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文档简介
1、艾滋病实验室检测培训,2018年7月10日,艾滋病基础知识-定义艾滋病:一种由人类免疫缺陷病毒(艾滋病毒)引起的严重传染病,其特征是辅助性T淋巴细胞(CD4 T淋巴细胞)数量减少,导致免疫功能下降。艾滋病病毒起源于20世纪40年代和50年代的非洲,可能是由猴子身上的猿猴免疫缺陷病毒进化而来。-这种流行病最初是在美国发现的,欧洲和非洲在20世纪80年代中后期蔓延到亚洲。-感染的自然发展过程以窗口期的艾滋病毒感染和艾滋病抗体检测为特征:窗口期的轻微短暂性感冒症状不能检测到抗体感染(HIV-1),2-3周内可在血液、精液、阴道分泌物和其他体液中检测到P24抗原感染者。含有大量艾滋病病毒、无症状潜伏期
2、为8-10年:艾滋病病毒抗体临床症状出现后平均潜伏期为10年,而艾滋病患者在临床症状出现后一年内发展至死亡。在无抗病毒治疗的情况下,患者在半年至两年内死于艾滋病病毒抗体(-)、艾滋病病毒抗体(-)。无症状的艾滋病毒抗体是有症状的。艾滋病毒感染者在4-8周、810年、1年和0.52年后的自然发展过程。艾滋病检测是预防和控制艾滋病的重要保障措施。明确艾滋病病毒感染者早期医疗干预(诊断)的适宜治疗指标和效果评价。疫苗效果评价发现,艾滋病病毒阴性者应咨询以降低风险(不安全性行为和吸毒者),开展VCT基础流行病学监测和公共卫生规划(政策制定、保险、控制等)的专项研究。)职业防护,以及满足必要条件的保证措
3、施。执行有关艾滋病检测的法律法规(实验室网络、人员、仪器设备、房屋等)。),有效的检测方法和常规质量控制以及检测试剂的质量保证,以及艾滋病检测管理文件,1990年。国家艾滋病检测管理标准(试行)1997.9。国家艾滋病检测工作标准2004.8。国家艾滋病检测技术标准(试行)-标准2003。国家艾滋病检测管理办法-办法2004.12国家艾滋病检测技术标准(官方版)2009国家艾滋病检测标准),艾滋病病毒感染的实验诊断,检测方法艾滋病病毒培养,核酸检测,P24抗原检测,血清抗体检测金标准血清抗体检测,艾滋病病毒抗体检测平均在感染后25天,12周后,几乎全部检测到艾滋病病毒抗体,包括两个阶段(筛查和
4、确认),三个程序(初筛和复检确认),23个样品(血清、全血、唾液、尿液、滤纸干血),艾滋病病毒筛查试剂的要求和种类-在使用有效期内,采供血机构必须使用HIV-1/2、酶联免疫吸附试验(EIA)、颗粒凝集试剂(PA)、其他快速试剂(RT)和预防措施进行检测。艾滋病病毒抗体检测应符合国家艾滋病检测技术规范。在一个合格的艾滋病检测实验室中为了减少检测错误和差错,应采取严格的质量保证、质量控制和质量评价措施应注意实验室生物安全保护和职业暴露预防严格遵守实验室标准操作程序(SOP),按照试剂盒说明书操作,应注意防止样品、检测程序之间的交叉污染筛查试验重复检测确认试验、艾滋病病毒抗体筛查省级卫生行政部门指
5、定的验收专家组, 合格的艾滋病筛查实验室-酶联免疫吸附试验方法和试剂:第三代双抗原夹心试剂(ELISA)快速检测明胶颗粒凝集试验斑点ELISA斑点免疫金艾滋病唾液检测卡。 13、采集标本,血液标本一般从肘正中静脉采集3-5ml血液。婴儿可以选择颈外静脉。14,并采集标本,以肘部静脉的血液为例。选择合适的静脉,将压力带系在上臂。用25克/升碘酊棉签从里到外对皮肤进行消毒,干燥后用0.75克/升乙醇棉签同样的方法擦去碘痕。15.采集标本,取无菌注射器,用力按压针头,使针头斜面与注射器刻度平行,检查是否有堵塞或漏气。使用一次性注射器时,还应注意包装是否密封和过期,否则不应使用。收集标本,指导病人握紧
6、拳头,露出静脉。左手拇指固定穿刺部位的下端,右手握住注射器,使注射器的刻度朝上。首先,将针沿静脉前部以大约30的角度插入,然后迅速穿透皮肤并刺入静脉中心。看到血液回流后,用右手固定注射器,用左手慢慢拔出注射器针头螺栓,松开脉冲带,放松拳头,用无菌棉签按压穿刺孔,拔出针头。17.收集样本,取下针头,沿着管(瓶)壁慢慢将血液注入容器,直到血液凝固。血凝块收缩后,可以分离血清。如果需要全血或血浆,将血液注入准备好的抗凝管(瓶)中,并轻轻混合以防止凝结,这称为抗凝。血浆可以通过适当的离心分离。血清和血浆的主要区别在于血清中没有纤维蛋白原。取样后,应同时填写取样登记表。18、标本处理。将采集的血液样本以
7、3000转/分的速度放入离心机中5分钟,取出样本。用移液管(或一次性滴管)将血清转移到血清储存管(1.5毫升)中。测试后,将血清储存管盖紧,并在冰箱中储存至少2个月。胶体金快速检测技术,第一,原理,本产品采用胶体。在玻璃纤维膜上预涂金标记的HIVgp 160和gp3 6抗原,在硝酸纤维素膜检测线和质控线上分别涂HIVgp41、gp3 6混合抗原和抗HIVgp41抗体。当进行检测时,样品中的艾滋病毒抗体可以与金标记的艾滋病毒抗原结合形成复合物,该复合物由于层析而沿着测试条向前移动。如果样品中含有可检测的艾滋病毒抗体,它将与检测线预先包被的艾滋病毒抗原结合,形成“金标记的艾滋病毒抗原-艾滋病毒抗体
8、-艾滋病毒包被的抗原复合物”;如果样品中没有艾滋病毒抗体或艾滋病毒抗体的含量低于检测限,则不会形成复合物,也不会显色。1.艾滋病毒(12)抗体胶体金试纸条50人盒,(5) lO袋。2.一份说明书。3.稀释液1升,4毫升瓶。3、操作步骤,按照套件说明!一般操作步骤:1 .打开密封袋,取出所需的测试条。2样品检测:取40微升待测样品,加入试纸条的加样区,然后在加样区附近加入1滴稀释液。在3 3 0分钟内观察并记录测试结果。4。结果判断,阳性结果:试纸条的检测窗口和质控窗口出现紫红色条带。阴性结果:试纸条的质量控制窗口上仅出现一条紫红色条带。无效结果:如果测试条的测试窗口和质量控制窗口上没有出现紫红
9、色带,则测试无效。5。判断实验结果的示意图。注意事项,1 .待测试的样品和试剂应在室温下平衡约for 30分钟。被测试的产品应该是新鲜的样品。如果发现试条的密封袋损坏,应将其丢弃。2高脂血症和高胆红素血症样本对检测结果无显著影响,但溶血样本,尤其是大量溶血样本,对检测结果有显著影响。3.当紫红色带未出现在质量控制窗口和检验窗口时,应再次测试。如果问题仍然存在,应立即停止使用该批产品,并联系当地供应商。第七章。胶体金快速实物试剂、艾滋病病毒检测中的保密意识、艾滋病病毒检测前后咨询中获得的艾滋病病毒检测结果的保密性、在各种场合与专业人员就受试者进行的讨论(包括会议)、档案记录和匿名检测系统的保存由
10、受试者、家庭成员、朋友和单位向医院报告可以保证保密性,但不利于医疗管理、初筛结果处理、初筛(-)出具“艾滋病病毒抗体”重复检测当班艾滋病病毒筛查实验室或艾滋病病毒确认实验室筛查实验室计划复检并加强自身质量控制试剂选择:两种不同的原则或生产厂家品种:酶联免疫吸附试验快速检测试剂重复检测结果处理复检出具“艾滋病病毒抗体阴性”报告出具“艾滋病病毒抗体待复检”报告,但不出具阳性报告。-发送确认并填写复检样品送货单。两个人在原始或新样品和样品交付单上签名,并将其发送到确认实验室以确认实验。-职责确认实验室-检测方法蛋白质印迹实验(WB)线性免疫实验(LIA)免疫荧光实验(IFA)确认结果的解释。1.确认阴性(-)表示阴性咨询;2.确认积极的()进行积极的咨询;3.根据国家
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