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文档简介
嗜酸性粒细胞计数 P36 临床检验基础教研室 程杨艳 嗜酸粒细胞起源于骨髓多能造血干细 胞,为髓系干细胞分化而来的嗜酸粒 细胞祖细胞(CFU-EO)所产生。 功能: (1)微弱的吞噬作用,基本无杀菌力 ; (2)主要作用是限制过敏反应的作用 : 抑制嗜碱性粒细胞和肥大细胞; 吞噬其释放颗粒; 分泌组胺酶破坏组胺; (3)参与蠕虫的免疫反应。 嗜酸性粒细胞的趋化因子其来源 从嗜碱性粒细胞和肥大细胞来源的组胺 ; 从补体来的C3aC5a; 从致敏淋巴细胞来的嗜酸性粒细胞的趋 化因子; 从寄生虫来的嗜酸性粒细胞的趋化因子 ; 某些细菌来的嗜酸性粒细胞的趋化因子 ; 从肿瘤来的嗜酸性粒细胞的趋化因子。 趋化因子E 嗜酸性粒细胞绝对数=WBCE% 其中E%(嗜酸性粒细胞分类的比值 )不准,进推算的绝对值误差较大 ; 故为达到准确计数嗜酸性粒细胞的目 的,须做嗜酸性粒细胞直接计数。 原理 用嗜酸粒细胞稀释液将血液稀 释一定倍数,同时使红细胞和大部 分其他白细胞被破坏,并将嗜酸粒 细胞着色,充入计数板,低倍镜下 计数2个计数池共10个大方格内的 嗜酸粒细胞数,经换算求得每升血 液中的嗜酸粒细胞数。 器材 采血针、干棉球、75%酒精棉 球 试管、吸量管 计数板、显微镜 试剂 特点: 为低渗溶液,可使红、白细胞溶解 破裂; 含对E的保护剂,如乙醇、乙二醇、 丙酮; 并使E颗粒染色而被识别。 下列试剂任选一种: 1.伊红-丙酮稀释液 2.溴甲酚紫稀释液 3.Hinkelman稀释液 4.乙醇-伊红稀释液 5.皂素-甘油稀释液 6.固绿稀释液 操作 0.38ml稀释液20l血混匀RBC 溶解后混匀充池(2个)静置 2-5min镜下计数10个大方格E的数 目。 计算 E/L=10大方格E的数20106 =0.02N109/L 参考值 0.05-0.5109/L 注意事项 1.本实验必须在1h内完成,否则细胞 被破坏,结果偏低; 2.及时混匀,不能过分振荡,以免细 胞破坏; 3.统一采血时间,以免受生理变化; 4.注意与N区别,以免结果偏高; (N着色浅,颗粒小) 5.含乙醇、丙酮等保护剂会挥发,应 注意其变化; 6.溴甲酚紫在酸性或中性时为橙黄色 ,在碱性显蓝,故器具要防酸。 方法学评价 1显微镜计数法 所需设备简单,简便易行; 求得的嗜酸粒细胞绝对值,比用白 细胞总数和分类计数间接推算出的 来的准确。 但重复性差,精确性不如血液分析 仪法。 所采用的稀释液多种,其优缺点见 表2-47 2血液分析仪法 五分类血液分析仪是目前最有效 的嗜酸粒细胞计数的筛检方法, 分 析速度快,准确性较高。 但仪器昂贵;当仪器提示嗜酸粒 细胞增多伴直方图或散点图异常时 ,应采用显微镜直接计数法复检。 临床意义 生理变化 肾上腺皮质激素的作用: 阻止骨髓释放E; 使血中E到组织中去。 1)劳动、寒冷、饥饿、各精神刺激等 交感神经兴奋ACTH肾上腺 皮质激素 E。 2)年龄: 5岁以下 (0-0.8)109/L 5-15岁 (0-0.5)109/L 3)日间变化: 上午波动大,下午较恒定。 与糖皮质激素脉冲式分泌有 关。 2.病理变化 1)增高:轻度 (0.5-1.5) 109/L 中度 (1.5-5)109/L 重度 5109/L 见于: 寄生虫病:可达10%或更多。 变态反应性疾病:支气管哮喘、药 物过敏反应、荨麻疹。 某些皮肤病:如湿疹、银屑病等。 血液病:如慢性粒细胞白血病、真 性红细胞增多症、多发性骨髓瘤、 脾切除术后等;嗜酸性粒细胞白血 病;霍奇金病。 某些恶性肿瘤:如肺癌伴嗜酸性粒 细胞增高。 某些传染病:感染期嗜酸性粒细胞 常减低,猩红热急性期嗜酸性粒细 胞增高。恢复期暂时性增高。 2)减少: 长期使用肾上腺皮质激素; 急性传染病早期:如伤寒、副伤寒 ; 大手术、烧伤。 3)其他临床应用 (1)观察急性传染病的预后 (2)观察手术和烧伤患者的预后 (3)测定肾上腺皮质功能和垂体前叶 功能: 促肾上腺皮质激素(ACTH)使肾上腺 皮质产生肾上腺皮质激素,造成嗜 酸性粒细胞减低。 直接刺激肾上腺皮质:嗜酸性粒细胞 直接计数后,随即肌注或静脉滴注 ACTH 25mg。 间接刺激肾上腺皮质:注射0.1%肾上 腺素0.5ml,刺激垂体前叶分泌ACTH 。 结果判断: 正常情况:比注射前应减低50%以上。 肾上腺皮质功能正常,而垂体前叶功能 不良者:则直接刺激时减低50%以上,间 接刺激时不减低或减低很少。 垂体功能亢进:直接和间接刺激均可减 低80%l00%。 垂体前叶功能正常,而肾上腺皮质功能 不良者:直接和间接刺激减低均不到50% 。艾迪生(Addison)病,平均仅减低4%。 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