临床病原体检查.ppt

1、临床常见病原体检查，压电石英检查医学院温压电石英附一压电石英实验诊断中心，临床常见病原体检查2009，主要是第一节标本采集运输，实验室评价和检查方法第二节病原体药剂耐受力检查第三节临床感染常见病原体检查第五节性传染病病原体检查第六节医院感染常见病原体检查，临床常见抗生素发现和免疫策略实施以来，严重危害人体健康的病原体大多已消灭或基本消灭了新传染疾病，曾灭绝的部分旧传染疾病复活。 条件致病菌的感染比例增加。 不断出现多药耐药性菌株，真菌感染的概率逐年增高。 -临床病原体检查的重要性、临床常见病原体检查2009、临床病原体检查的目的：为确定感染的发生和性质及早明确诊断提供治疗方案防止感染传播采取预

2、防措施。 临床病原体实验诊断方法遵循的原则：正确规范的标本预处理一般可以用几个实验室的手，首先进行初步诊断根据初步诊断进行化学基确诊，参与治疗。 临床常见的病原体检查2009、第一节标本的采集和运输、实验室评价和检查方法、临床常见的病原体检查2009、标本的正确采集和运输是实验室取得正确结果的前提和基本因素。 但由于标本采集的方法和时间、标本来源、实验室往往不能直接特罗尔，临床医师和护士对此应予以重视。 临床常见的病原体检查2009，病原检查标本的采集和送检的基本原则：标本的采集应选择标本的种类和采集部位，考虑有效的病程反应。 尽量在使用抗生素前采集标本。 采集标本，必须严格执行无菌操作，防止

3、污染。 标本采集后，尽快送到实验室，床边接种提高致病菌检出率。 放标本的容器必须灭菌处理，但使用使不得消毒剂。 处理后的标本及容器根据生物安全要求进行消毒处理。 临床常见的病原体检查2009，一、常见的检查标本的采集和运送检查方法： (一)血液和骨髓适应证：疑菌血症、败血症或脓毒血症的患者。 1 .通常采血部位为肘中静脉，感染灶附近的血管采血，可以提高阳性率。 避免用静脉滴注抗微生物剂采集血液标本。 标本采集过程必须严格无菌操作。 2、选择体温上升或峰值时间采血可提高阳性率。 临床常见病原体检查2009,3、3、3，采血1次量为5-10(10-20)ml，乳婴儿子1-5ml，培养基与血液之比为

4、10:1为宜。 稀释血液中的抗生素、抗体等杀菌物质。 4、各例至少采血2次，间隔时间由病情决定，有利于提高阳性率和区分感染菌和皮肤污染菌。 临床常见病原体检查2009，1，1，中段尿采集：是临床最常用的方法。 取样前要用肥皂水和清水冲洗尿道口，抛弃排出的尿液前段，把中段或后段附近的尿液留在无菌容器中。 (二)尿液、临床常见病原体检查2009，2，2，尿导管采集：虽然可以减少污染，但容易引起逆行感染，必要时，应避免该方法。 对于留置导尿管者，用碘酒消毒尿道口的导尿管壁，用无菌注射器斜穿管壁吸引尿，或消毒后取下接口，丢弃导尿管前段尿，留下没有污染的膀胱内尿进行检查。 从集尿袋下端的管口将标本残留使

5、不得。 临床常见病原体检查2009,3、3、3，膀胱穿刺取尿液：患者耻骨上皮肤消毒后，用无菌注射器进行膀胱穿刺。 该方法主要用于尿液厌氧菌培养和中段尿采集困难的婴儿子。 临床常见的病原体检测2009，(三)将粪便、1、去脓血黏液部分的新鲜粪便装入约2-3克洗涤容器检测，也可以用雨刮器去粪便装入运输培养基检测，提高致病菌检出率.2 .粪便不易获取者，如乳婴儿子可使用直肠拭子进行检查。 临床常见病原体检查2009，(四)痰液最常见的呼吸道标本，1、自然咳痰：清水反复漱口后用力咳嗽，从呼吸道深部咳出新鲜痰液后在无菌容器内检查。 痰量极少者可以用4510%氯化纳金属钍液雾化吸入导痰，一般早晨最初的痰较

6、好。 2 .气管镜下采集法、气管穿刺法：可以减少污染，但患者有一定的痛苦，难以接受和普及。 (满足要求的痰标本低倍率视野下扁平上皮细胞球10个，白细胞25个)，临床常见的病原体检查2009，3，3 .痰标本采集后应立即进行检查和处理，最好在1小时以下，室温下延长数小时，定植于口咽部的非致病菌呈过度增长，检出率明显降低。 此外，上呼吸道中还存在正常菌群，在标本采集和结果分析时应予以考虑。 临床常见病原体为2009，(5)检查脑脊液等无菌体液，1 .在严格的无菌条件下采集标本。 2 .尽可能多地采集标本进行检查。 3 .尽快检查或接种床边可提高阳性率，特殊标本需要保温检查。 临床常见病原体检查20

7、09、(6)创伤、组织和脓肿标本：1、无菌生理盐溶液清洗病灶表面后，用无菌雨刮器去除病灶深部脓液和分泌物。 2 .对未溃烂的脓肿直接用碘酒、酒精消毒皮肤后，用无菌注射器抽出脓液进行检查，排脓时也可在无菌雨刮器下采样。 临床常见的病原体检查2009，二、标本的素质测评标准：标本及送检单应写明被检者姓名、性别、年龄、临床诊断、标本来源及检查目的、抗生素使用情况等，不接受患者信息及标识牌。 标本必须立即送检，逾期标本不予接收。 送检容器必须完整，容器破损或标本泄漏时不予受理。 标本保存、运输方式不当的，不予接受。 不接受明显污染了的标本。 标本量明显不足的标本为不予受理。 在血培养以外的当天反复申请

8、检查的标本被不予受理。 临床常见的病原体检查2009，3 .临床病原体检查方法，其主要手段是：1.直接显微镜检查：是重要的基本方法，常作为初步诊断，阳性率相对较低。 2 .专一性抗原检测：可作为早期快速诊断，但专一性至关重要。 例如免疫荧光技术、酶催化剂免疫技术、化学发光技术、乳胶凝集技术等。 3、核检：近年来发展迅速，敏感性和专一性好。 例如，PCR、分子杂交、DNA序列等。 4、致病菌的分离培养和鉴定：虽然是确诊的重要步骤，但往往需要时间。 5 .血清学检查：通过检查相应的专一性抗体辅助诊断。 例如肥达氏试验、结账台军团菌抗体检测等。 应进行2份血清检查，2次抗体效价相差4倍以上有意义。临

9、床常见病原体检测2009，第二节病原体药物耐受力检测2009，临床常见病原体检测2009，抗微生物剂药物治疗现状及存在问题，使用增加，疗效低下引起难以治疗的感染，使细菌药物耐受力恶化，引起菌群失调，双重感染滥用，污染引起危害，一方面，药物耐受力和发生机制、 临床常见病原体检查2009 1 .重点监测耐药菌株(1)甲氧苄啶耐受力葡萄球菌(MRS )和万古霉素易感性降低葡萄球菌(VIS) (2)对高水平氨基糖苷类药物肠球菌(HALR) (3)对万古霉素耐性肠球菌(VRE )、葡萄球菌(5) 产生超广谱内酰胺酶(extendedspectrumbetalactamasesesbls )的肺炎克雷伯菌

10、和大肠菌群(6)持续高产染色体型内酰胺酶(AmpC )阴沟肠杆菌， 瓦斯气体发生剂肠杆菌细菌水平与垂直传播抗性基因的整合子系统是产生灭活抗生素的水解作用酶催化剂和钝化酶催化剂细菌抗生素作用靶点的变化细菌膜外排泵系统细菌生物膜的形成，2 .产生抗药性的主要机制，临床常见的病原体检查2009，(1)手动试验1 .纸片扩散法(s )， 分子试验分子试验分子试验分子试验分子试验分子试验分子试验分子试验分子试验分子试验分子试验分子试验分子试验， 直接检测临床常见病原体检查2009，K-B法，临床常见病原体检查2009，临床常见病原体检查2009，e试验，临床常见病原体检查2009，(二)药敏试验结果解释

11、，最小抗菌浓度(MIC ) :抑制细菌生长的临床常见病原体检测2009，敏感(s ) :检测菌在常规接触剂量用药后可被体内达到的血药浓度抑制或杀菌，即该菌感染可通过推荐接触剂量(常规接触剂量)的该抗微生物剂治疗。 其体外最低抑菌浓度(MIC )在临床上应低于该抗微生物剂的正常用量。 銅綠假單胞菌药物易感性实验结果显示，s、s、临床常见病原体检查2009、中度易感性(I ) :测定菌在大量投用测定药物后可被到达体内的血药浓度抑制，或在测定药物浓集部位的体液中抑制。 该细菌对这种抗微生物剂的反应性通常低于敏感菌，而中度敏感药即使高于大姨妈浓集部位或常规接触剂量，也有临床治疗效果。 銅綠假單胞菌药物

12、易感性实验结果表明：，临床常见病原体检测2009，药物耐受力(r ) :检测菌不受体内感染部位可达抗微生物剂浓度的抑制，感染菌对该抗微生物剂的治疗不反应，增加接触剂量或药物富集部位也不反应。 銅綠假單胞菌药物易感性实验结果显示： r，临床常见病原体检测2009，对所有内酰胺类及与酶催化剂阻化剂复方制剂耐受力及氨基糖苷类、大环内脂质、克林霉素和抗四环素等抗生素的耐药性。 治疗的优先药物是万古霉素。FOX，甲氧苄啶耐受力葡萄球菌(methecillinresistancestaphylococcus，MRS )的筛选试验，(3) .重点耐药菌株的监测试验，注：OX为苯并三氮唑。 FOX为头孢替胺，

13、临床常见的病原体检测为2009，CTX/CA比CTX抗菌圈或CAZ/CA比CAX 5mm为阳性2 .如果ESBLs为阳性，对青霉素类、所有头孢菌素类及单环类抗生素的耐受力为3 .主要是大肠菌群和克雷伯菌属等肠杆菌科细菌CAZ/CA为头孢他啶/阿米酸，产生超广谱内酰胺酶(extend spectum -lactamase，ESBL )的两张纸片实证试验，临床常见病原体检查2009，第三节临床感染常见病原体检查，临床常见细菌感染1 .细菌或其抗原检测：直接涂片镜检测、培养、抗原检测和分析2 .检测抗体3 .细菌遗传物质检测，临床常见病原体检测2009，二.细小病毒感染：1.显微镜形态学检测：光镜检

14、测特征性细小病毒包涵体，电镜检测病毒粒子。 2、分离培养：生细胞球培养临床不常用。 3 .血清学检查：临床常用，如HIV检查等。 4、核酸单孢杂交和PCR方法：近年来发展迅速。 临床常见的病原体检查2009，三.真菌感染：1.形态学检查：重要手段。 2 .分离培养、鉴定。 3 .抗原检查及血清学诊断：不常用。 4 .寄生虫感染：1.涂膜检查：在粪便中寻找网络蠕虫卵，外周血中寻找疟原虫等，是最确切的诊断方法。 2 .免疫学方法：广泛应用。 3.DNA探针及PCR技术：近年来发展迅速。 临床常见病原体检查2009，5 .其他病原体感染检查：1.支原体检查：直接显微镜检查无临床意义，分离培养是确诊的

15、依据。 2 .螺旋体检查：暗视野显微镜检查钩端螺旋体是可培养的血清学诊断最主要的方法。 衣原体检查：直接显微镜检查是有参考价值的免疫学方法以检测抗原或抗体为主要方法。 4 .立克次体检查：直接检测(免疫荧光、PCR等)动物接种血清学诊断试验(外斐试验等)。 临床常见病原体检查2009、第五节性传播疾病病原体检查、临床常见病原体检查2009、性传播疾病(STD )是以性行为为主的一种传染病，通称性病。 临床常见病原体检测2009、HIV感染检测筛选试验： ELISA法确诊HIV抗体试验：蛋白印迹试验RT-PCR筛选HIV-RNA梅毒螺旋体感染试验： RPR快速血浆反应素试验确诊试验： TPHA梅

16、毒螺旋体凝血试验临床实验室常见的诊断方法：临床常见的2.PCR方法：采用早期、快速、敏感的方法，不能区分活菌还是死菌。 3、分离培养和鉴定：专一性高，诊断“金标准”，可药敏试验云同步。 临床常见病原体检查2009，非淋菌性尿道炎实验室检查： 1、衣原体检查：常用专一性抗原检查、培养等。 2、支原体检查：相关病原体主要为乌土卫五等离子体和人型支原体，可培养。 临床常见病原体检查2009，第六节医院感染常见病原体检查2009，临床常见病原体检查2009，医院感染是指患者住院时既无存在也无潜伏期，医院内发生的感染，包括在医院内获得并出院后发病的感染。 医院里发生的传染病。 今天医院的一个非常重要的问题。 临床常见的病原体检查2009、传染源和病原体：传染源主要来自住院患者、医疗从业者、造访者及医院环境、医疗器械、血液制品的污染等。 最常见的病原体是细菌，多以革兰氏阴性杆菌为主。 易感性高的人：常见于免疫力低下状态的住院患者。常见临床类型：下呼吸道感染是最常见的医院感染类型，此外，也常见泌尿道感染、手术切口感染、胃肠感染、血液感染、皮肤和软组织感染等。