家兔小肠平滑肌实验小肠运动形式的ppt课件

家兔小肠平滑肌实验 小肠运动形式的观察 主讲教师：郑衍芳 王明晓 技术支持：蔡仕宁 遵义医学院珠海校区生理机能教研室 1 离体组织灌流方法 (了解 ) 保证离体器官存活的条件： 1.温度 2.营养 3.PH 4.酸碱度 5.渗透压 目前的离体灌流组织应用： 1. 家兔 离体小肠 2. 大鼠、小鼠 离体子宫 3. 大鼠 离体动脉条 4.豚鼠 离体气管条 5.蟾蜍、蛙、大鼠 离体心脏 . 实验原理 消化道平滑肌的一般生理特性： 收缩迟缓：舒缩运动 20S/次。 富有伸展性：伸长可达原来长度 23倍。 紧张性：常保持一种微弱的持续收缩状态。 节律性收缩：离体后于合适环境中仍能节律性收缩。 对电刺激不敏感，对化学、机械等刺激敏感。 小肠平滑肌也具有上述生理特性 。 实验原理和背景知识 小肠运动受到神经和体液的调节 * 遵义医学院珠海校区生理机能教研室 4 小肠的运动形式 紧张性收缩 分节运动 蠕动 移行性复合运动（ MMC） 体液调节 :胃肠激素如胃泌素、缩胆囊素、促胰液素等 神经调节 : 实验目的 学习哺乳动物类离体小肠平滑肌的制备方法。 观察某些因素（温度、 pH值、药物）对小肠平滑肌 舒缩活动的影响。 观察哺乳动物小肠的运动形式以及神经和某些药物 对其运动的影响。 掌握消化道平滑肌的一般生理特性。 * 遵义医学院珠海校区生理机能教研室 5 实验材料 动物：家兔 药品： 25%氨基甲酸乙酯、台氏液、 1mol/L 盐酸溶液、 1mol/L NaOH溶液、 0.001%乙酰胆碱溶液、 0.001%去甲肾上腺素溶液、 1%氯化钙溶液 器材：恒温平滑肌实验装置、生物信号采集系统、张力换 能器、计算机、兔台及手术器械 * 遵义医学院珠海校区生理机能教研室 6 * 遵义医学院珠海校区生理机能教研室 7 实验步骤 在体实验 麻醉和固定：称重，计算麻药计量（ 4ml/kg的 25%氨基甲酸 乙酯），耳缘静脉麻醉，鉴别后固定于兔台上。 腹部手术：腹部剪毛、自剑突下沿腹部正中线切开腹壁（ 10cm）。打开腹腔，暴露胃肠道并寻找小肠。用皮钳夹住 两侧腹壁并提起形成皮兜。 观察： 正常小肠的运动形式； 局部滴加乙酰胆碱后小 肠的运动形式； 局部滴加去甲肾上腺素后小肠的运动 形式。 * 遵义医学院珠海校区生理机能教研室 8 * 遵义医学院珠海校区生理机能教研室 9 * 遵义医学院珠海校区生理机能教研室 10 实验方法 离体实验 家兔一只，处死后迅速行腹部手术。 找出胃幽门与十二指肠交界处，由此取长 2030cm的肠管，不留肠 系膜。 取出肠段置于室温台氏液中轻轻漂洗，去除当肠内容物，将肠管分 成数段，每段长 2-3cm，两端各用系好线的蛙心夹夹住。 将离体平滑肌连接于设定温度好温度（ 38 ）恒温平滑肌槽、张立 换能器（书图 7-1,p121）上。打开电脑和生物信号采集系统。 * 遵义医学院珠海校区生理机能教研室 11 * 遵义医学院珠海校区生理机能教研室 12 张力换能器 蛙心夹 浴槽 小肠段 13 离体小肠收缩曲线代表意义 收缩曲线： -上升支 舒张曲线： -下降支 基线上移：紧张性升高 基线下降：紧张性下降 幅度增加：收缩力增强 幅度减低：收缩力减弱 波峰间距：代表收缩频率 实验步骤 离体实验： 观察离体小肠平滑肌的正常波形 观察 pH 值对小肠平滑肌的作用： 浴槽内加 1mol/L HCI 溶液 2-4滴，观察平滑肌的反应（观察 后立即冲洗和更换台氏液）。 * 遵义医学院珠海校区生理机能教研室 14 观察项目 离体实验： 乙酰胆碱的作用：浴槽内加入 0.001%的乙酰胆碱溶液 2-4滴， 观察平滑肌的反应（观察后立即冲洗和更换台氏液）。 去甲肾上腺素的作用：浴槽内加入 0.001%的去甲肾上腺素溶 液 2-4滴，观察平滑肌的反应（观察后立即冲洗和更换台 氏液）。 观察温度的影响：分别加入室温台式液、 25 台式液，观察 平滑肌的反应。 * 遵义医学院珠海校区生理机能教研室 15 注意事项 1.实验过程中必须保证标本的供氧 (通气 )及浴槽内台氏液的恒温 (38) 。 2.灌流浴槽内的液面高度应保持恒定。 3.放大器零点调好后不要再移动旋钮，以免影响基线。 上述各药液加入的量系参考数据，效果不明显者可以添加。 4.每次实验效果明显后立即放掉含药液的台氏液，并冲洗多次，以免平滑肌 出现不可逆反应。 5.每项处理必须有处理标记。 * 遵义医学院珠海校区生理机能教研室 16 思考题 胃肠平滑肌有哪些运动形式以及生理特性 本实验药品对小肠平滑肌的作用效果及其机制。 取肠时为什么采用击昏家兔而不用在麻醉下进行 ? 要保持小肠平滑肌较好的活性，实验过程中要注意什么？ 制备小肠平滑肌标本时，为什么要取小肠上段，尤其是十二 指肠段的平滑肌？ * 遵义医学院珠海校区生理机能教研室 17 实验结果分析 * 遵义医学院珠海校区生理机能教研室 18 正常 NaOH HCl Ach NA 氯化钙 25 实验结果分析 加入乙酰胆碱，可见收缩的幅度上升，基线抬高，频率加快 。 消化道平滑肌细胞产生动作电位的离子基础是钙内流， ACh-M受体结合，使钙通道开放，使肌浆中的钙升高，进 而激活肌纤蛋白 -肌凝蛋白 -ATP系统，使平滑肌收缩，肌张 力增加。故乙酰胆碱对小肠运动有加强作用。 * 遵义医学院珠海校区生理机能教研室 19 实验结果分析 加入去甲肾上腺素可见收缩的幅度小，基线下移，频率较慢 。 消化道平滑肌细胞上有 两种受体， NA可作用于 受体，使肌膜及肌质网上的钾离子通道开放，钾的外流增 加，使膜发生超极化，肠肌兴奋性下降，肌张力下降。同 时， NA还作用于 受体，使肠肌膜细胞中的 cAMP合成增 加，肌膜及肌质网上钙外流增加，也使肌张力下降。 * 遵义医学院珠海校区生理机能教研室 20 实验结果分析 加入 HCl溶液可见小肠平滑肌收缩的幅度减小，基线下移 ，频率较慢。 可能是氢离子与钙有竞争作用，氢离子增加，使钙与肠肌 细胞的钙调素（ Ca-M）结合少，而使肠肌细胞的收缩力下 降。 加入氢氧化钠：小肠平滑肌收缩的幅度增大，基线上移。 氢氧离子中和氢离子，从而削弱了氢离子与钙离子的竞争 作用，使钙调素与钙离子结合数量增多所至。 * 遵义医学院珠海校区生理机能教研室 21 实验结果分析 加入氯化钙溶液可见小肠平滑肌收缩的幅度增加，基线抬高 ，频率加快。 细胞外液中存在较多的 钙离子 ，而 钙离子 则是肌肉收缩的 必要条件。平滑肌细胞兴奋 肌膜被激活 细胞外 钙离子 进入膜内，而且肌浆网释放 钙离子 钙离子 浓度升高 钙 离子 与钙调蛋白结合 肌球蛋白激酶活化 ATP分解释放 能量 横桥获能处于高