皱纹盘鲍 褐藻酸酶 纤维素酶 淀粉酶 实时荧光定量pcr 胚胎发育和饵料转换 温度因素 基因表达论文

皱纹盘鲍论文：皱纹盘鲍皱纹盘鲍论文：皱纹盘鲍 4 4 种多糖裂解基因的表达研究种多糖裂解基因的表达研究 【中文摘要】皱纹盘鲍(Haliotis discus hannai Ino)是名贵 养殖贝类。皱纹盘鲍主要以藻类为食,幼体皱纹盘鲍主要摄食卵形藻 (Cocconeis sp)、舟形藻(Navicula sp)、菱形藻(Nitzschia sp)等 底栖硅藻、而成体皱纹盘鲍则主要摄食大型海藻,尤其喜食海带 (Laminaria japonica)。多糖类物质是藻类的主要组分,比如硅藻含 纤维素和淀粉,海带含纤维素、褐藻胶和海带淀粉。本研究利用实时 荧光定量 PCR 技术在转录水平研究不同生长、发育阶段皱纹盘鲍体 内褐藻酸酶(hdaly)、纤维素酶(hdcel)、-淀粉酶(hdamyl)和海带 淀粉酶(hdlam)等多糖裂解酶基因的定量表达,同时分析了不同温度 下长期培育的皱纹盘鲍体内多糖裂解酶基因的表达变化。旨在通过 对 4 种多糖裂解酶基因表达的定量研究,揭示皱纹盘鲍在不同发育阶 段和生理状态下对食物中各种多糖类物质的利用情况。现将主要结 果摘要如下:1.皱纹盘鲍 4 种多糖裂解酶基因序列及表达的组织特异 性根据已发表的盘鲍或皱纹盘鲍多糖裂解酶基因及皱纹盘鲍内参基 因 -actin 的 cDNA 序列信息设计适合实时荧光定量分析的特异性 扩增. 【英文摘要】Polysaccharides are major components of algae which adult abalone is naturally feed on. Diatoms includs cellulose and starch, kelp contains cellulose, alginate and laminarin, for example.The mRNA expression of alginate lyase, cellulase,-amylase and laminarinase gene in Pacific abalone, Haliotis discus hannai Ino, on the process of growth and development has been researched with the Real-time RT-PCR technology in this article. We also analyzed the effect of temperature on mRNA expression of these four g. 【关键词】皱纹盘鲍 褐藻酸酶 纤维素酶 淀粉酶 实时荧光定 量 PCR 胚胎发育和饵料转换 温度因素 基因表达 【英文关键词】Haliotis discus hannai Ino alginate lyase cellulase amylase Real-time RT-PCR embryonic development period food conversion period thermal gradient mRNA expression 【目录】皱纹盘鲍 4 种多糖裂解基因的表达研究 摘要 6-8 ABSTRACT 8-9 第一章 综述 10-29 1.1 皱纹盘鲍及其养殖、发育概述 10 1.2 皱纹盘鲍 的营养需求 10-13 1.3 鲍的多糖裂解酶 13-23 1.4 实时荧光定量 PCR 23-27 1.5 本研究的目的及意 义 27-29 第二章 皱纹盘鲍 4 种多糖裂解酶基因序列 和组织特异性表达 29-47 第一节 皱纹盘鲍 4 种多糖 裂解酶基因的组织表达差异分析 29-39 2.1 材料与方 法 29-33 2.2 结果与讨论 33-38 2.3 小结 38-39 第二节 皱纹盘鲍 4 种多糖裂解酶基因 Real-time PCR 扩增产物的序列分析 39-47 2.4 材料 和方法 39-42 2.5 结果与讨论 42-45 2.6 小结 45-47 第三章 皱纹盘鲍胚胎发育期和饵料转换 期 4 种多糖裂解酶基因 mRNA 水平的表达变化 47-58 第一节 胚胎发育期 4 种多糖裂解酶基因 mRNA 水平的表达变化 47-53 3.1 材料与方法 47-49 3.2 结果与 讨论 49-52 3.3 小结 52-53 第二节 饵 料转换期 4 种多糖裂解酶基因 mRNA 水平的表达变化 53-58 3.4 材料与方法 54 3.5 结果与讨论 54-57 3.6 小结 57-58 第四章 不同温度下长期培育