吴峰竹茹温胆汤中竹茹的提取工艺研究

江 西 中 医 学 院2007 届毕业论文论文题目： 竹茹温胆汤中竹茹的提取工艺研究课题来源： 自 选 课 题 论文性质： 应 用 基 础 研 究学生姓名： 吴 峰 学生学号： 2007112040导师姓名： 关 志 宇导师职称： 讲 师导师电话：导师签名：实习单位： 江 西 中 医 学 院 药 学 院单位地址： 南 昌 市 湾 里 区 云 湾 路 18 号完成时间： 2011 年 5 月 3 号江西中医学院毕业论文1目 录一、论文1、标题和作者22、中文摘要及关键词23、英文摘要及关键词24、前言35、正文3-86、讨论或小结97、参考文献108、文献综述11-219、致谢及声明23二、导师评阅意见表（单张）三、优秀论文（单张） 、优秀导师申报表（单张）四、实习总结（单张）江西中医学院毕业论文2竹茹温胆汤中竹茹的提取工艺研究吴峰（江西中医学院 330004） 关志宇（江西中医学院药学院330004）中文摘要目的：优选竹茹温胆汤中竹茹的提取工艺。方法：采用正交试验法，以总多糖及干膏收率为评价指标，以多指标综合评分筛选竹茹最佳提取工艺。结果：最佳提取工艺为提取时间90min,提取次数为2次，加水量为10倍水。结论：优选的提取工艺科学、合理。关键字：竹茹温胆汤；提取工艺；正交试验；综合评分法ASTRACTPurpose:To optimize the extraction procedure of Bamboo RuWen bravery soup bamboo radha .Methods: Orthogonal experimental method,with total poly saccharides and dry paste yield as evaluation indexes, with many indexes and comprehensive score screening radha best extraction technology of bamboo. Result: The best extraction technology is for extracting time 90min, extraction times is for 2 times and added water is for 10 times water. Conclusion: Optimizing the extraction process is scientific and reasonable. Key words：Bamboo RuWen bravery soup ; Extraction technology ; orthogonal experiment; global measure.江西中医学院毕业论文3前 言竹 茹 温 胆 汤 出 自 明 、 龚 延 贤 的 万 病 回 春 卷 二 之 “伤 寒 ”门 ,由 柴胡 、 竹 茹 、 陈 皮 、 半 夏 ,生 姜 等 提取精制而成 。竹茹温胆汤为寿氏保元方剂, 由温胆汤加黄连、柴胡、组成。温胆汤能理气化痰, 和胃降逆, 是治疗痰热上扰, 失眠心悸等病症,。主要通过总多糖及其干膏回收率作为参评指标，用正交试验法对竹茹温胆汤中竹茹的提取工艺进行优选，从而确定最佳提取工艺方案。正 文 1.试验材料1.1 试验药材 姜竹茹，醋柴胡、法半夏、酒黄芩（江西汇仁药业有限公司）、陈皮（江西樟树天机堂中药饮片有限公司）等药材 。1.2试验试剂 葡萄糖，蒽酮 (国药集团化学试剂有限公司，批号：2010-09)浓硫酸（天津市永大化学试剂开发中心出品，批号：2006-11-03） ，无水乙醇（津市永大化学试剂开发中心出品，批号：2009-06-14） 。1.3.仪器设备 数显恒温水浴锅 HH-4(国华电器有限公司)，KQ 5200-DA型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司） ，SHZ-D（III-循环水式真空泵（巩义市予华仪器有限责任公司） ，真空干燥箱-DZF6020（上海一恒科学仪器有限公司） ，RE-SZD旋转蒸发器（上海青浦沪西仪器厂） ，752 -紫外可见分光光度计（上海欣茂有限公司制造） ，ZNHW-型智能恒温电热套（巩义市予华仪器有限责任公司）,分析天平（1/100、1/1000、1/10000、1/10000（Sartorius） ，酒精计（余江西中医学院毕业论文4姚仪表二产有限责任公司） 。2.试验方法2.1 正交试验设计采用煎煮法提取总多糖，以竹茹等药物水提取液中总多糖含量为指标，选用L9(3)正交表安排试验，对工艺中加水量、提取时间、提取次数三个因素进行考察，每个因素选3 个水平。见表1。表1 总多糖的水提取因素水平表Tab1 Levels of factors因 素加水量（倍） 提取时间（min） 提取次数（次）水平（A） （B） （C）1 6 30 12 8 60 23 10 90 32.2 水提液中多糖含量测定2.2.1 标准曲线的绘制 精密称取干燥至恒重的葡萄糖2g，置于100ml容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度，摇匀，得0.02g/ml葡萄糖标液，分别吸取标液1.0，1.5，2.0，2.5，3.0ml 分别置于10ml 容量瓶中，用蒸馏水定容，摇匀。再分别从中精密吸取1.0ml 置于干燥具塞试管中，各加硫酸- 蒽酮试剂4ml,混匀后，冰浴30min，于40度下加热 15min，冷却至室温。同时以 1.0ml蒸馏水加4.0ml硫酸- 蒽酮试剂作为空白试液调零，在625nm处测吸光度，以吸收值为纵坐标，浓度为横坐标，做标准曲线。得到吸光度-浓度回归曲线为A = 12.68C+ 0.0508，r2 = 0.9995。葡萄糖在0.02-0.06mg/ml范围内线性关系最好江西中医学院毕业论文52.2.2 总多糖的试液制备：精密称取总多糖粗品 0.5g， 置于烧杯中，加入 4倍的 70%的乙醇溶液，静置 2h,过滤,药渣加水 15ml提取，将其浓缩至 10ml，再用 70%乙醇溶液醇沉，静置过夜，取其沉淀多糖在 50度以下干燥，将干燥品用蒸馏水溶解，精密移取一定量（2ml）于 10ml容量瓶中，定容至 10ml再次移取 1ml置于干燥具塞试管中，各加硫酸-蒽酮试剂 4ml,混匀后，冰浴30min，于 40度下加热 15min，冷却至室温。同时以 1.0ml蒸馏水加 4.0ml硫酸-蒽酮试剂作为空白试液调零，在 625nm处测吸光度。总多糖含量（%）=对应浓度（mg/ml）50/样品重(g)浸膏得率(%)=M/N100% 式中:M -所得浸膏的重量 N-提取时用粗品的重量2.3 干膏收率的测定 取正交试验提取液 100ml，置已恒重的蒸发皿中，水浴挥去溶剂，60干燥 12h后称重，得干膏重量，计算每 46.5g药材中干膏重量即为干膏收率，结果见表 2。2.4 试验结果及分析2.4.1 试验结果按正交试验表安排试验，分别计算出各水提取液中浸膏得率及多糖含量并进行加权评分，权重系数分别为 0.4，0.6.综合评分 Y=（浸膏得率/浸膏最大得率）40+（多糖提取量/多糖最大提取量）60，综合评分结果见表 2，综合评分结果的方差分析结果见表 3。 江西中医学院毕业论文6附表 3表2 正交试验结果试验号 A加水量(倍)B提取时间（min）C提取次数（次）D误差项浸膏得率（%）多糖含量mg/ml综合评分1 1 1 1 1 13.12 24.2 53.772 1 2 2 2 18.49 26.7 65.393 1 3 3 3 26.45 28.4 79.814 2 1 3 2 22.80 31.5 71.645 2 2 1 3 22.37 36.8 67.996 2 3 2 1 14.20 29.3 62.547 3 1 2 3 24.30 39.6 92.268 3 2 1 1 18.28 38.1 81.059 3 3 3 2 23.14 62.8 98.80主体间效应的检验因变量:综合评分源 III 型平方和 df 均方 F Sig.校正模型 1653.848a 6 275.641 16.968 .057截距 50374.810 1 50374.810 3101.068 .000加水量 1141.579 2 570.789 35.138 .028提取时间 142.646 2 71.323 4.391 .046提取次数 369.624 2 184.812 11.377 .031误差 32.489 2 16.244总计 52061.147 9校正的总计 1686.337 8a. R 方 = .981（调整 R 方 = .923）江西中医学院毕业论文7T1 198.97 217.67 202.81 197.36T2 202.17 214.43 220.19 235.83T3 272.11 241.15 250.25 240.06K1 66.32 72.56 67.60 67.79K2 67.39 71.48 73.40 78.61K3 90.70 80.38 83.42 80.02SS 1141.579 142.646 369.624 32.499R 8.13 2.97 5.27 4.081.加水量（ 附表4 ）附表4是选用LSD法做的均数的两两比较表明：加水量1与加水量2的P=0.027，有显著性意义加水量 1与加水量 3的 P=0.018，有显著性意义加水量 2与加水量 3的 P=0.019，有显著性意义2.提取时间（附表 5）多个比较因变量:综合评分95% 置信区间(I) 加水量 (J) 加水量 均值差值 (I-J) 标准 误差 Sig. 下限 上限2.00 -1.0667 3.29083 .027 -15.2260 13.09261.00dimension3 3.00 -24.4067* 3.29083 .018 -38.5660 -10.24741.00 1.0667 3.29083 .027 -13.0926 15.22602.00dimension3 3.00 -23.3400* 3.29083 .019 -37.4993 -9.18071.00 24.4067* 3.29083 .018 10.2474 38.5660LSDdimension23.00dimension3 2.00 23.3400* 3.29083 .019 9.1807 37.4993基于观测到的均值。误差项为均值方 (错误) = 16.244。*. 均值差值在 .05 级别上较显著。江西中医学院毕业论文8附表5是选用LSD法做的均数的两两比较表明：提取时间1与提取时间2的 P=0.024，有显著性意义提取时间1与提取时间3的 P=0.037，有显著性意义提取时间2与提取时间3的 P=0.013，有显著性意义3.提取次数（附表6 ）多个比较因变量:综合评分95% 置信区间 (I) 提取次数(J) 提取次数 均值差值 (I-J) 标准 误差 Sig. 下限 上限2.00 -12.8500 3.29083 .040 -27.0093 1.30931.00dimension3 3.00 -14.2333* 3.29083 .034 -28.3926 -.07401.00 12.8500 3.29083 .040 -1.3093 27.00932.00dimension3 3.00 -1.3833 3.29083 .015 -15.5426 12.77601.00 14.2333* 3.29083 .034 .0740 28.3926LSDdimension23.00dimension3 2.00 1.3833 3.29083 .015 -12.7760 15.5426基于观测到的均值。误差项为均值方 (错误) = 16.244。*. 均值差值在 .05 级别上较显著。附表5是选用LSD法做的均数的两两比较表明：提取次数1与提取次数2的 P=0.040，有显著性意义提取次数1与提取次数3的 P=0.034，有显著性意义多个比较因变量:综合评分95% 置信区间(I) 提取时间 (J) 提取时间 均值差值 (I-J) 标准 误差 Sig. 下限 上限2.00 1.0800 3.29083 .024 -13.0793 15.23931.00dimension3 3.00 -7.8533 3.29083 .037 -22.0126 6.30601.00 -1.0800 3.29083 .024 -15.2393 13.07932.00dimension3 3.00 -8.9333 3.29083 .013 -23.0926 5.22601.00 7.8533 3.29083 .037 -6.3060 22.0126LSDdimension23.00dimension3 2.00 8.9333 3.29083 .013 -5.2260 23.0926基于观测到的均值。误差项为均值方 (错误) = 16.244。江