51例慢性淋巴细胞白血病的免疫表型及细胞遗传学特征研究(1)

5151 例慢性淋巴细胞白血病的免疫表型及例慢性淋巴细胞白血病的免疫表型及 细胞遗传学特征研究细胞遗传学特征研究(1)(1) 作者：马勤芬，周惠芬，朱明清，刘丹丹，陈子兴， 薛永权 【摘要】本研究探讨慢性淋巴细胞白血病的免疫表型 及细胞遗传学特征，为其诊断及治疗提供依据。采用一组 系列相关单克隆抗体和三色流式细胞术对 51 例 CLL 患者进 行免疫表型分析，并应用 R 显带技术对这 51 例患者的细胞 遗传学异常进行了研究。结果表明：51 例 CLL 患者中， CD19 和 CD23 阳性率为%，其后依次为 CD5（%） 、CD20（%） 和 CD22（%） ，CD38 阳性率为%。CD5 和 CD19 共阳性者 46 例。 51 例患者的染色体异常检出率为%（18/51） ，共检出 7 种主 要异常核型，其中 12 有 3 例，13q-有 2 例，其它主要异常 有 14、6q-、t、t 和 t 等。各抗原表达与染色体异常无显 著性差异（p） 。结论：典型 CLL 免疫表型为 CD5、CD19 和 CD23 阳性；常规细胞遗传学（CC）检测 CLL 染色体异常阳 性率偏低；免疫表型结合细胞遗传学异常对 CLL 诊断及预 后有重要价值。 【关键词】慢性淋巴细胞白血病 ImmunophenotypicandCytogeneticFeaturesin51CasesofCh ronicLymphocyticLeukemia AbstractThestudywasaimedtoinvestigatetheimmunopheno typicandcytogeneticfeaturesofchroniclymphocyticleuk emiainordertoprovideanevidencefordiagnosisandtherap y.Immunophenotypicanalysiswasperformedbyusingapanel ofmonoclonalantibodiesandthreecolorimmunofluoresc encestainingmethodsofflowcytometryin51patientswithC LL,andthecytogeneticfeatureswereanalyzedbyRbandin gtechnique.Theresultsindicatedthatamong51CLLcases,t hepositiverateofCD19andCD23was%,followedbyCD15,CD20 andCD22.ThepositiverateofCD38was%.Fortysixpatient sexpressedbothCD5andCD19.Sevenmainclonalchromosomal abnormalitiesweredetectedbyconventionalcytogenetics ineighteencases,withthreecasesof12,twocasesof13q- ,otherchromosomalabnormalitiesincluded14,6q- ,t,tandt.Expressionoftheantigenshadnorelationshipwi thchromosomalabnormalities.Itisconcludedthattypical CLLexpressCD5,CD19andCD23,andthepositiveratedetecte dbyCCinCLLislow.Immunophenotypingincombinationwithc ytogenetictechniqueplaysanimportantroleinthediagnos isandprognosisofCLL. Keywordschroniclymphocyticleukemia;immunophenotype; flowcytometry;cytogenetics JExpHematolXX;15:696-699 慢性淋巴细胞白血病（CLL）是一种低度恶性的小淋巴 细胞异质性疾病，以外周血及骨髓中成熟的淋巴细胞增多 为主要临床特点。CLL 有两种类型，BCLL 占 95%，TCLL 仅占 5%1 。CLL 的免疫表型及细胞遗传学特征研究对 CLL 鉴别诊断及预后判定有重要意义。现将我院自 XX 年以来检 测的 51 例 CLL 患者的免疫表型及细胞遗传学特征分析如下。 材料和方法 病例资料 苏州大学附属第一医院 XX 年 7 月-XX 年 4 月初诊 CLL 患者 51 例，其中男性 35 例，女性 16 例，年龄 44-84 岁， 中位年龄 63 岁，其中60 岁者 38 例。CLL 诊断与分型参照 血液病诊断及疗效标准 2 。CLL 评分依据 XX 年 WHO 计 分系统3 （表 1） ，典型 CLL 积分 4-5 分。 试剂与仪器 单克隆抗体包括 CD5、CD10、CD19、CD20、CD22、CD23、CD38 和 FMC7，所 有单克隆抗体及相应的阴性对照均为法国 Immunotech 公司 产品。流式细胞仪为 BeckmanCoulter 公司的 EpicsXL 型， 采用 Expo32ADC 分析软件。 新鲜抽取（6 小时内）的骨髓或外周血置于肝素抗凝管 内，调整细胞数至106/ml，取 100l 经直接免疫荧光标 记法标记，避光保存 15 分钟之后加溶血剂溶解红细胞。流 式细胞术分析时均采用 FSvsSS 一次设门取淋巴细胞群，再 行二次设门取 CD5CD19 双阳性细胞后分析其余抗原表达， CD5-患者二次设门采用 CD23CD19 设门后分析其余抗原表达。 结果判断以白血病细胞表面抗原表达20%幼稚细胞群为阳 性。 细胞遗传学分析 治疗前抽取患者骨髓或外周血，肝素抗凝，调整细胞 数至106/ml，在培养液中分别加入刺激淋巴细胞生长的 有丝分裂刺激剂 PHA/IL2 培养 72 小时，按常规制备染色 体标本,然后采用 R 显带技术进行核型分析4 。每例患者 至少分析 20 个中期细胞，染色体核型描述按人类细胞遗 传学国际命名体制 5 。 统计学分析 采用 2 检验。 结果 各抗原在 CLL 中的表达情况 本组 51 例 CLL 患者中，CD19 和 CD23 阳性率均为%，其 次为 CD5（%） 、CD20（%）和 CD22（%） ，CD38 阳性率%。CD5 和 CD19 共阳性者 46 例。分别有 2 例和 5 例患者表达 CD10 和 FMC7（表 2） 。 CLL 的核型异常分析 在 51 例 CLL 患者中，异常染色体检出率为%（18/51） ， 16 例女性患者中 8 例（%）有核型异常，35 例男性患者中 10 例（%）有核型异常，男女两组核型异常频率的差异无显 著性（p） 。在本组病例中共检出 7 种主要异常核型，其中 12 有 3 例，13q-有 2 例，其他主要异常有 14、6q-、t、t 和 t 等。 18 例伴有染色体异常的患者中 CD5 阳性 16 例，CD10 阳性 1 例，CD19 阳性 17 例，CD20 阳性 15 例，CD22 阳性 11 例，CD23 阳性 15 例，CD38 阳性 3 例，FMC7 阳性 2 例， 各抗原表达与染色体异常无显著性差异（p） 。 讨论 流式细胞术（FCM）白血病免疫分型是利用荧光素标记 的单克隆抗体（McAb）作分子探针，多参数分析白血病细 胞的免疫表型，由此了解被测白血病细胞所属细胞系列及 其分化程度。由于能够快速，多参数，客观地测定细胞抗 原表达，近年 FCM 已成为诊断血液恶性肿瘤不可缺少的重 要检测手段。CLL 是一种低度恶性的淋巴细胞恶性增殖性疾 病，其特点为外周血