分钟的热水冲洗和干燥自来水。(95%乙醇泡沫1小时蒸馏水洗干燥后等待

8、)。25，(b)血液涂片准备，方法1。采集血滴。2.飘散血滴。3.推。4.干燥，26，1，手动贴合法：取一滴血，将边缘平滑地推在幻灯片一端(小麦两端平坦光滑，滑动稍窄，或需要磨两角)，放在血滴前面，逐渐向后接触李东海血滴，血液立即被挤出擀面。27，1，手动推挤方法：保持推力和托架成30-45度角，向滑动另一侧轻轻向前推挤，残片上留下薄薄的血块。28，1，手动推挤方法：细胞膜的影响因素1。血滴大小，2。推拉和滑动之间的角度，3 .与推力的速度有关。血滴越大，角度越大，推得越快，细胞膜就越厚。相反，细胞膜越薄。，29，2，厚血膜涂布法中央止血1滴经检查，利用推角，在内向旋转染色中，干燥厚度均匀，直

9、径约1.5厘米的圆形血膜，加蒸馏水，溶解红细胞，等待干燥镜。30、好的血道板的要求，适合于头体尾部，细胞分布均匀，还留有一些空隙。、甲醇的作用：亚甲蓝和李红固定细胞形态，32，1，染色原理，利用李红系不易解开的弱酸性染料，通常是李红钠盐，因为其有色部分是李红，负离子，所以李红是酸性染料。33，1，染色原理，原理也称为亚甲蓝，四甲基黄非离子染料，双醌型和含磷型两种结构，一般是氯盐，氯化亚甲蓝(-)。它的有色部分是微蓝色的，是阳离子的，所以是一种碱性染料。34，1，染色原理，原理细胞着色既有化学亲和作用，又有物理吸附作用。细胞中的嗜酸细胞物质(如血红蛋白、嗜酸细胞粒子)容易与酸性染料李红结合，染成

10、粉红色。细胞中的碱性物质(如核染色质、碱性颗粒)与碱性染料微蓝或天青结合，容易染成蓝色。中性粒子以等电态与李红和梅蓝结合，可以染成淡紫红色。35，2，PH对细胞染色的影响1。在酸性环境中，染色是红色的。在碱性环境下，染色是蓝色的。染色时应用pH6.46.8的缓冲液，保持一定的酸碱环境。36，3，试剂放置(1)液：瑞士染料1.0g，纯甲醇(AR级以上)600毫升，甘油15毫升。染料放在干净干燥的奶钵里，加入少量甲醇慢慢研究，加入充分溶解的染料，倒入干净的棕色瓶子里，在油槽里加入一些甲醇，进行精细研究，多次研磨，直到染料全部溶解，甲醇耗尽，然后放入15毫升甘油密封保存。37，试剂安排(2)晚上：磷

11、酸缓冲液(PH 6.46.8)磷酸二氢钾(KHPO)0.3g，磷酸氢钠(NaHPO)0.2g，蒸馏水1000lm调配后，用磷酸盐溶液校准PH，并拧紧瓶口，38，4，染色法采血在幻灯片一端1厘米处放一滴血。左手拿着幻灯片，右手推，形成舌头形状，头部，身体，尾部明显的血液涂层。干燥可以在空气中摇晃，使其快速干燥，天气冷或潮湿时，可以在37温度箱内保温干燥。标记在幻灯片的一端做标记。39，4，染色将血迹平放在染色机上，加入35滴栗子，快速复盖血迹，约0.51毫米后，在水滴上加入等量或稍多的栗子，吹进吸入口，充分混合染料。洗510min后用流动的水冲洗染液，等待干警检查。40，5，注意事项(1)血液涂

12、片干燥后固定。否则细胞在染色过程中很容易脱落。(2)添加染料要适量，太少则蒸发形成沉淀，使细胞难以检查。(3)先倒染料渡边杏。要防止染料在血图板上沉着。洗涤时间太长，不能防止脱色。(4)染色太浅可再染色，复盐时应先放缓冲液，再放染液。41，(b)吉姆氏染色法1，染色原理吉姆氏染色液由陈诚李红组成。染色原理和结果与徐氏染色基本相同，42，2，试剂配制吉丝染料1.0g，甘油66ml，甲醇66ml。将染料倒入包含66ml甘油的锥形烧瓶，在56水浴锅中加热90120min，充分溶解染料和甘油，然后加入60预热甲醇，充分摇晃后的棕色瓶子，在室温下过滤7天后使用。43，3，染色法采血在幻灯片一端1厘米处放一滴血。左手拿着幻灯片，右手推，形成舌头形状，头部，身体，尾部明显的血液涂层。干燥可以在空气中摇晃，使其快速干燥，天气冷或潮湿时，可以在37温度箱内保温干燥。标记在幻灯片的一端做标记。44，3，染色方法固定用甲醇固定干血涂片3，5min。染色用磷化缓冲液(PH 6.4 6.8)稀释10 20倍的吉姆萨染料，浸泡10 30min。冲洗后取出，用流动的水冲洗，等待干警检查。45，6，方法评价，(1)血液涂片准备手动推法，减少血液量，简单操作，是应用最广泛的方法。黄层涂层法可以提高异常情况的阳性检出