肺部感染诊断难点：病原学诊断的规范化和新技术PPT课件

1、2020/8/11，1，肺部感染诊断难点-病原学诊断的规范化和新技术，复旦大学附属中山医院中山医院中山医院胡必杰别墅，2020/血WBC6500，P73； 胸片示双肺炎，如何进行病原学检查？ 痰培养3次痰涂片革染色镜检查痰找抗酸杆菌还有其他检查项目吗？ 临床情景，2020/8/11，3，男性，咳嗽，咳痰加重1周，痰色略黄色，发热38.5C，检查体右下肺略有湿性罗音，胸片示右下肺炎。 痰培养报告如下：痰培养报告(1)绿脓杆菌，痰培养报告(2)绿脓杆菌少量生长，痰培养报告(3)无主要病原菌，痰培养报告(4)绿脓杆菌草绿脓杆菌，临床方案，2020/8/11 theepidemiologyofcapc

2、api 34 (1) :41-8托拉斯1996 feb； 51(2):179-84，%，病例： 346。 男性占53%，平均年龄为49.3 /- 19.5(17-94 )； 方法： 1年。 血和胸水pleural fluid培养，特异血清试验确定病原结果： 80.6%病原，133(38.4 )超过1种病原体，62、148、35、101、56、20、19、 2020/8/11，6，肺部感染病原学诊断有哪些项目，显微镜检查革兰氏染色湿片检查分枝杆菌检查肺孢子菌检查(BAL )肺组织标本培养：选择细菌和真菌普通菌、厌氧菌、结核菌、真菌定量/半定量培养、免疫学方法抗原。 的双曲馀弦值。 组织病理学结核

3、和其他分枝杆菌真菌(曲霉，隐球菌)分子生物学核检等，2020/8/11，7，胸腔积液可以进行哪些检查？ 涂膜检查培养阴性者的价值尤为重要，普通培养可以将胸水直接注入血液培养瓶内进行检查，提高检出率。 但是，皮肤非病原菌能污染胸腔放置导管采集的胸水标本，所以分离的细菌只是定植，需要注意鉴别厌氧培养结核菌培养阳性率。 抗原检查如流式b型、肺链、军团菌或隐球菌、2020/8/11、 8、住院患者社区获得性肺炎单病种质量控制、住院标准氧结合评价病原学诊断判断住院24小时以内，采血血痰培养在初次抗菌药治疗前，血痰培养抗菌药采集时期住院8 h 6h内抗菌药治疗开始抗菌药选择重症和非重症患者开始抗菌药选择目

4、标抗感染药的治疗选择初期治疗72小时后无效者，病原学检查重复抗菌药治疗课程(平均天数)为患者提供2020/8/11，9，上海市感染病原学诊断和耐药性监测评价指标，2020/8/11，10，香港马里血WBC6500、P73。 会议需要如何选择抗感染药物？ 病原学检查情况痰涂片革兰氏染色镜检查痰找抗酸杆菌军团菌抗体检查和军团菌培养，临床情景，2020/8/11，12，右上肺空洞，肺脓肿？ 痰培养厌氧菌培养结核空洞？ 痰找抗酸杆菌培养肺部真菌感染？ 2020/8/11，13，双肺弥漫性结节伴空洞，男，65岁咳嗽数周无咯血，发热胸部CT示双肺多发结节伴空洞进一步检查。 2020/8/11，14，某男，

5、46岁，心脏移植术后2月佝偻。 伴咳嗽5天入院。 CT示双肺炎，随后应用万古霉、泰能、氟康唑等多种抗菌药物治疗无效，仍为高烧，出现进行性增强的呼吸困难。痰培养、血培养等为阴性，会诊要求如何选择抗感染药物进行哪些病原学检查项目？ 临床情景，2020/8/11，15，143，新型隐球菌凝集试验，2020/8/11，16，2020/8/11，dr . 2020/8/11，17，痰标本，应用抗生素前取痰标本。 标本采集后12h内必须立即进行实验室处理咳痰标本的应用最早且广泛，但也是最有争议的标本，在取标本前必须取牙、刷牙、漱口等口腔清洁的深咳嗽， 在标本采集过程中需要专业的医疗从业者指导的无痰，对于可

6、以用35NaCl 5ml雾吸约5min的导痰的理疗、体位引流、鼻导管吸引等方法也可以吸痰的细菌性肺炎，痰标本的送检每天连续1次、23天。 只要痰液外观性状不变，怀疑24h内不建议多次采集分枝杆菌感染者，连续采集3天早晨痰液送检、2020/8/11、18、若干下呼吸道直接采集标本，气管穿刺吸引反应TTA是应该用胸壁针刺吸引transthoracicneeer的TNA经支气管镜采样支气管肺泡灌洗bronchoalveolar lavage、BAL经支气管镜直接吸引污染防止样品毛刷protective specimen brush、 PSB开胸肺活检open-lung biopsy，OLB用人工气道

7、吸取分泌物endotracheal aspirates，ETA，2020/8/11， 19，用支气管镜取样，简单吸取，刷检，活检，灌注(PSB，TBLB 经污染防治灌注(PBAL )、2020/8/11、21、胸壁肺吸、活检，x线透视下、超声、CT引导下有一定的并发症气胸，2020/8/11、23、呼吸道标本规范检查、培养预处理痰标本质量评价痰标本均匀化定量或半定量培养条件培养平皿二氧化碳孵化箱、24、细胞学筛选，合格标本为白细胞多的不合格标本或唾液或唾液严重污染痰标本，鳞状上皮细胞多，白细胞少，2020/8/11，25，咳痰标本质量评价：细胞学筛选，*SEC25，分别为0、-1和-2。 WB

8、C25、分配0、1、2粘稠或脓性痰液的分配值、2020/8/11、26、5种筛选标准判断14001份痰标本合格率的比较，2020/8/11、27、痰标本不合格，拒绝检查吗？ 低倍视野下鳞状上皮细胞超过10个时，必须不要或仅在特殊要求时培养。 进行培养后，报告书上写道“镜检结果显示标本口咽分泌物的污染明显”。 复旦大学中山医院治疗方法痰液外观：脓性、粘脓、粘液、水样.镜检： WBC、SEC？ 痰标本质量评价：合格，不理想(建议再送)，2020/8/11， 28，在痰标本清洗消化、清洗灭菌等氯化钠液系列平皿内依次冲洗，或放入孔径1mm的过滤器中进行氯化钠清洗。 清洗可以去除痰液外层的水样唾液，留下

9、来自下呼吸道的粘稠或脓性成分。 消化乙酰半胱氨酸等消化液，蛋白水解酶和粘液溶解剂使用最多。 消化过程有助于痰核内部细菌的暴露，提高痰标本培养的阳性提取率的超声波液化(？2020/8/11、29、下呼吸道标本涂膜染色镜检查，初步病原学诊断：高质量痰标本涂膜染色或湿片检查趋势诊断：抗酸杆菌、放线菌、奴卡菌、部分真菌及肺孢子菌、寄生虫。 荧光显微镜：可用于军团菌、结核分枝杆菌等2020/8/11，30，革兰氏染色油镜检查，可仔细观察细菌形态，粗略判断细菌种类。 肺炎链球菌、流感菌、卡他莫拉菌等具有特征的病原体，在经验丰富时可以比较准确地判定。观察视野及周围不存在鳞状上皮细胞，但在可见炎性细胞或柱状上

10、皮细胞的视野内，发现许多形态单一的GNB时，对肺部感染病原体的诊断有参考价值的革兰氏染色镜检查结果必须立即临床报告，特别是ICU患者人工呼吸道吸引(ETA )标本巧克力琼脂培养基的接种胸腔积液和脓胸做革兰氏染色涂膜明确了细菌的类型，可以采用相应的抗菌治疗方案。 支气管镜洗涤液(BAL除外)和支气管的吸入物不能避免口咽污染，2020/8/11，31，CAP:痰液克染色不明。 目的通过： CAP患者痰克染色检测肺炎链球菌的作用方法3360检索Medline 1966 to 1993英文发表论文(检索词： sputum，Grams stain，pneumonia )规则：位盲评者独立判断文献， 11

11、件前瞻性研究和1件回顾性研究的修订1322 pt证据3360敏感性15%、特异性11%、多数研究敏感性70%、 70%被选为脓性痰缺陷：限制medllla的样品数、研究规模、盲检法， 阳性结果的定义或抗生素使用对照与试验特征无统计学相关性，如Reed WW，et al : sputumgramsstainincommunityacquiredpneumoccalpneumonia 3330 1653360197-204，等真菌检查：有将含有10%甘油的10%KOH与载玻片混合，盖上玻璃罩，在湿箱中放置1530分钟的经验的丝状菌可以检测出有动力的病原体，像引起双重感染的粪小丝状虫一样，可以在湿片

12、中发现鞭毛虫(？ 2020/8/11，33，2020/8/11，34，BAL离心沉淀物细胞学检查推荐，2020/8/11标准的定量培养方法复杂，提出半定量方法的方法：对四区的接种标本进行划线培养据报道，优势菌的生长菌落在3以上。 只有优势生长的好氧菌和兼性厌氧菌可以分为大量的heavy、中等量的moderate和少量的scattering生长3种。 只在原始区生长的少数细菌，除非临床上或直接被革兰氏染色显示有可能是感染的病原菌，否则不需要进行通常的鉴定。2020/8/11、36、划线接种平板半定量判定标准、2020/8/11、37、痰标本的培养基选择、培养基包括革兰氏阳性菌的血液平板、分离鉴别

13、革兰氏阴性菌的平板、例如麦康凯平板。 涂膜显示嗜血杆菌样或奈叶菌样优势菌(每油镜视野10个细菌)时，应增加接种营养丰富的巧克力平板，分离流棒、脑膜炎、片状物。 痰涂片发现多种GNB或医院内肺炎痰标本，应加入麦康凯平板培养平板进行细菌分离的情况较少，不应选择培养基，而应熟悉培养基中细菌的生长模式。 2020/8/11， 38，培养环境： CO2，平板35-37孵化为310CO2。 蜡烛筒基本上可以达到这一要求，但近年来的研究表明，在CO2培育箱中分离肺炎链球菌和流感嗜血杆菌明显优于蜡烛筒。 为了提高细菌的培养和分离质量，细菌室通常必须配备CO2培养箱，呼吸器标本在原代培养时尤为重要。 2020/

14、8/11，39，菌落观察和鉴定，平板孵化夜(18-24h )，观察和记录有几种不同的菌落类型。 咳痰标本：优势菌的几个菌落应分离鉴定。 直接采集的下呼吸道标本如PSB、BAL、TNA、胸腔穿刺液中生长的所有菌落类型均应鉴定。 患者接受抗生素治疗或革兰氏染色所见细菌未分离时，48h后必须重新观察平板。 是否需要某种菌落的鉴定，应根据引起下呼吸道感染的可能性和病例的临床特征决定。、2020/8/11、40、链球菌、溶血链球菌：应采取Optochin试验、胆汁溶解试验、荚膜肿胀试验等客观方法，鉴别绿色链球菌和肺炎链球菌。 草绿色链球菌：不要再鉴定到种子水平。 溶血性链球菌：至少应根据免疫方法或碳青霉

15、烯敏感性检测鉴定为a组和非a组链球菌。 非溶血性链球菌：如此报告即可，无需鉴定到物种水平。 2020/8/11，41，葡萄球菌，金葡萄球菌：致病力强，应与其他葡萄球菌鉴别。 其他葡萄球菌：很少引起下呼吸道感染，通常报告为凝固酶阴性葡萄球菌(CoNS )即可。 血液或通常无菌部位的标本如从胸水中分离的细菌，或医院感染标本需要追踪感染源时，应进一步进行生化实验鉴定凝固酶阴性葡萄球菌到种类水平。 2020/8/11，42，卡他莫拉菌和脑膜炎奈瑟菌，卡他莫拉菌：肺炎常见病原菌，痰培养中可疑卡他莫拉菌必须分离、鉴定。 奈瑟菌属：从咳痰标本中分离出来的奈瑟菌通常不需要鉴定物种。 只有临床医生建议，或者涂片革兰氏染色有典型特征，即发现了大量的细胞内革兰氏阴性双球菌，或者发现了大量单一形态的奈瑟菌的纯粹培养，提示了脑膜炎奈瑟菌是引起肺炎的病原体时，才能进一步鉴定。 2020/8/11，43，嗜血杆菌，流感嗜血杆菌： 510CO2，需要x和v因子的残奥流感嗜血杆菌：临床分离较多，多为非致病性上呼吸道正常菌群，2020/8/11，对这些肠杆菌科细菌和其他可感染病