第二三四章皮肤结构功能临床表现课件_3

皮肤科检查 第一节真菌检查 采集标本 浅部真菌标本有毛发、皮屑、甲屑、痂 等。深部真菌标本有痰、尿液、粪便、脓液 、口腔或阴道分泌物、血液、脑脊液、各种 穿刺液和活检组织。 标本采集应无菌操作 浅部真菌标本在分离前常先用75%乙醇处理 镜检 v 取标本置玻片上 v 加一滴10%KOH溶液 v 盖上盖玻片，在酒精灯火焰上稍加热溶解角质后 ，轻轻加压盖玻片使标本透明即可镜检。 v 低倍镜检查有无菌丝或孢子，高倍镜证实。 v 明确真菌感染是否存在，不能确定菌种。 变应原检测 变应原检测用于确定过敏性疾病患者 的致敏物，特别是对明确职业性皮肤病的病 因有重要意义，有助于指导预防和治疗。 斑贴试验 【适应证应证 】接触性皮炎、职业职业 性皮炎、手部湿疹、化 妆妆品皮炎。 【方法】根据受试试物的性质质配制成适当浓浓度的浸液、 溶液、软软膏或原物作为试剂为试剂 ，置于4层层1cm1cm的 纱纱布上，贴贴于背部或前臂屈侧侧的健康皮肤，其上用一 稍大的透明玻璃纸纸覆盖，用橡皮膏固定边缘边缘 。 同时时作多个不同试验试验 物时时，每两个之间间距离应应大于 4cm。 同时时必须设须设 阴性对对照。 【结果】24-48小时后观察结果。 受试部位无反应为()， 皮肤出现痒或轻度发红为()， 皮肤出现单纯红斑、瘙痒为(+)， 皮肤出现水肿性红斑、丘疹为()， 皮肤出现显著红肿、伴丘疹或水疱为()。 【临床意义】阳性反应说明患者对受试物过敏，但应 排除原发性刺激或其他因素所致的假阳性反应，假阳 性反应将受试物除去，很快消失，而真正的阳性反应 则除去受试物2448小时内反应一般是增强的。阴性 反应则表示患者对试验物无敏感性 v应注意区分过敏反应及刺激反应。 v阴性反应可能与试剂浓度低、斑试物质与皮肤接触 时间太短、全身或局部应用糖皮质激素等有关。 v不宜在皮肤病急性发作期试验。也不可用高浓度的 原发性刺激物试验。 v受试前2周和受试期间服用糖皮质激素、受试前3天 和受试期间服用抗组胺药物均可出现假阴性 v如果在试验后72小时至1周内局部出现红斑、瘙痒等 表现，应及时到医院检查 点刺试验 【适应证应证 】荨荨麻疹、特应应性皮炎、药药疹等多种与速 发发性超敏反应应相关的过过敏性疾病。 【方法】一般选择选择 前臂屈侧为侧为 受试试部位，局部清洁洁 消毒。消毒后2分钟钟使皮肤血流恢复正常，按说说明书书 滴试试液及点刺，5-10分钟钟后拭去试试液，20-30分钟读钟读 试验结试验结 果。 【结果】皮肤反应强度与组胺相似为（+），较强 为（+），较弱则为（+）或（+）；与生理盐水 相同为（）。 【注意事项】 在基本无临床表现时进行 设阴性及阳性对照组 结果为阴性时，应继续观察3-4天，必要时3-4周重复 试验 有过敏性休克史者禁止 应准备肾上腺素注射液 受试前2天应停用抗组胺药物 妊娠期尽量避免检查 皮内试验 【适应证应证 】用于测试测试 速发发性超敏反应应，特别别是药药物 引起。 性病检查 1）标本采集：用含无菌生理盐水的藻酸钙棉拭子，伸入男性尿道 24cm，轻轻转动取出分泌物；女性先用无菌的脱脂棉擦去阴道内粘液，用 无菌的藻酸钙脱脂棉拭子插入宫颈内12cm处旋转取出分泌物；患结膜炎的 新生儿取结膜分泌物；全身性淋病时可取关节穿刺液；前列腺炎患者经按摩 取前列腺液。 取材时拭子伸入尿道或宫颈口内的深度要足够；男性患者最好在清 晨首次排尿前或排尿后数小时采集标本进行培养 2）直接涂片：主要用于急性感染患者。涂片2张，自然干燥、加热固定后 和革兰染色，油镜下检查。 3）细菌培养：标本立即接种于血琼脂或巧克力琼脂平板上，置于含5%10% 的CO2孵箱，37孵育2448小时后观察结果。挑选可疑菌落作涂片染色镜检， 也可用氧化酶试验或糖发酵试验进一步证实。 涂片时动作要宜轻柔，防止细胞破裂变形，涂片的厚薄与固定及革兰染色时间要合适。 （2）结果：涂片染色镜检可见大量多形核细胞，细胞内外可找 到成双排列、呈肾形的革兰阴性双菌球。在培养皿上可形成圆形、 稍凸、湿润、光滑、透明到灰白色的菌落，直径为0.51.0mm。生 化反应符合淋球菌特性。 （3）临床意义：直接涂片镜检阳性者可初步诊断，但阴性不 能排除诊断；培养阳性可确诊。 衣原体检查 （1）细胞培养法：将每份标本接种于3 个培养瓶（为McCoy单层细胞管）中，置 37吸附2小时后，用维持液洗涤23次，最 后加生长液，37培养34天，经吉姆萨染 色或直接荧光染色后镜检。阳性标本碘染色 包函体呈棕黑色，吉姆萨染色呈棕黑色，吉 姆萨染色呈红色。有尿道炎症状，再加上衣 原体分离培养阳性者可确诊。 v（2）衣原体抗原检测法（clearview chlamydia，简称C-C快 速法）：用商品试剂盒检测，方便、简单、快速，但稳定性略 差。按说明书操作，质控窗和结果窗均显示一条蓝条为阳性结 果，阴性为结果窗无变化。阳性结果结合临床确定沙眼有原体 感染，阴性时不能完全排除，可用细胞培养法确定。 （3）免疫荧光法：采集标本同淋球菌检查。将标本涂于 玻片凹孔或圆圈中，干燥处理后加荧光素标记的抗沙眼衣原体 单克隆抗体，反应、封固后置显微镜下检查。阳性标本在高倍 镜下可见上皮细胞内的原体颗粒，为单一、针尖大小、明亮的 绿色荧光，在油镜下为荧光均匀、边缘光滑的圆盘样结构，也 可见网状体等其他形态的衣原体颗粒。 支原体检查 采集标本同淋球菌检查，也可用10ml中段尿离心 （2000r/min，10min），取沉渣接种于液体培养基 。置5%10% CO2 环境中，37培养2472小时， 每日观察颜色变化。如由黄色变为粉红色，可能有 解脲支原体生长。取0.2ml培养物接种到固体培养基 上，培养48小时后观察，有典型“油煎蛋“状菌落者 为阳性，可诊断支原体感染。 梅毒螺旋体检查 （1）梅毒螺旋体直接检查：可取病灶组织渗出物、淋巴结穿 刺液或组织研磨液，用暗视野显微镜检查，也可经镀银染色、 吉姆萨染色或墨汁负染色后用普通光学显微镜检查，或用直接 免疫荧光检查。 梅毒螺旋体菌体细长，两端尖直，在暗视野显微镜下折光性 强，沿纵轴旋转伴轻度前后运动。镀银染色法呈棕黄色，吉姆 萨染色法呈桃红色，直接免疫荧光检查呈绿色灾光。镜检阳性 结合临床表现、性接触史可确诊。 梅毒螺旋体检查 （2）快速血浆反应素环状卡片试验（rapid plasma regain test, RPR） 1）原理：为非梅毒螺旋体抗原血清试验。人体感染梅毒螺旋一定时间后 ，血清中产生一定数量的心磷脂抗体，可用免疫学方法检测，作为梅毒的诊断 筛选试验。 2）操作方法：卡片定性试验：取50l待检血清加入卡片的圆圈内并涂 匀，用专用滴管加入摇匀的抗原1滴，将卡片旋转8分钟后立即观察结果，出现 黑色凝聚颗粒和絮片为阳性；卡片定量试验：用等量盐水在小试管内作6个 稀释度，即1：1、1：2、1：4、1：8、1：16、1：32，每个稀释度取50l血 清加入玻片圆圈中，按定性法测定。 类似方法还有性病研究实验室试验（ VDRL）、不加热血清反应素试验（ USR）等。 梅毒螺旋体检查 3）临床意义：本试验敏感性高而特异性低。结果为阳性时， 临床表现符合梅毒，可初步诊断。 定量试验是观察疗效、判断复发再感染的手段。 假阴性常见于一期梅毒硬下疳出现后的23周内、感染梅毒 立即治疗、晚期梅毒或二期梅毒的“前带现象”。 假阳性常见于自身免疫性疾病、麻风、海洛因成瘾者、少数 孕妇及老人。 梅毒螺旋体检查 （3）梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA） 1）原理：为梅毒螺旋体抗原血清试验。将从感染家兔睾 丸中提取的梅毒螺旋体纯化，并以超声粉碎后作为抗原，以明 胶颗粒为载体。 2）临床意义：阳性结果可明确诊断。类似方法有梅毒螺 旋体血凝试验（ TPHA）、荧光螺旋体抗体吸收试验（FTA- ABS），后者特异性更高，因抗原制备复杂，已很少采用。 梅毒螺旋体抗原血清试验常呈持久阳性，不可用于观察、 判断疗效。 杜克雷嗜血杆菌检查 （1）直接涂片：在开放的溃疡中不易查到细菌，所以最好从淋巴 结潜行穿刺取材，一次推涂成片，以保持细菌的特征性排列方式。革 兰染色可见呈鱼群状排列的杜克雷嗜血杆菌，阳性即可作出初步诊断 ，但容易出现假阴性或假阳性，特异性和敏感性可能都低于50%。 （2）细菌培养：用含血清和低浓度万古霉素的选择培养基培养 2448小时后观察，菌落直径12mm，色灰黄、凸起、粗糙并能在培 养基上推动，取菌落镜检或做生化反应可确诊，还可做药敏试验。 （3）其他方法：单克隆抗体进行免疫荧光快速检测的阳性率可 达93%；DNA探针检测的特异性和敏感性均较高