本科第04章消毒与灭菌

第第3 3章章 消毒灭菌消毒灭菌 教学要求教学要求 n n 1 1、掌握掌握消毒、灭菌、防腐和无菌的基本概消毒、灭菌、防腐和无菌的基本概 念。高压蒸气灭菌的机理、应用范围及注念。高压蒸气灭菌的机理、应用范围及注 意点。紫外线杀菌法、滤过除菌法机理、意点。紫外线杀菌法、滤过除菌法机理、 应用范围及注意点。应用范围及注意点。 n n 2 2、理解理解其它热力灭菌的种类、原理及应用其它热力灭菌的种类、原理及应用 范围。范围。 n n 3 3、了解了解常用化学消毒剂的的种类、杀菌机常用化学消毒剂的的种类、杀菌机 理及应用。影响消毒灭菌效果的因素。理及应用。影响消毒灭菌效果的因素。 消毒灭菌常用术语消毒灭菌常用术语 灭菌灭菌（sterilizationsterilization）：杀灭物体上杀灭物体上所有所有微生物微生物 消毒消毒（disinfectiondisinfection）：杀死物体上杀死物体上病原病原微生物微生物 防腐（防腐（antisepsisantisepsis）：防止或抑制细菌生长繁殖防止或抑制细菌生长繁殖 清洁（清洁（cleaningcleaning）：除尘埃和污秽减少微生物数量除尘埃和污秽减少微生物数量 无菌（无菌（asepsisasepsis）：无无活菌活菌 ，灭菌的结果。，灭菌的结果。 无菌操作无菌操作: :防止细菌进入人体或其它物品的操作技术防止细菌进入人体或其它物品的操作技术 第一节第一节 物理消毒灭菌法物理消毒灭菌法 一、一、热力灭菌法热力灭菌法 最常用最常用 （一）原理（一）原理 蛋白质变性；蛋白质变性；核酸断裂核酸断裂 （二）（二）干热灭菌法干热灭菌法 1.1.焚烧：焚烧：病理性废弃物或动物尸体病理性废弃物或动物尸体 第一节第一节 物理消毒灭菌法物理消毒灭菌法 一、热力灭菌法一、热力灭菌法 （二）（二）干热灭菌法干热灭菌法 2.2.烧灼：烧灼：接种环、试管口接种环、试管口 3.3.干烤：干烤：干烤箱干烤箱，160-170160-170，2h2h 耐高温、不蒸发的物品。耐高温、不蒸发的物品。 玻璃、瓷器玻璃、瓷器 4. 4.红外线：红外线：电磁波、在表面好电磁波、在表面好 所需温度和时间同干烤箱所需温度和时间同干烤箱 医疗器械和食具医疗器械和食具 烤箱烤箱 烧灼 第一节第一节 物理消毒灭菌法物理消毒灭菌法 一、一、热力灭菌法热力灭菌法 （三）湿热灭菌法（三）湿热灭菌法 最常用最常用 在同一温度下在同一温度下，湿热湿热比干热比干热效力大效力大 （1 1）菌体蛋白易凝固变性）菌体蛋白易凝固变性 （2 2）穿透力大）穿透力大 （3 3）蒸汽有潜热。）蒸汽有潜热。 第一节第一节 物理消毒灭菌法物理消毒灭菌法 一、一、热力灭菌法热力灭菌法 （三）湿热灭菌法（三）湿热灭菌法 1.1.巴氏消毒法巴氏消毒法：61.1-62.861.1-62.8，30min30min；71.7 71.7 ，1515 -30s-30s。牛乳、酒类等。牛乳、酒类等液体低温杀灭液体低温杀灭病菌。病菌。 2.2.煮沸法：煮沸法：1005min1005min（繁殖体）（繁殖体）2h2h（芽孢）。（芽孢）。 食具、刀剪、注射器。加食具、刀剪、注射器。加NaHCO3NaHCO3提沸点到提沸点到105105 3.3.流动蒸汽消毒法：流动蒸汽消毒法：蒸汽蒸汽100 15-30min100 15-30min（繁殖（繁殖 体），类似蒸笼。体），类似蒸笼。 第一节第一节 物理消毒灭菌法物理消毒灭菌法 一、一、热力灭菌法热力灭菌法 （三）湿热灭菌法（三）湿热灭菌法 4. 4.间歇蒸汽灭菌法：间歇蒸汽灭菌法：反复多次加热灭菌。反复多次加热灭菌。 不耐高热的含糖，牛奶等的培养基。不耐高热的含糖，牛奶等的培养基。 5. 5.高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌法 （1 1）最常用，最好最常用，最好 （2 2）103.4kPa103.4kPa，121.3 121.3 ，15-20min15-20min，杀，杀 所有微生物所有微生物 （3 3）常用于耐高温、耐湿物品）常用于耐高温、耐湿物品 一般培养基、生理盐水、手术敷料等一般培养基、生理盐水、手术敷料等 。 高压蒸汽灭菌器高压蒸汽灭菌器 第一节第一节 物理消毒灭菌法物理消毒灭菌法 二、辐射杀菌法二、辐射杀菌法 1.1.紫外线杀菌紫外线杀菌 （1 1）波长：）波长：240-300nm240-300nm杀菌，杀菌，265-266nm265-266nm最强最强 （2 2）杀菌机制：）杀菌机制：DNADNA中形成胸腺嘧啶二聚体，中形成胸腺嘧啶二聚体， 干扰干扰DNADNA的复制与转录。的复制与转录。 （3 3）杀菌作用特点）杀菌作用特点 穿透力弱穿透力弱，用于空气及物品表面的消毒，用于空气及物品表面的消毒 只杀繁殖体，不能杀芽孢只杀繁殖体，不能杀芽孢 对人皮肤、眼睛对人皮肤、眼睛有损伤有损伤，注意防护。，注意防护。 （4 4）适用范围：）适用范围：手术室、传染病房、无菌实验室的手术室、传染病房、无菌实验室的 空气消毒，或不耐热物品的表面消毒空气消毒，或不耐热物品的表面消毒 第一节第一节 物理消毒灭菌法物理消毒灭菌法 二、辐射杀菌法二、辐射杀菌法 2. 2.电离辐射（电离辐射（射线、射线、射线）射线） 用途：干扰用途：干扰DNADNA合成，合成， 大量的一次性医用塑料制品大量的一次性医用塑料制品 食品、药品、生物制品，不破坏营养。食品、药品、生物制品，不破坏营养。 3 3. .微波微波 用途：产生热效应。用途：产生热效应。 非金属器械、食品、食具、检验室用品、非金属器械、食品、食具、检验室用品、 药杯等。药杯等。 第一节第一节 物理消毒灭菌法物理消毒灭菌法 三、滤过除菌法三、滤过除菌法 1.1.用物理阻留的方法用物理阻留的方法 除去除去 液体或空气中的液体或空气中的 细菌，达到无菌。细菌，达到无菌。 2.2.细菌不能过孔径，可除去，不能除去病毒细菌不能过孔径，可除去，不能除去病毒 。 3.3.用于用于不耐高温的血清、毒素、抗生素除菌不耐高温的血清、毒素、抗生素除菌 4.4.液体除菌用液体除菌用滤菌器滤菌器，空气除菌用，空气除菌用生物洁净生物洁净 技术技术。 滤菌器和层流室（生物洁净室）滤菌器和层流室（生物洁净室） 第一节第一节 物理消毒灭菌法物理消毒灭菌法 四、干燥与低温抑菌法四、干燥与低温抑菌法 1. 1.干燥：干燥：水分逸出水分逸出 生命停止。保存食物。生命停止。保存食物。 2. 2.低温：低温：代谢减慢代谢减慢 影响生长。保存菌种。影响生长。保存菌种。 3. 3.冷冻真空干燥法：冷冻真空干燥法：保存菌种最好保存菌种最好 保存数年保存数年- - -数十年。数十年。 第二节第二节 化学化学消毒灭菌法消毒灭菌法 一、原理一、原理 1.1.蛋白质变性或凝固蛋白质变性或凝固 2.2.干扰酶系统和代谢干扰酶系统和代谢 3.3.损伤细胞膜损伤细胞膜 第二节第二节 化学化学消毒灭菌法消毒灭菌法 二、种类二、种类 （一）（一）高效消毒剂高效消毒剂：杀死芽孢：杀死芽孢 1 1. .含氯消毒剂含氯消毒剂；2 2. .过氧化物消毒剂过氧化物消毒剂； 3 3. .醛类消毒剂醛类消毒剂；4 4. .环氧乙烷环氧乙烷 （二）（二）中效消毒剂中效消毒剂 1 1. .含碘消毒剂含碘消毒剂；2 2. .醇类消毒剂醇类消毒剂 （三）（三）低效消毒剂低效消毒剂 1 1. .季铵盐类季铵盐类；2 2. .氯已定氯已定；3 3. .高锰酸钾高锰酸钾 次氯酸钠次氯酸钠 三氯异氰尿酸 过氧化氢消毒液 二氧化氯 戊二醛消毒液 甲醛溶液 环氧乙烷灭菌箱 第三节第三节 消毒灭菌的运用消毒灭菌的运用 一一、医疗器械物品的消毒灭菌医疗器械物品的消毒灭菌 （一）（一）高危器械物品高危器械物品 需进入无菌组织需进入无菌组织 应该应该灭菌灭菌。 （二）（二）中危器械物品中危器械物品 不进入无菌组织不进入无菌组织 但接触黏膜。但接触黏膜。消毒消毒即可。即可。 （三）（三）低危器械物品低危器械物品 只接触未损伤皮肤只接触未损伤皮肤 不进入无菌组织和不接触黏膜。不进入无菌组织和不接触黏膜。 用后清洗、消毒即可。用后清洗、消毒即可。 （四）（四）快速周转的医疗器械快速周转的医疗器械 牙钻、牙科手术器械等牙钻、牙科手术器械等 用瞬时灭菌、微波灭菌、高效消毒剂用瞬时灭菌、微波灭菌、高效消毒剂 第三节第三节 消毒灭菌的运用消毒灭菌的运用 二二、室内空气消毒灭菌室内空气消毒灭菌 1 1. .物理消毒法物理消毒法：紫外线照射紫外线照射最常用最常用； 滤过除菌滤过除菌：空气通过孔径小于空气通过孔径小于0.2 0.2 mm的高效过的高效过 滤装置除去细菌和带菌尘埃。滤装置除去细菌和带菌尘埃。 2 2化学消毒法化学消毒法：化学消毒剂喷雾和熏蒸化学消毒剂喷雾和熏蒸： 过氧乙酸过氧乙酸；过氧化氢过氧化氢；二氧化氯溶液二氧化氯溶液喷洒喷洒 ；中草药点燃烟熏。中草药点燃烟熏。 三三、手和皮肤的消毒手和皮肤的消毒 手上有手上有暂住菌暂住菌和和常驻菌常驻菌 用肥皂和流动水经常并正确洗手用肥皂和流动水经常并正确洗手 病原微生物污染时应用消毒剂消毒。病原微生物污染时应用消毒剂消毒。 第三节第三节 消毒灭菌的运用消毒灭菌的运用 （四）（四）黏膜黏膜的消毒的消毒 口腔口腔- -过氧化氢过氧化氢 （五）病人排泄物与分泌物的消毒灭菌（五）病人排泄物与分泌物的消毒灭菌 粪、尿、痰、脓液粪、尿、痰、脓液-次氯酸钠、漂白粉次氯酸钠、漂白粉 （六）病人污染物品的消毒（六）病人污染物品的消毒 煮沸，化学消毒剂擦洗、喷洒等煮沸，化学消毒剂擦洗、喷洒等 （七）饮水的消毒（七）饮水的消毒 自来水自来水-氯气，少量饮用水氯气，少量饮用水漂白粉漂白粉 （八）环境的消毒（八）环境的消毒 病人住过的房间、地面病人住过的房间、地面-过氧乙酸、含氯消毒液过氧乙酸、含氯消毒液 厕所、阴沟厕所、阴沟生石灰（有效成分是氢氧化钠）生石灰（有效成分是氢氧化钠） 第四节第四节 影响消毒灭菌效果的因素影响消毒灭菌效果的因素 一一、微生物的种类微生物的种类 二二、微生物的物理状态微生物的物理状态 三三、微生物的数量微生物的数量 四四、消毒剂性质、浓度与作用时间消毒剂性质、浓度与作用时间 五五、温度温度 六六、酸碱度酸碱度 七七、有机物有机物 第五节第五节 病原微生物实验室生物安全病原微生物实验室生物安全 一、病原微生物的分类一、病原微生物的分类 根据传染性和危害分四类：根据传染性和危害分四类： 其中一类和二类病原微生物统称为其中一类和二类病原微生物统称为高致病性高致病性 病原微生物病原微生物。 二、病原微生物实验室的分级二、病原微生物实验室的分级 根据实验室对病原微生物的根据实验室对病原微生物的生物安全防护水生物安全防护水 平（平（BSLBSL）及实验室生物安全国家标准，实及实验室生物安全国家标准，实 验室分一、二、三、四级。验室分一、二、三、四级。三、四级实验三、四级实验 室从事高致病性病原微生物实验活动。室从事高致病性病原微生物实验活动。 1.杀灭芽胞最常用和最有效的方法是：_。 a.紫外线照射 b.煮沸5min c.巴氏消毒法 d.流通蒸气灭菌法 e.高压蒸气灭菌法 2.灭菌方法错误的是_。 a.手术室空气-紫外线 b.排泄物-漂白粉 c.饮水-氯气 d.含血清培养基-高压蒸气灭菌 e.温度计-75%酒精 3.下述不可能杀灭细菌芽胞的方法是： _。 a.煮沸法 b.巴氏消毒法 c.间歇灭菌法 d.干热灭菌法 e.高压蒸气灭菌法 4.关于紫外线，说法错误的是_。 a.其杀菌作用与波长有关 b.可损坏细菌的DNA构型 c.265-266nm杀菌作用最强 d.其穿透力弱，故对人体无损害 e.紫外线适用空气和物体表面的消毒 5.常用于空气或物体表面的消毒_。 a.高压蒸气灭菌法 b.紫外线照射法 c.滤过除菌法 d.巴氏消毒法 e.干烤法 6.常用于基础培养基灭菌_。 a.高压蒸气灭菌法 b.紫外线照射法 c.滤过除菌法 d