01-2012级硕士高级免疫学实验技术-概述.ppt

1、高级免疫学实验室技术2012级硕士研究生，吉林大学白区恩医科大学免疫学与元弘研，教材选择，免疫学实验课要求，迟到、早退或缺席渡边杏。不允许擅自改变教室。穿白大衣。节约实验器材(使用后用水冲洗后放入指定场所)，破损者按价格赔偿。下课后努力打扫教室。请关闭手机或设置为振动状态。实验组、实验操作内容分配、淋巴细胞转换实验酶联合免疫吸附实验(ELISA)免疫印迹实验(Western blot)对吞噬细胞吞噬功能的测定、自设分配、自设评分标准、审查方法、审查要求、自设自评(20(星期五下午)出席情况(10分钟)，每4小时1分钟。实验设计(30分)，应用免疫学相关实验方法，设计与自己专业相关的课题。(如果

2、在12.29之前提交的话，本周五提交的话)请谈谈你对这次免疫学实验教学的看法。包括：内容布置、备课情况、讲课情况等优缺点、意见和建议。最后一节课用党。)，应用实验设计，免疫学相关实验方法，设计和自己的专业课题。(: 1)专题2)研究内容3)研究方案4)创新点、实验设计原则、研究标题：确定研究标题是研究工作的首要任务。研究摘要：研究背景、要展开的主要研究(用什么方法开展研究)、研究的意义(对此次研究的预期成果以及促进科学进步的作用)。研究内容：描述主要的执行任务。研究方案：用什么方法解决研究内容中提到的相关工作？研究的特点和创新：主要科学贡献。标题：XX细胞因子对肺癌细胞凋亡的作用及其机制研究综

3、述：肺癌是最常见的肿瘤之一。XX与多种肿瘤的发生有关，但在肺癌中的作用仍然缺乏报道。本研究利用人肺癌细胞利用流式细胞术分析了XX柔道肺癌细胞凋亡的作用，分析了Caspase3，8，12等，确定了XX柔道肿瘤细胞凋亡的机制。本研究不仅可以进一步揭示XX抗肿瘤作用机制，还为寻找新的肺癌治疗方法提供了研究基础。实验设计的基本思路，研究内容：1)XX通过对人类肺癌肿瘤细胞的表达分析，确认XX表达与肺部肿瘤的关系。2)检查患者血清XX水平，确定辅助诊断肺癌的价值研究方案。1)使用肿瘤组织切片，通过免疫细胞化学染色观察XX在人类肺癌组织中的表达方式。ELISA法检测血清XX水平。研究的特点和创新：本研究说

4、明了XX与肺癌的关系，并提出XX作为肺癌血清学诊断标志物，诱导XX对肺癌细胞凋亡，并说明其作用机制。实验设计的基本思路，免疫学实验室技术概述，小调查-对免疫学实验技术的理解，现在知道的免疫学实验技术是什么？这种免疫学实验技术的原理是什么？牙齿技术有什么应用？免疫学实验室技术概述，免疫学技术的类别，1，具有免疫活性物质的定性，定量测定2，免疫系统的组成成分数，状态测定，免疫学检测技术评价，第一，评价标准Specificity(特异性)Sensitivity(敏感性)sims，抗体的应用，多克隆抗体通过免疫动物血清分离获得优势。准备方法比较简单，价格便宜，准备所需时间短等，在决定新基因编码蛋白研究

5、方面仍然是首选的抗体类型。但是，多克隆抗体包含对多个抗原表位的抗体成分，并且可能包含抗原变性后暴露的新表位，因此，使用Western Blot检测蛋白质时，多克隆抗体比单克隆抗体更敏感。多克隆抗体，缺点：纯度差异容易发生的交叉反应源限制所产生的抗体，随着动物的个体差异滴，不容易标准化。免疫动物血清中含有非常复杂的多种蛋白质成分，因此在进行实验室分析、检查之前，必须分离、纯化有效的抗体成分。多克隆抗体，单克隆抗体(mAb)通过B细胞杂交与多克隆抗体相比，单克隆抗体主要具有以下三个茄子重要特征(优点):高度均匀性高的特异性来源不稳定。准备方法复杂，价格昂贵，准备需要很长时间。单个克隆抗体，mAb在

6、始于B淋巴细胞的单个克隆细胞系中分泌，因此每个抗体分子的结构(包括氨基酸排列顺序和空间配置)都是相同的同质抗体。高度均匀，mAb只唯一识别抗原分子的单个抗原部位，因此容易获得李晟抗体，交叉反应较少。获得高特异性、大量生产、稳定分泌mAb的杂交瘤细胞株后，可以在中长期保存液氮，必要时消除复苏，从体外培养中收获mAb，或将杂交瘤细胞接种到同一系小鼠腹腔，然后从肿瘤小鼠的腹水中收获大量mAb。来源稳定，根据实验的目的，分离，纯化的纯度要求也不同。ELISA检查时抗体，部分纯化饱和硫胺即可。最常用的抗体是通过A蛋白(Protein A)亲和层获得的IgG型抗体。免疫辐射测量的标记抗体必须达到2级纯(亲和层析纯SDS聚丙烯凝胶电泳游泳纯)，才能应用。纯度要求，单克隆抗体在准备过程中被严格筛选，因此必须根据不同的应用目的选择不同的单克隆抗体子类，如为ELISA检查标记的单克隆抗体。可能不适用于Western Blot检查。作为新手，特别要注意各种单克隆抗体所标记的应用范围，多克隆抗体一般有更广的应用