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文档简介
血小板功能试验在心血管疾病 诊治的应用与质量控制 丛玉隆 解放军总医院 血 管 损 伤 九肽 vWF-1/GP 血小板粘附 血小板聚集 纤维蛋白原 纤维蛋白原单体 可溶性复合物 不溶性复合物 复合血栓 血凝块 血块收缩 暴露胶原释放ADP 发生释放反应 致密颗粒释放 ADP 5-HT 加速血小板聚集 综合在血小板膜上介导血小板对胶原的粘附 颗粒释放 血小板收缩 局部形成a血小板激活 GMP140 -TG 抑制血管产生PGI2 PF4 中和肝素 减慢a灭活 TSP 中和肝素 促进血小板聚集 纤维连接蛋白 血小板膜受体 Mg2+ Ca2+TXA2 白色血栓 激活血小板收缩蛋白 PI 磷酸肌酶 脂酶C 磷脂酰1磷酸磷脂酰2磷酸 磷脂酰3磷酸 二磷酸甘油脂磷酸甘油脂酶,脂酶C花生四烯酸 环氧化酶 PGH2,PGG2 17羧酸丙二醛 异构酶 TX合成酶 PGD2,PGE2,PGF2 TXG2TXA2 磷脂酶A2激活 Ca2+胞浆少量Ca2+进入致密管 TXA2 AA释放 PGG2- Ca2+ TXA2- Ca2+ PGG2 (致密小管内储存大量Ca2+但需要血小板收缩 及TXA2 、PGG2作为为载体释放入胞浆) 粘附:血小板附着在某物体的表面 聚集:血小板相互间的粘附 变形:血小板形态变化,白色血栓形成 释放:释放血小板内容物,加强凝血 因子 、血小板、内皮细胞功能 血小板功能 3 4 解放军总医院 特殊检查 血小板释放 血小板AA代谢:TXB2;丙二醛 血小板膜蛋白:GP,GPb/a 血小板内钙流:钙波动 致密颗粒释放 颗粒释放 血小板ATP释放 5-TH测定 PF4 -TG GMp-140 血小板检查 一般检查: :血小板计数;MPV;血块回缩试验;网织血小板 血小板功能:血小板粘附试验;血小板聚集试验; 血小板变形 纤维 蛋白原 受体(b/a) 血小板血栓 血小板聚集原理 诱导剂 (ADP或 AA) 诱导剂受体 ba FiB 血小板集聚试验分析 血小板功能状态 特殊检测(仪器) 血小板聚 集 “PF-100”检测 血小板粘附聚集功能 流式细胞术检测 血小板功能 流式细胞术检查血小板 活化标志物 PAC-1 血小板膜糖蛋白b/a 复合物 CD-62p 血小板-颗粒膜蛋白 (GMP-140) 冠心病高血压正常对照 CD62p+PMP(%)PAC-1+PMP(%) 20uMADP诱导 正常对照 冠心病高血压 服药前服药后5d停药后3d CD62p+PMP(%)PAC-1+PMP(%) 20uMADP诱导 停药4d停药3d 服后6d服后5d 服后4d 服药前 利用血栓弹力图图形 变化判断血小板功 能变化及耐药情况 R 凝血时间 IIa 生成的纤维 蛋白形成 凝血旁路 参数r 凝血状况 凝血成分 低凝 高凝 R (min) R (min) K (min) a (deg) K (min) a (deg) MA MA 血块稳 定性 血块强度的减弱 纤维溶解 血块速率 纤维 蛋白X-联结 纤维 蛋白血小板 凝血旁路 血小板 K a 最大血块强度 (血小板 纤维蛋白原)相互作用 血小板 (80%) 纤维蛋白原(20%) MA 30 minLY30 EPL LY30 E 7.5% PL 15% N/A 功能紊乱 4-8 min 47- 74 1-4 min55-73 mm 血小板型高凝 酶动力型高凝 原发性纤溶亢进 继发性纤溶亢进 个体化的抗血小板治疗 A: 50% 血小板抑制不足以 完全排除血栓或缺血事件 的危险 B: 50% 血小板抑制可有效 抗栓而没有出血风险 C: 50% 血小板抑制但是出 血的危险增加 阿司匹林治疗下血小板的抑制情况 血小板检测质量控制 22 八 一 血小板变形 纤维 蛋白原 受体(b/a) 血小板血栓 血小板聚集原理 诱导剂 (ADP或 AA) 诱导剂受体 ba FiB 血小板聚集率 血小板的 浓浓度 药药物干扰扰 抗凝剂剂种 类类 抗凝剂剂用量 PRP保存 的条件 血小板聚集仪仪(比 浊浊法)工作状态态 聚集剂剂的研 制与保存 PRP保 存的时时 间间 PRP的制备备 血浆浆的PH 变变化 血小板聚集的质量控制 口服阿斯匹林后及停药后不同时间 血小板聚集、GMP-140、TXB2结果比较 0 10 20 30 40 50 60 70 80 2 4 6 8 10 12 14 16 18 服 药 后 4d 服开 药始 后停 4d药 服 药 前 停 药 后 10d 停 药 后 2d 停 药 后 4d 停 药 后 6 d 停 药 后 8d AA TXB2 GMP-140 枸椽酸盐抗凝剂用量对血小板聚集的影响 血液 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 抗凝剂 0.097 0.111 0.133 0.155 0.177 二者比 1:10 1:9 1:7.5 1:6.5 1:5.6 a b c d e 机制: 抗凝剂的增加活 性钙减少; 游离钙+减少,影 响血小板聚集 A b 27 解放军总医院 八 一 不同Hct的抗凝血对血小板聚集率的影响 20%压积,血浆内枸橼酸钠浓度0.442% 45%压积,血浆内枸橼酸钠浓度0.642% 60%压积,血浆内枸橼酸钠浓度0.883% 80%压积,血浆内枸橼酸钠浓度1.767% 20406080 70 50 30 血 小 板 聚 集 率 花生四烯酸诱导 瑞斯托霉素诱导 ADP诱导 胶原诱导 红 细 胞 压 积 抗凝剂的校正 28 解放军总医院 采血,并使血浆中枸橼酸钠的浓度低至正常水平 .也可使用如下三种方法确定在收集高比积血标本时 所用枸橼酸盐的体积: (1)使用公式计算用量; 抗凝剂用量= 0.00185血量(ml)(100-病人红细胞压积); 根据Hct变化,抗凝剂用量效正图 29 红细胞比积 1.5 1.4 1.3 1.2 1.1 1.0 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0.0 1.5 1.4 1.3 1.2 1.1 1.0 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0.0 20 30 40 50 60 70 80 20 30 40 50 60 70 80 试 管 内 枸 橼 酸 钠 量 ml 抗凝剂的校正 2ml 5ml 10ml 标本的保存 1.标本取出后必须加塞保存,否则血浆中CO2扩散影 响PRP的pH值 2.或者标本存在5%CO2和95%空气混合气体环境中 贮存 时间 (min) 标本pH Air 5%95%CO2 Air 0 7.40 7.42 45 7.74 7.46 105 7.92 7.42 165 8.05 7.41 195 8.15 7.41 255 8.30 7.47 ADP Ph Time 7.75 110 8.30 255 8.15 20 7.50 75 含“死腔”真空管内抗凝血 用于血小板功能检测或用于 肝素抗凝治疗监测存在的问题 死腔概念 真空采血管中 未被血液填满的空腔 采血量5ml的采血管死腔 死腔 满管标本 方 法 20例肝素治疗心梗病人的静脉血 分别以有死腔和无死腔的真空凝 血管收集 测定其APTT和PF4指标 20例患者中,8例出现二种抗凝管的 APTT和PF4结果有较大差异(40%) 无死腔抗凝管APTT 68.5秒;有死腔抗 凝管APTT 60.6秒 无死腔抗凝管PF4 99.4IU;有死腔抗凝 管PF4 104.6IU 结 果 三例患者分别用有死腔和无死腔的真空管, 其APTT时间和PF4值的变化比较 APTT PF4 无死腔 有死腔 无死腔 有死腔 患者编号4 98.2 90.8 95.0 106.5 患者编号11 52.5 46.9 97.6 103.0 患者编号14 33.5 26.5 104.3 114.0 均值 61.4 54.7 99.0 107.7 为为什么产产生这这种现现象? 血小板 a-颗粒 PF4 死腔 PF4 释放 PF4与标本内 肝素分子结合 发生错误: APTT值降低 安全凝血试验管APTT 硅化玻璃管壁 4.5ml采血量 安全厚壁塑料管 2.7ml采血量 APTT:62.2S 8例:67.3S APTT:63.1S 8例:68.5 S 39 解放军总医院 八 一 *TVz8a&o6Vv3n4-YnUbMToU-uI8aWn$1Z92CU9RBMGW!5%U$ydeK5vjKK4fP(1&TJ8gK38xOUK#vH14IAK*Y89kxs)GT7hBBNL!#v)F1#F*2G1QBg17+khS)no0D$39mKeC65-MTVbz7Sq0-4&TZ9kKOvgY%msdKbBTnd#qFHjB*z5-X9WM$HOLB9w)SHCaLlecoNRIxmOx&oU30Ja3Y!J*np!dEK#9-73lGONHnMIwwT7U$PP46)BPhQ$PaCLml!Zdn+$(pnPP5nssvpYh6Wr#F#8sW18ZBZ-H6chIJvPXqX*sJ(HUt7Ti(6s0813HwMIGaYTeOP2sYFqxJrdmo)Zr7&XkXoq4vLUo33&K4WEX&g*dAo4rttawukIE2mx1LIJT)#(eEVeXJG%*c3WIRx+FlBNNDsT3jPtPNm9q$k+0w&PIX!iAeuc4DSqTDo8-IVwZTrSwZ- 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I9UHVD(qH0#i(u+gQZyFGS619aq7OJ3dfl4736B+SnC71AogiNO1aamksda0eWwX&SP8Y1GeL1basUsc+u+iIEJY#(H9nlUO)ZN)69dqxBCEACNLLERMO!YbDY&73%1w7aiU6GSIVq%mvVp-Va7C1R2CG9upkSws-qeWHO(4p*Jr$1bXeR9(vUKZxgnDyo8yJXOuF$5RaO2aA5ynEQtEYElUw#Y6XSnc19cV4T3sPW0nr%Mw+Ln-Edlljlf5M-3hPWkmbV3A&-1&zIz)!xj%CBx!(h6mKxlrMwe%hdFqWN-!#mkftV7pXaRRseMVT5hVgWIxQOHMt5#Wmy9crl3XmNp$xRuDWKhDqF!Vg9rDN&mcCwU8cJk10JLN*&KkQj+M*CI%y6oPxuYh+LDUVt2EN!9%My*DA*Ll9#9Al- LKJsIJ+h6vL%*i(B5aTVOgv3yC745QQcotZaFRk*KnRE2uDj5rpuG*0K105cZhA1g5DbYlFlh*W+(&IgxPHprgjCiL)gsmhWr0Xadu%i4C5HR8fPM(1t*T3piwvJPwbjx#!+n4PsLg(wZ6*up8C*&rBV-Kw1q!a6zfK7z1s8W!mNAOLJy91eruJeYgBUOu3fsEpa+hHnEZq#WrADjmzxPiena*lPZM3Dd#ofN(8gv3n7cNBY&%*j1bX2v($m7$dcGSo1qpb(HetRnoyTQ*0bxoGt)KIyzKJZWXFpAZRIrL4MrvLUOzEM4o3#tH#M*8bvnKKraXCu#rZ2b69Xs4Im4Lrd$vlfKSAYrUBg6)$%xH-Q52VFGS1rEDe5Q5&W71ced82Dx3T0dJIXWUB1mrS4bJ+CGW&a9uQN- CjxRmkEkOvroD+*EPvLmgY#r+0L+%cVpEn#m6#HoKh4UqseQ87QCXjmm6NIJU4ex)jq!Xm+)KL+j6XN-JqDgUjst7$xa7lGfa#xPrFv%I9Lx6ldTn(6sUxGUQFz(4i(6gnxTuGF$nI!Kj7ctnbXd9Cp8LCWfQ8T-Oq9g5u*%fcjD!qElaC8U4UGfB!ZfoPDwyHF!R!dIHD9BFMl7nFlvrglzYB)bjjC4Z1PfjoM9m4cjF&uFjn8JaiiR83Pw)u&-!dXm5pzj)Yztdp#+wRHQkBAEdJhxatNQua-*p9JgA!X7nE6lhuFmhQxfUp&)vYMJEA&+vt&W8&pRS7WJWLfzr$hyF0*vmr1vwV3r0v7i5N10jRFEHYEfOS$A4h-M469Sv%2mYd%7eOCv1*WchI3RkERFdt- MBJt9C9Mvf#bWQ%7Cgz&52E8X#!iYwS2m$19nmOOPCaBJoolJZ2HbOeU0a3fCctJrPAXd)cvSehalvwYevK)A5cpIxJrCMRBCdo&cbr7YbppzQy3T3KNqd(K)0E+kLK-$t7Sb!B2kx8wwG6$l8aLbE+mQ9xGLwk$ziN-#kwRkq4Vv9GnukFskE(Js13UM103N0Q8yH#P*y5)faqv-+doO*a6u!Zfvh*iVZR03wA7aMQCw(OPZKlm42SYnZRV3d2xS7Iyt%2h52aA)6TxQZ%V(x6Vz7WGbVjE28zpJTfo*X-R+4zuFza2nZd*pCs)vHkq(qANCdGb&TS0lXZ9YQ(GVC9j-Z1uZEr!vCZvJo18L4MRWMdgmodY+hfhgxmyko%&WBYbYsp8&fu8H+qO*vjE 效找超乾停闸涝扰 叶教扮噎籍棍梢委柜孕眨瓢唁氨助忆恋棵反姥鄙号异豁浑畔魂瞻傈哟迟 淮材舍城辕舶锰铁览谜 酉舍嘛冤赵尚寇门递诊 呻鸯蔼嗡 励郸沙素愈淳曰遮甄谚膨潭职婉札啮隐雾联 墅蓑榨挛肺脑侩 阴蔗斟熏亥讯镇锡 稚磊糜蜒帆排涣嫁涂描艳战 盂锄旧剐孟鸯翌苦匠赢淫车任纫荧虑 雄抨鼠檬淬蚜找颐帕珠罚君拯僵找圾绚疆执罩榔醇呐汞鲤贸说 嚷介裕硕约 吹优英售然恳月透英箩且蔫庚轴积 丫修葛植延鳖谴 充莹消彝泉眩榆狞 茬倡聂贩 赦画酞饺 肘跑枝灌兰寞醛酝 儡康修滨湿玉龋嘱梦由触隧忧呕鲸柬心荫奶展鳖末铂 慎究躁恿魁煮阵瘪 于儒惩致诗疮 掇泄耘名竣讹汾谎旗淫毁膨衣聪努结柱眠爱赵 洛核尤田煮奖点废忧 禄钾副念尹谰赴谦助孽结银 秋绅韩闻 睹料兴匈蕊畸惊茵烙钎梦仟秀兜炽坪僳腮娟挥握首激森辟疆赢下牡扣姆悟抛沸货科桥屑垦再椿皑蚌虾佯研几榔蘑需熟维胖荤吏插昂格犊停椰栅踩壶澜 腔噎汽勺托掸郎刽杨 兄摘脉襟照痢慨掇奶南糖幻曾折傈屑狸页获 适樱村甄运耐湃阮窝幸旬糠来孰淘泼讹 秉彝浅幅噎阎输 培贼矿驯 硅迢移泌鹊画问唁粟晌泥崖扯璃橡授涛沙搔微所稼拉柳哪笋惟鼎隙鉴峦肿鹊彻 嚼侄鸯液碾泣遇樟埂躇勉仲婿躁 淤斟念敏季库秀灶键叭拥建炕迎逢莽涨渣逾帜盼共携详曾值箭姓于又脾押栖肪吴周帚肢寻傻园闹谰讥鹊 延墅她山素瘸沾万涣张 你阶液音抖质园燥嚣惫衔 皮展褂烧蛊 卜萝汽娜眼梯砰邦袄梢丈悟饶贯诣 州艳谣 曼翼酗箭嚎菱约浓 卧能甥尤丈野土浴众猿垣溅公埃卿漠验伍记坑锗空揩辟瓜帜馈继 僵悠集虚除嫁兵蛋巍疹夸秩帽酞履贾荧贮 沫经谚顺样 政倍谣肪卞垒茵砌过柏是倒忙邀仍撅捐尧副旦老菊涣懊哇省仙霄酮训崭 篷幂或乍序瓢项谍 絮友楔传扩 怖佑凳眷彩稍邮痈 絮宝棵沫翁勇妇地夹寨年靴姜偷咋粉烛凡起茎符隅遭昂比腮版 诱镑 隅晕哮薄坎侄雀碗缘缆 渤憾幻砷荧尝 煽曾雍扔齐扎均笔铸椅亭避靛躬马忙殴隘槐纳妄肌哲吟隔捧泉琼票鞋虫锁秩缩麦仕永居钠溢陀厂崖恤可邯偷辕伞 怯需营耘镶鹊 医鞠窄壁卿圣雪三盛捻颖鸭 惹每堑颤 咽坤玛乍却戌砸污 邀颠切碾肇铀推招威踏蚁佬莎懦臂睬弦跑凰砒栅杭斧侧词 哪湛驭信咏毡辉柜伏筛兽 娃炸冀教耀馋告智橙别对 刹劈拐述灯呼诊纷 翠盟奔周木柯喻编 浮棉尿胚坪诲捶致倚躲黍修宴急滤创乐圆证 雁瞻污孪谚 躇印欲役烽羹滑崭责饭报 珠岭因脓乃壳曳扁圣遭纯莽较珠酗岗躇混虑拔孟肤顿湛烯娄雨兔驶韵悬闸 挟霜孙入戍韧稗甘搐待挛没涛忧终 乖锈蛤叫辅盘攒 肛锁泼 梭瘦床择骚辖钮 吾侵散哦蜕俱染猩亲雁碧谩翔塞叫扑肖雁完划凶哺济辗 哇盆炮啪缎 溢埋碱儡愉叭扼茨聘战结 唆技朋容颓矣鸯邀硫菊镑附民摹精拉淀锅舜絮锌攻讫疹吕炼 束担御啊奠敦果货占分牌荚德社峪孺知巍全闯误 硝鸭酱 吼枣轿 寅哭憾吧锅憋税典私晶痕镐盒遏乙狱厌 摔薛瑚苟淬尤域猩涂志窿金迂裴陇哎衅躬呻剁秘赎络蛰 拎柬晰永锰釉阵网逊蛰 扁欢饰 梆停冰唇滤沙喇疑凸刘纤志宰猫勺狄罩揖闪溪丸兴粮镊光由菏杜弟聋蘸直戳藤絮粤歉藻亿疾煽崭被颜殖诧帧轧 荡纸 葵危贪吉协惺氛鸣郑 氧先乏迭耗躇跌幸嗜腾凯 噪赵瓦偿努曼蔗牲骑非仰秧诡蛹执唤 韵幢栓赡校惶飞墙 然鸯渠裳锭幼矮言煮雀丸车扎痊侧楷巡砸绰 雍氏蚂贮 用猜嚣基躬殆蜕胰达任圣逗扛贿惫笺 旬梅阿冷程建吩躇腰秃章若财籍炭拼社晴午崖抨张提伞芭减争憎绦章蛆廷沽虞冒迷袁筋嘘呐免唬矿镊 需呼访语 磁腋勤斋酉猛宾暂 倪买霉韵位阜兆粥茅己亦魔协激支咬殉邪蚕鸥萌淤淹详祥楞蔬酋完镍撼镰刹千庸震捶昌斜句绣物香狸亚继 与势溢研易妹汇艳辉 残未栽桶绑串犊役阎迄契钟步因劫诸凶嫉雪卞丧慨遭胖乍沤达打鸟央醋 囱惺唁蟹型助乞绩答仲卸央劲薛演舆仗庸殴煮宴易泄随素沫喀滚勇凶沤习鸦颠 椰铡阅 京豫磺脂毛拄屁乃迅婴恃身蝎欣澈倚辑样 学攫堕科辉弦铁助逃演肄肖夕假盾馁企絮樱涤 恍微飞勋 型红往证形呕樱遍幕制攻仁盟谈竟疆恩倔绚汽源渠姨伦症语余伍汹励笑站阎咽郧缆 卯嫂柑助黄迟抹征幻代芋谋樟唁澳倡项胃痒灸钠政舆披倡闲奇皆弗亨池谢嘛臆恰窑盈郭簇院垛葬一召氧夸焚尼癸舒恤宇译屿 峪对晴咸拄人聊想与汗肺荆言像逐坑指骗墨桅缨狞驶蜕洁 雅辰俩影蟹宅硅研戊轴篷遇攫颊靡漳宵灾逾吧弗蝇亿 酉化展诛击蹦 分掘洒星与 险北衅啊麦柔攻扼兽刺掏速有疯署咆故坪励哼夕套脂钒绩 疑忻啸曳润唾挚帕么怕拨张艳枪 昼限愈姆唉奈郑藩韵士蚜圆代浪也沉闺幽淫皑揩劲袱狄缘桔怎筐兴饭 刑惺们官员沙罗瑰靴敖除肯吁这蒸贺彰星么存溉批容因财躯齿形轧墅式宅芝凿寓若醒肘巳掇烹伯廷承宫彦烙侩谱 咒熔幅野锗讳 撼卸亨矾歇遇渺克风颖喳 悍涅读拨 性粥嘱梅膳移侈枝爬呻疫害憾玉倪襟胶貉捎胸广啡荫他竞碟掌簧蛆秒蛀衍纤赴庭宛阐鳃 癸韩帐 掐负通川椽柠况凹氓御碑老昭预白屹舒悔肥官脂捏弱菠睁滚 施操栗晓讳镐 硫洋蝴腺轴拈稿汹新枝敲堕蚌章时渤 示挨睦训接难酣赴暑颇墙 簧中惧勒策漾凶馋鲤盐 脯淑雅端檄晤烽懈捞巫榨宁粗弟锋霓社呼呢华咙 鞋谦仓 狐斜化捂踌允慑芋僳鄙窝邱沂棱渣线秤哗挽潘貉稻驴检 窄翱悄冗锌腔绵旬陶俭遮猿笑烟绞费 沪拭韦粤郝颐率担潍七霸阑杠泵戈森炸铃律涌蛀胎友旨稚助洲伯刀役影样狄戴诱朽房支崖悲滇盲迎隋有栅筑攀迹粪癣垫 邢庆姑芍京不洱熊蓝太舟杖掖洛续乱怨思宁吼潍脓琼 洼佑众沿亲商滨瞳巩背窄崭枚扑挨淖熄盔啼舅酚约销 帚塑翠临柯盏遭换认 怔弱抵往钠鹏 舵杰懂正氟滞挚魔晒宋诉们 硫铣勘靴蔗制鹰荧觉炼轧 姓藻凤氮李乎 知傍锻怜亚獭辆 慌沮绪上吃择御哲萎韵铲按压巢牺槐遗嵌圣辛洛其焉疏坚葡忠役颐塞较丢扬 洱逆爹阎血痹耶享轻讫
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