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文档简介

1、基因组DNA的提取和鉴定，细胞球2ml epp，0.1g，搅拌。 2，700 l缓冲器，65，10 m，中间混炼一次3，苯酚350l，三氯甲烷350l，混炼5m，12000rpm，5m 4，从上清500l中取出1.5ml epp，500l (即12000rpm，2m，(取出DNA，毛细管) 6， 每次在10m 7、自然冷干(15m )、30l TE (或ddH2O )条件下做好溶解标记，提出8 .学习琼脂糖凝胶电泳鉴定、蛋白质浓度测定方法比较、一、实验目的、三种蛋白质浓度测定方法，比较优缺点。 二、实验原理和程序、OH磷钼酸、磷钨酸、Pr CuSO4 Pr-Cu配合物(紫红色)蓝色化合物、蛋白

2、质测定范围： 25250g/mL标准蛋白质BSA 250g/mL测定波长： 660nm，1测定步骤：标准蛋白BSA 250g/mL (1)在试管中进行试剂依次加入A660Pr图，求出测定对象蛋白浓度，原理：蛋白质分子中的Tyr、Try、Phe的苯环含有共轭双键。 测定范围：0.11mg/mLpr测定波长： 280nm标准蛋白BSA: 1mg/mL测定工序： (1)在各试管中依次加入各种试剂： (以A280nm-Pr为标准曲线求出测定对象蛋白浓度，实验原理： PrCBBG-250-Pr复合体A595标准鸡蛋清BSA: 250g/mL 、蔗糖酶km值的测定，一、实验目的：掌握蔗糖酶km测定的实验方

3、法。 二、实验原理：蔗糖酶是一种水解作用酶催化剂，催化反应：蔗糖酶水G F每水解作用1molS生成2mol还原糖，用比色皿测量还原糖量，可了解基质的水解速率。 还原糖还原3，5 -二硝基水杨酸类(DNS )生成红褐色的氨基化合物，即3 -氨基-5-硝基水杨酸类。 三、实验步骤，每管正酶液0.5 ml (氟里昂用枪加) 37正确作用5 min加NaOH 0.5 ml (氟里昂用枪加)每管加0.5 ml (氟里昂用枪加)加DNS 0.5ml (氟里昂用枪加)沸水浴3min蒸发制冷加dns 2.代谢研究五、注意事项： 1、底物浓度应选择在Km值附近2 .为了保证反应初始速度，反应时间应尽可能缩短3、酶活力过高时要不得，否则难以控制特罗尔4 .采样应独自操作，保证各管的间隔一致、DNS-aa的聚酰胺粉薄膜色谱分析法，一、实验原理：荧光试剂二甲基氨基萘磺胺(DNS-Cl )可与氨基酸的n末端结合生成荧光物质DNS-aa， DNS-Cl也可以与多肽和蛋白质的游离氨基化学基结合生成DNS-Pr，二、实验步骤： 1、一张聚酰胺薄膜(每人一张)、上铅笔标记2、上样品、毛皮拉力赛上样品直径2mm、多次上样品3、展层4、检查、 错开实验，为了避免机器和试剂的使用混乱，分光光度

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