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文档简介
肿瘤模型治疗方案 观察小鼠成瘤情况,当扪及接种皮下出现结节,并不断增长时,判 断为模型成功。在接种后的第 7-9 天(瘤体体积约为 0.05 立方厘米) , 随即分为模型对照组,阳性对照组,低剂量组,中剂量组,高剂量 组五个组,每组八只。禁食 16h(前一天下午 5 点到次日上午 9 点) , 每只按 0.1ml/10g 灌胃给药(灌胃步骤见下页) ,每日给药一次,连 续给药 2 周,总计给药 14 次。试验期间,每三天用游标卡尺测定肿 瘤生长情况和记录体重变化。实验结束后,断椎处死小鼠,分离瘤 体称重和测定体积。测量脾脏指数和胸腺指数(查查还可以检测什 么指标,找容易做的) 实验组 注射剂量 次数 实验前 体重 实验后 体重 肿瘤大小 (体积) 模型对照组 生理盐水 0.1ml/10g 1 次 /天 阳性对照组 0.1ml/10g 同上 低剂量组 0.1ml/10g 同上 中剂量组 0.1ml/10g 同上 高剂量组 0.1ml/10g 同上 阳性对照组(5-FU)50mg/kg;低剂量组 10mg/kg;中剂量组 20mg/kg;高剂量组 50mg/kg。每只小鼠灌胃剂量不超过 0.1ml/10g。为了保证每只小鼠灌胃剂量的体积和浓度,可将不同剂 量组的药物配成不同浓度。 结果:肿瘤体积计算公式:V=ab2/2(V 为体积,a 为最长直径,b 为最短直 径)。抑瘤率为:(对照组平均瘤重实 验组平均瘤重)对照组平均瘤重100%。 总结:1.预测通过三个不同剂量组治疗后的肿瘤重量与对照组肿瘤重 量有明显差异,说明黑麦酮酸 D 对于肝癌细胞有抑制作用;2.同时 三个剂量组之间的差值说明黑麦酮酸 D 呈现剂量依赖性增强的特点, 即一定范围内,用量越高,疗效越好;3.剂量组与阳性对照组之间 的差值,可以反映出哪种药物治疗效果更好。 小鼠灌胃方法需要关注两点:一是要保持小鼠的头部和颈部成一直 线,方便灌胃针头进入,二是动作要轻柔,从口角进入,防止损失 食道。 灌胃具体操作过程如下: 1. 抓住小鼠,使其头、颈和身体呈一直线。抓小鼠的动作很简单, 左手的小指和无名指抓住小鼠的尾巴,另外三个手指抓住小鼠的颈 部即可。 (注意:因为小鼠始终在活动中,若一次抓的感觉不是很顺 手,要放开重新抓,不要逞强进行下一步操作。 ) 2. 抓好小鼠就可以灌胃了,一般用 1 ml 的注射器配灌胃针头。灌 胃针头从小鼠的嘴角进入,压住舌头,抵住上颚,轻轻向内推进, 进入食管后会有一个刺空感,进入食道后就可以推注药液了。 (灌胃, 不必要灌胃针头进入小鼠的胃部,进入食管后就可以推药了,这样 对小鼠食道的损伤要小点,特别是要长期灌胃给药的情况下。 )当然, 灌胃针头也可以再往里面深入一点,防止药液从口中流出。 3. 灌胃容积一般是 0.10.2 ml/10 g,最大 0.35 ml/10 g,每只小鼠 的灌胃最大容积不超过 0.8 ml。 经验总结 1. 在操作过程中最重要的是小鼠的固定。把小鼠放在笼子上,右手 捏住它的尾巴,它会扒住笼子伸长身体,然后左手拇指和食指捏住 它颈部皮肤(不用太用劲,保证它不能回头就行) ,其余三指抓住背 部,就可以把它固定住了。注意头一定要固定好,头和躯体要保持 一条直线,并且灌胃时使小鼠成竖直位,头向上。 2. 把握要领,动作尽量迅速,减少小鼠的不适感。 3. 小鼠灌胃剂量:0.1 ml/10 g 体重,也就是说,一只 20 g 的小鼠, 一般一次灌胃 0.2 ml。 4. 灌胃的方法与技巧对了,一般不会有问题。比如说抓小鼠的姿势 (小鼠的身体最好伸展在一条直线上,不能让它乱动,要固定) ;还 有,一定要用灌胃针灌胃(灌胃针的针尖部分是弯曲的) ;另外就是 技巧上的问题了,进针时要从小鼠的嘴角进去,进去后让灌胃针顺 着小鼠的上腭压着它的舌头进入食道,这当中会有种突破感,突破 感过后就畅通无阻了,液体灌进去一点阻力也没有,若有阻力的话, 那就说明你灌错地方了,取出灌胃针再来过,多练几次就熟练了, 另外,灌胃的动作不能太粗鲁,一定要轻柔! 6. 20 g 的小鼠灌胃一天一次,只要操作得当不会被灌死。灌胃针可 用 12#注射器针头,磨平尖端,点焊为钝圆形。 7. 操作前将灌胃针安在注射器上大致测量一下从口腔到胃内的位置 (最后一根肋骨后缘) 的长度,根据此距离确定插入深度,成年小鼠插入 大约 3 厘米。成年小鼠每次最大可灌 1.0 毫升。 8. 最
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