kx-21血细胞分析仪作业指导书

沭阳县人民医院检验科 临床检验室 SYSMEX KX-21血细胞分析仪 作业指导书 文件编号：Q-1 版本：第一版 页号/总页数：1/9 SYSMEX KX-21血细胞分析仪作业指导书 1. 检验目的 SYSMEX KX-21血细胞分析仪是用于检测血细胞(红细胞、白细胞和血小板) 数量和白细胞分类的仪器。检测血液中血细胞数量的变化对临床有关疾病的诊断、 观察疾病的变化及治疗效果具有重要参考价值。 2. 检测原理 2.1 白细胞、红细胞及血小板采用电阻抗法进行计数。即在细胞检测器微孔的两 侧各有一个电极，两电极间通有恒定电流，经过稀释液（电解质溶液）稀释的血 样（血细胞）在通过检测器微孔时，产生了一个电脉冲；脉冲的高低代表细胞体 积的大小，脉冲的个数代表细胞的数量。 2.2 血红蛋白浓度采用 无氰 HGB测量法（氧合血红蛋白法）进行测量。即在稀 释的血样中加入溶血剂使红细胞膜破裂释放出血红蛋白，后者在瞬时间被转化生 成氧合血红蛋白，在 555nm处其吸光度与只有稀释液时的吸光度相比较以求出 HGB。 3. 标本 3.1 临床护士抽取病人静脉血 1-2ml置于含 EDTA-3K的真空管内抗凝； 3.2 采血后立即送到检验科血细胞化验室； 3.3 血量不够 1ml或血液凝固、溶血或脂血标本不能做检测。 4 设备和试剂 4.1 SYSMEX KX-21血细胞分析仪(主机号：A3878)；新仪器安装后首先要鉴定， 具体步骤见仪器手册。 4.2 试剂：包括稀释液、溶血剂和清洁液。 4.3 购买的试剂应放室温保存，注意防尘、防潮。 4.4 开封后的试剂应尽快用完，超过有效期的试剂不能使用。 5 校准步骤 5.1 SYSMEX KX-21 血细胞分析仪安装或大修后需要进行校准； 5.2 SYSMEX KX-21血细胞分析仪检测结果中的全部或某一项不准确，需要进行校 准； 5.3 仪器在进行校准前必须对检测器、血红蛋白测量池等管道液路系统进行彻底 清洗，操作过程详见 SYSMEX KX-21血细胞分析仪使用手册。 2 5.4 SYSMEX KX-21血细胞分析仪的校准包括末梢血和全血两套系统，操作过程详 沭阳县人民医院检验科 临床检验室 SYSMEX KX-21血细胞分析仪 作业指导书 文件编号：Q-1 版本：第一版 页号/总页数：2/9 见该仪器使用手册。 6 操作步骤 6.1 试剂检查：开机前检查试剂是否够量，有无混浊变质，管道有无扭结，清空 废液桶。 6.2 开机与本底检测：打开 UPS电源开关，等待 60秒钟后，再打开主机电源开 关，仪器进行系统检查后进行试剂本底测试，试剂本底必须满足下列要求： WBC0.310 9/L、RBC 0.0210 12/L、HGB2g/L、PLT1010 9/L。 6.3 末梢血测量： 6.3.1用加液注射器吸取 CELLPACK稀释液 500ul加入到试管中，将采集的 20ul 末梢血注入到稀释液中,充分混匀制成稀释血样。 6.3.2确认当前 LCD画面为准备测量状态。按下 键，将画面变换 至变换模式画面，选择 预先稀释（PD） ，按 键后，进行检测模式的 切换，回到主画面。 6.3.3将混匀的稀释血样，放在进样针下,按 键进行计数，结果自动打 印。 6.4 全血测量：测量之前，确保确认当前 LCD画面处于全血模式（WD）下，将临 床送检的合格抗凝静脉血标本编号后放入试管架中，测试前将血液颠倒混匀后, 放在进样针下，按 键进行计数，结果自动打印。 6.5 标本号码的输入：按下面板上SAMPLE No 键，标本号码激活，这时输入 需要的标本号码，如：24 按 ENTER 键确认，LCD 画面进入准备测量状态。 6.6清洗与关机：检测完毕后，按下SHUTDOWN键，仪器进入关机画面，将清 洗 液放在吸样针下，按 键，仪器自动吸引清洁液，对整个测量系统进行 清洗。约 5分钟清洗结束，即可关掉主机。 7 质量控制 7.1 科内自制质控物 7.2 质控措施（见科内室内质控） 8 干扰因素 8.1严重的黄疸或脂血使血红蛋白结果假性增高； 8.2红细胞冷凝集可使红细胞、白细胞和血小板计数结果假性减低，MCV 假性增 高； 8.3冷凝球蛋白增高使白细胞和血小板计数结果假性增高； 8.4有血小板凝集使血小板计数结果假性减低。 沭阳县人民医院检验科 临床检验室 SYSMEX KX-21血细胞分析仪 作业指导书 文件编号：Q-1 版本：第一版 页号/总页数：3/9 9 计算 按仪器设计原理，只对红细胞常数（红细胞平均体积、红细胞平均血红蛋白 量、红细胞平均血红蛋白浓度）进行计算，可根据 RBC、HGB 及 HCT结果求出。 9.1 红细胞平均体积（MCV） 根据 RBC及 HCT，由下式求出。 10)/(%)(6LRBCHTflMV 9.2 红细胞平均血红蛋白量（MCH） 根据 RBC及 HGB，由下式来求出。 10)/()(6dgGp 9.3 红细胞平均血红蛋白浓度（MCHC） 根据 HCT及 HGB，由下式来求出。 10(%)/)/(HCTdLgBdLgMC 9.4 RDW由血细胞分析仪测量获得，是反映周围血红细胞体积异质性的参数。当 红细胞通过小孔的一瞬间，计数电路得到一个相应大小的脉冲，不同大小的脉冲 信号分别贮存在仪器内装计算机的不同通道，计算出相应当体积及细胞数，统计 处理而得 RDW。 10 生物参考值区间和极限值 10.1 血细胞生物参考值区间 10.1.1白细胞： 成年人静脉血：3.510.010 9/L； 手指血：4.010.010 9/L； 新生儿 ：15.020.010 9/L； 6个月2 岁 ：11.012.010 9/L； 10.1.2红细胞 4 成年男性：4.35.8610 12/L； 成年女性：3.775.1710 12/L； 新生儿 ：6.07.010 12/L； 10.1.3血红蛋白 沭阳县人民医院检验科 临床检验室 SYSMEX KX-21血细胞分析仪 作业指导书 文件编号：Q-1 版本：第一版 页号/总页数：4/9 成年男性：135180 g/L； 成年女性：115155 g/L； 新生儿 ：180190 g/L； 10.1.4红细胞压积 成年男性：0.4000.517； 成年女性：0.3670.467； 10.1.5血小板：100-30010 9/L 10.1.6 MCV ：80100fL； 10.1.7 MCH ：27.234.3 pg； 10.1.8 MCHC：320360 g/L； 10.1.9 RDW ： 0.145 10.1.10 PCT：男性 0.1830.041；女性 0.1980.042； 10.1.11 MPV：男性 10.071.78fL；女性 10.241.58fL； 10.1.12 PDW：16.8%0.63%； 10.2 血细胞极限值 10.2.1 白细胞 0.510 9/L 10.2.2 红细胞 1.010 12/L 10.2.3 血红蛋白 30g/L 10.2.4 血小板 2010 9/L 11 实验室解释 11.1 白细胞计数结果异常 11.1.1 白细胞生理变化： 11.1.1.1 年龄：初生儿白细胞较高，一般在 15109/L左右，个别可高达 30109/L以上。通常在 34 天后降至 10109/L左右，约保持 3个月，然后逐 渐降低至成人水平。初生儿外周血白细胞主要为中性粒细胞，到第 69 天逐渐 下降至与淋巴细胞大致相等。以后淋巴细胞逐渐增多，整个婴儿期淋巴细胞数均 较高，可达 70%。到 23 岁后，淋巴细胞逐渐下降，中性粒细胞逐渐上升，到 45 岁二者又基本相等，形成中性粒细胞和淋巴细胞变化曲线的两次交叉，至青 春期时与成人基本相同。 11.1.1.2日间变化：白细胞数在静息状态时较低，活动和进食后较高；早晨较低， 沭阳县人民医院检验科 临床检验室 SYSMEX KX-21血细胞分析仪 作业指导书 文件编号：Q-1 版本：第一版 页号/总页数：5/9 下午较高；一日之间最高值与最低值之间可相差 1倍。运动、疼痛和情绪变化、 一般的体力劳动、冷热水浴、日光或紫外线照射等，均可使白细胞轻度增多，而 剧烈运动、剧痛和激动可使白细胞显著增多。如剧烈运动，可于短时间内使白细 胞高达 35109/L，以中性粒细胞为主；当运动结束后迅即恢复原有水平 。这种 短暂的变化，主要是由于循环池和边缘池的粒细胞重新分配所致。 11.1.1.3妊娠与分娩：妊娠期常见白细胞增多，特别是最后 1个月，常波动于 (1217)10 9/L之间，分娩时可高达 34109/L。分娩后 25 日内恢复正常。 由于白细胞的生理波动很大，只有通过定时和反 复观察才有意义。 11.1.2.白细胞病理变化： 11.1.2.1增高 11.1.2.1.1急性感染：急性化脓性感染时，白细胞增高程度取决于感染微生物 的种类、感染灶的范围、感染的严重程度、患者的反应能力。如感染很局限且 轻微，白细胞总数仍可正常，但分类检查时可见分叶核百分率有所增高；中度 感染时，白细胞总数常增高大于 10.0109/L， 并伴有轻度核象左移；严重感染 时，白细胞总数常明显增高，可达 20.0109/L以上，且伴有明显的核象左移。 11.1.2.1.2严重的组织损伤或大量血细胞破坏：在 较 大 手 术 后 12 36小 时 ，白 细胞常达 10.0109/L以上，其增多的细胞成分以中性分叶核粒细胞为主。急性 心肌梗塞后 12 天内，常见白细胞数明显增高，借此可与心绞痛相区别。急性 溶血反应时，也可见白细胞增多。 11.1.2.1.3急性大出血：在脾破裂或宫外孕输卵管破裂后，白细胞迅 速 增 高 ， 常 达 (20 30)109/L。 其 增 多 的 细 胞 也 主 要 是 中 性 分 叶 核 粒 细 胞 。 11.1.2.1.4急 性 中 毒 ： 化 学 药 物 如 安 眠 药 、 敌 敌 畏 等 中 毒 时 ， 常 见 白 细 胞 数 增 高 ， 甚 至 可 达 20109/L或 更 高 ， 代 谢 性 中 毒 如 糖 尿 病 酮 症 酸 中 毒 及 慢 性 肾 炎 尿 毒 症 时 ， 也 常 见 白 细 胞 增 多 ， 均 以 中 性 分 叶 核 粒 细 胞 为 主 。 11.1.2.1.5肿 瘤 性 增 多 ： 白 细 胞 呈 长 期 持 续 增 多 ， 最 常 见 于 粒 细 胞 性 白 血 病 ， 6 其 次 也 可 见 于 各 种 恶 性 肿 瘤 的 晚 期 。 此 时 不 但 总 数 常 达 (10 20)109/L或 更 多 ， 且 可 有 较 明 显 的 核 左 移 现 象 ， 而 呈 所 谓 类 白 血 病 反 应 。 11.1.2.2减低: 11.1.2.1 某些感染：某些革兰氏阴性杆菌如伤寒杆菌感染时，如无并发症，白 细胞数均减少甚至可低到 2109/L以下。一些病毒感染如流感时白细胞亦减少， 可 沭阳县人民医院检验科 临床检验室 SYSMEX KX-21血细胞分析仪 作业指导书 文件编号：Q-1 版本：第一版 页号/总页数：6/9 能是由于在细菌内毒素及病毒作用下使贴壁的即边缘池粒细胞增多而导致循环池 中粒细胞减少所致，也可能与内毒素抑制骨髓释放粒细胞有关。 11.1.3.2 某些血液病：如典型的再生障碍性贫血时，呈“三少”表现。此时白 细胞可少到 1109/L以下，分类时几乎均为淋巴细胞，乃因中性粒细胞严重减 少所致的淋巴细胞 相对增多。小部分急性白血病其白细胞总数不高反而减低，称非白血性白血病 （aleukemic leukemia） ，其白细胞可110 9/L，分类时也呈淋巴细胞相对增多， 此时只有骨髓检查才能明确诊断。 11.1.3.3 慢性理、化损伤：电离辐射（如 X线等） 、长期服用氯霉素后，可因抑 制骨髓细胞的有丝分裂而致白细胞减少，故于接触和应用期间每周应作一次白细 胞计数。 11.1.3.4 自身免疫性疾病：如系统性红斑狼疮等，由于自身免疫性抗核抗体导 致白细胞破坏而减少。 11.1.3.5 脾功能亢进：各种原因所致的脾肿大，如门脉肝硬化、班替综合征等 均可见白细胞减少。其机制为肿大的脾中的单核-巨噬细胞系统破坏了过多的白 细胞；肿大的脾分泌了过多的脾素，而此种体液因子能来活促进粒细胞生在的某 些因素。 11.2 白细胞分类结果异常 11.2.1中性粒细胞 11.2.1.1 增加：急性感染性化脓性炎症，中毒（尿毒症、糖尿病酸中毒）急性 出血、急性溶血及手术后等。 11.2.1.2 减少：某些传染病（伤寒、疟疾等）化学药物及放射损害，某些血液 病、过敏性休克、恶病质、脾功能亢进及自身免疫性疾病等。 11.2.2淋巴细胞 11.2.2.1 增加：淋巴细胞性白血病，百日咳，传染性单核细胞增多症、水痘、 麻 疹、结核病、狭窄排斥反应前期，传染病恢复期等。 11.2.2.2减少：免疫缺陷病，丙种球蛋白缺乏症，淋巴细胞减少症，应用肾上腺 皮质激素后，放射病等。 11.2.3单核细胞 增多：常见于亚急性细菌心内膜炎、伤寒、疟疾、黑热病、活动性结核、 沭阳县人民医院检验科 临床检验室 SYSMEX KX-21血细胞分析仪 作业指导书 文件编号：Q-1 版本：第一版 页号/总页数：7/9 单核细胞性白血病，急性感染 恢复期等。 11.2.4 嗜酸性粒细胞 11.2.4.1增多：见于过敏性疾病、皮肤病、寄生虫、血液病、猩红热、溃疡性结 肠炎、X 线照射后，脾切除、传染病恢复期等。 11.2.4.2减少：多见于伤寒、副伤寒，以及应用肾上腺皮质素或促肾上腺皮质素 后。 11.2.5 嗜碱性粒细胞 增多：见于慢性粒细胞白血病、淋巴网细胞瘤、脾切除后等，恶性肿瘤、 严重传染病、败血病、中毒（药物或重金属）大面积烧伤等。严重感染中性粒可 出现毒性颗粒、空泡、Dbhle 氏体，核棘突，退行性变及细胞大小不均等变化。 11.3红细胞结果异常： 11.3.1 红细胞增多 11.3.1.1 相对性增多：常见于剧烈呕吐、严重腹泻、大面积烧伤、大量出汗、 多尿和水的摄入量显著不足的患者。 11.3.1.2 绝对性增高：与组织缺氧有关。可引起继发性红细胞增多，如慢性肺 源性心脏病、发绀性先天性心脏病，慢性一氧化碳中毒，登山病等。 11.3.1.3 真性红细胞增多症，红细胞可达（7-10）10 12/L。 11.3.2 红细胞减少 11.3.2.1 生理性贫血：妊娠期因血浆量相对增多，故红细胞相对减少。3 个月的 婴儿至 15岁的儿童，因生长发育迅速而致造血原料相对不足，红细胞和血红蛋 白可较正常人低 10%-20%。老年人由于骨髓造血功能逐渐减低，均可导致红细胞 和血红蛋白含量减少。 8 11.3.2.2 病理性减少： 红细胞减少所致的贫血：一是因骨髓造血功能衰竭， 如再生障碍贫血、骨髓纤维化等伴发的贫血；二是因造血物质缺乏或利用障碍引 起的贫血，如缺铁性贫血、铁粒幼细胞性贫血、叶酸及维生素 B缺乏所致的巨幼 细胞性贫血。 因红细胞膜、酶遗传性的缺陷或外来因素造成红细胞破坏过多 导致的贫血，如遗传性球型红细胞增多症、地中海性贫血、阵发性睡眠性血红蛋 白尿、异常血红蛋白病、免疫性溶血性贫血、心脏体外循环的大手术及一些化学、 生物因素等引起的溶血性贫血。 失血：急性失血或消化到溃疡、钩虫病等慢 性 沭阳县人民医院检验科 临床检验室 SYSMEX KX-21血细胞分析仪 作业指导书 文件编号：Q-1 版本：第一版 页号/总页数：8/9 失血所致贫血。 11.4 血红蛋白异常 血红蛋白的增减临床意义大致与红细胞的增减意义相似，但血红蛋白更准确反映 贫血的程度。血红蛋白的减少与红细胞的减少程度不一定呈正比例，一是在小红 细胞贫血时，由于单个红细胞血红蛋白的含量少于正常， 所以血红蛋白减少的程度较红细胞减少的程度更为明显，如缺铁性贫血、消化性 溃疡、肠息肉、痔疮、月经过多、钩虫病等慢性反复出血等；二是在大红细胞性 贫血减少的程度较血红蛋白更为严重，如缺乏维生素 B12或叶酸引起的营养不良 性贫血及肝硬化性贫血等； 三是在大出血时，血红蛋白减少的程度基本上与红细胞减少想一致，如消化道、 肺部大出血及其他原因引起的大出血，再生障碍性贫血、纯红细胞再生障碍性贫 血。 11.5 血小板结果异常 11.5.1减少:血小板数10010 9/L为减少。血小板产生减少，见于造血功能 受到损害，如再生障碍性贫血、急性白血病、急性放射病；血小板破坏亢进， 见于原发性血小板减少性紫癜、脾功能亢进症和进行体外循环时；血小板消耗 过多，如弥散性血管内凝血、血栓性血小板减少性紫癜等。 11.5.2增多:血小板数40010 9/L为增多。一过性增多，见