（药剂学专业论文）三七总皂苷鼻腔用粉雾剂的研制.pdf

摘要 a b s t r a c t 1 j l 一 日u 舌 第一章三七 1 材料 2 方法 2 1 2 2 3 讨论 第二章三七 1 材料 2 方法 2 1 2 2 2 3 2 4 3 讨论 第三章三七总皂苷鼻腔用粉雾剂的药动学和药效学研究4 0 1 材料和仪器4 0 2 方法和结果4 0 2 1 三七总皂苷鼻腔用粉雾剂的制备4 0 2 2 粉雾剂的药动学研究4 1 2 3 粉雾剂的药效学研究4 7 3 讨论和小结5 2 第四章三七总皂苷鼻腔用粉雾剂的质量标准和稳定性研究5 4 l 材料和仪器5 4 2 方法和结果5 4 2 1质量标准的初步研究5 4 全 参 致 在 复日大学硕上研究生学位论文 三七总皂苷鼻腔用粉雾剂的研制 摘要 本文对三七总皂苷( s a p o n i n so fp a n a xn o t o g i n s e n g ，p n s ) 的鼻腔用粉雾剂进 行了研究，主要内容包括：( 1 ) p n s 中主要有效成分人参皂苷r b l 和r g l 的体内 外样品分析方法的建立；( 2 ) 粉雾剂制备工艺的考察和较优处方的筛选；( 3 ) 考察 粉雾剂在大鼠和家兔体内的药动学过程，以及对大鼠急性缺血性心肌梗塞和沙鼠 脑缺血再灌注的保护作用；( 4 ) 初步建立粉雾剂的质量标准，并考察粉雾剂的稳 定性。 我们采用h p l c u v 法，建立了p n s 中含量最高的活性单体人参皂苷 r b l ( r b o ；乖n 人参皂苷r g f f r 9 1 ) 的测定方法，结果在0 2 5 0 1 t g m l 浓度范围内，r b l 和r g l 的浓度与峰面积线性关系良好，相关系数均为o 9 9 9 9 ，天内和天间精密度 均小于2 ，并按照该方法测定粉雾剂中r b l 和r g l 的含量，回收率均在 9 5 - 1 0 5 之间；采用固相小柱提取法处理血清样品，h p l c u v 法测定样品中 r b l 和r g l 的含量，结果r b 和r g l 在1 5 1 5 0 p g m l 范围内浓度与峰面积线性关 系良好，相关系数分别为0 9 9 9 7 和0 9 9 9 6 ，r b l 和r g l 的方法回收率均在 9 0 - - , 1 0 5 之间，r b l 和r g l 的天内和天间精密度均小于1 0 。因此本文所建立 的体内外样品分析方法符合要求。 为了减小粉雾剂对鼻黏膜的刺激性和延长其在黏膜的停留时间，我们在粉雾 剂中加入了可吸收水但不溶于水的载体材料一微晶纤维素( m i c r o c r y s t a l l i n ec e l l u 1 0 s e ，m c c ) 矛f l 吸收水形成凝胶的生物粘附性聚合物一中等粘度羟丙基纤维素 ( m o d e r a t ev i s c o s i t yh y d r o x y p r o p y lc e l l u l o s e ，h h p c ) ，并采用了以下方法制备粉雾 剂：p n s 与相应量m c c 的混悬液经行星式研磨仪研磨( 2 0 0 r p m ，1 5 m i n ，重复1 次) 后，置于7 0 低温冰箱中预冻2 h ，在0 0 7 m b a r 真空条件下继续冷冻干燥2 4 h ， 得冻干粉过筛后与h h p c 混合，即得粉雾剂。根据单因素考察结果，以h h p c 和p n s 百分含量( h h p c 和p n s ) 为因素，r b ll h 和1 2 h 累积释放度( r b lf l h 和r b f 1 2 h ) 、r g ll h 和1 2 h 累积释放度( r g lf l h 、r g lf 1 2 h ) 及生物粘 附强度为效应，进行星点设计效应面优化，筛选较优处方。结果，当p n s 、m c c 和h h p c 的比例分别为3 1 、6 0 和9 时，各效应值较理想，r b ll h 、1 2 h 和 r g ll h 、1 2 h 的累积释放度分别为6 8 2 、5 3 2 5 和8 3 4 7 、9 5 0 9 ，生物粘附 强度为7 8 m i n ，蟾蜍上腭黏膜纤毛持续运动时间为生理盐水组的9 4 8 4 ，几乎 没有纤毛毒性，而且粉雾剂高、低剂量组( 4 0 m g 和1 6 m g ) 对家兔鼻黏膜上皮细 胞几乎没有影响。 粉雾剂分别以混悬液的形式大鼠鼻腔给药和以粉末形式家兔鼻腔喷雾给药。 结果，大鼠鼻腔给药后，粉雾剂中主要有效成分r g l 的绝对生物利用度为 复旦人学硕士研究生学位论文三七总皂苷鼻腔用粉雾剂的研制 1 0 3 5 6 ，符合双室模型；家兔鼻腔给药后，粉雾剂中主要有效成分r b l 和r g l 的绝对生物利用度分别为8 0 1 5 和1 0 0 5 8 ，均符合双室模型。为了考察粉雾 剂对心脑血管疾病的保护作用，我们通过结扎大鼠的左冠状动脉建立急性缺血性 心肌梗塞模型，夹闭沙鼠双侧颈总动脉建立脑缺血再灌注模型，结果粉雾剂对大 鼠急性缺血性心肌梗塞及沙鼠脑缺血再灌注所引起的脑水肿和卒中症状均具有 明显的缓解作用，且呈剂量依赖性，剂量越高，保护作用越强。 在本文中我们初步建立了粉雾剂的质量标准，包括薄层色谱法鉴定粉雾剂中 的主要有效成分i 1 、r g l 和三七皂苷r l ，紫外可见分光光度法测定粉雾剂中 p n s 的百分含量，h p l c 法测定粉雾剂中的主要有效成分r b l 和r g l 的含量。结 果，粉雾剂供试品溶液在相应位置上与对照品溶液显相同颜色的斑点；粉雾剂供 试品溶液显色后，在5 6 0 n m 处有最大吸收；粉雾剂样品经处理后，h p l c 进样测 定，i l 和i 沁l 的加样回收率均在9 5 1 0 5 之间，天内和天间精密度均小于5 。 影响因素试验结果表明，粉雾剂中r b l 的含量在高温和高湿条件下放置5 天后显 著降低，r g l 的含量在高温、高湿和强光照射条件下放置5 天后均显著降低；在 高温、高湿和强光照射条件下放置5 天后，p n s 百分含量即显著降低；在薄层色 谱中，粉雾剂均在相应位置上与对照品显相同颜色的斑点。加速试验结果表明， 粉雾剂在4 0 和r h 7 5 条件下放置3 个月后，其中r b i 和r g l 的含量、p n s 百 分含量和薄层色谱均无明显变化，6 个月试验在进行中。长期试验结果表明，粉 雾剂在室温下放置3 个月后，其中i 妯l 和r g l 的含量、p n s 百分含量和薄层色谱 均无明显变化，6 、9 、1 2 、1 8 、2 4 和3 6 个月试验在进行中。 从以上结果可以初步推测本文所研制的粉雾剂较好地达到了课题的预期目 标，既大幅度提高了p n s 的生物利用度，又显著降低了p n s 的鼻黏膜刺激性， 稳定性试验结果也初步证明了粉雾剂具有较好的稳定性。 关键词：三七总皂苷；人参皂苷r b l ；人参皂苷r g l ；三七皂苷r l ；微晶纤 维素；中等粘度羟丙基纤维素；鼻腔用粉雾剂；研磨；冷冻干燥；星点设计效 应面优化法；纤毛毒性；药动学；生物利用度；药效学；急性缺血性心肌梗塞模 型；脑缺血再灌注模型；质量标准；稳定性 中图分类号：r 9 4 3 ；r 9 6 9 2 复旦大学硕， ：研究生学位论文三七总 a b s t r a c t i np r e s e n ts t u d i e s ，w ei n v e s t i g a t e di n t r a n a s a l p o w d e r so f n o t o g i n s e n g ( p n s ) t h ec o n t e n t sm a i n l yw e r e ；( 1 ) e s t a b l i s m e t h o df o rg i n s e n o s i d er b l ( r b 0a n dr g l ( r 9 1 ) ，t h em a i na c t i v e i ni nv i t r oa n di nv i v os a m p l e s ；( 2 ) i n v e s t i g a t i o no ft h ep r e p a r a t i o nt e c h n i q u ea n d s c r e e n i n go p t i m i z e df o r m u l a t i o n so fp n si n t r a n a s a lp o w d e r s ；( 3 ) p h a r m a c o k i n e t i c s t u d yo ft h ep o w d e r si nr a t sa n dr a b b i t sa n de v a l u a t i o no fi t sp r o t e c t i v ee f f e c t sa g a i n s t a c u t em y o c a r d i a li n f a r c t i o ni nr a t sa n dc e r e b r a li s c h e m i a - r e p e r f u s i o ni ng e r b i l s ；( 4 ) e s t a b l i s h m e n to fq u a l i t ys t a n d a r da n ds t a b i l i t yi n v e s t i g a t i o no ft h ep o w d e r s h p l c u vm e t h o dw a su s e dt oa n a l y z er b la n dr g lc o n t e n ti n i nv i t r os a m p l e s a s ar e s u l t ，f r o m0 2 9 9 m lt o 5 0 p , g m l l i n e a r r e l a t i o n s h i p w a sg o o db e t w e e n c o n c e n t r a t i o no fr b la n dr g la n dt h e i rp e a ka r e aa n dc o e f f i c i e n tw a sb o t ho 9 9 9 9 b o t ho fw i t h i n - d a ya n db e t w e e n - d a yp r e c i s i o nw e r el e s st h a n2 f o rr b la n dr 9 1 r e c o v e r i t yo fr b la n dr g lf r o mp n sp o w d e r s ，a n a l y z e db yt h em e t h o d ，w a si nt h e r a n g eo f9 5 t o10 5 s e r u ms a m p l e sw e r ep r e t r e a t e dw i t hs o l i dp h a s ee x t r a c t i o n c a r t r i d g e sa n da n a l y z e db yh p l c r e s u l t si n d i c a t e dt h a ti nt h er a n g eo f1 5 9 9 m lt o 15 0 9 9 m lt h el i n e a rr e l a t i o n s h i pw a sg o o da n dc o e f f i c i e n tw a s0 9 9 9 7a n d0 9 9 9 6 ， r e s p e c t i v e l y m e t h o dr e c o v e r i t yo fr b la n dr g lw a sb o t hi nt h er a n g eo f9 0 t o10 5 e i t h e ro fw i t h i n - d a yo rb e t w e e n d a yp r e c i s i o nw a sl e s st h a n10 f o rr b la n dr 9 1 t h e r e f o r et h ea n a l y t i c a lm e t h o d sm e tt h er e q u i r e m e n tt oi nv i t r oa n di nv i v os a m p l e s i no r d e rt od e c r e a s et h ep o w d e r s i r r i t a t i o na tn a s a lc i l i aa n dp r o l o n gi t sr e t e n t i o n t i m eo nn a s a lm u c o s a ，m i c r o c r y s t a l l i n ec e l l u l o s e ( m c c ) ，i n s o l u b l em a t e r i a l ，t h a t c o u l da b s o r b e dw a t e rb u t n o td i s s o l v ea n dm o d e r a t ev i s c o s i t yh y d r o x y p r o p y lc e l l u l o s e ( h h p c ) ，b i o a d h e s i v em a t e r i a l ，t h a tc o u l dd i s s o l v ei nw a t e ra n df o r mag e lw e r e a d d e di nt h ep o w d e r s a n dw ep r e p a r e dt h ep o w d e r sa sf o l l o w i n g ：t h es u s p e n s i o no f p n sa n dm c cw a sm i l l e dt w i c ea t2 0 0r p mf o r15m i n ，p r e f r o z e nu n d e rt h e t e m p e r a t u r eo f - 7 0 。c f o r2h o u r sa n dl y o p h i l i z e di nar e f r i g e r a t e dd r y i n gc h a m b e r u n d e ro 0 7 m b a r ；a f t e rs i e v i n gt h el y o p h i l i z e dp o w d e r sw e r em i x e dw i t hh h p ca n d t h ep o w d e r sw a so b t a i n e d i no r d e rt oo p t i m i z et h ep o w d e r sf o r m u l a t i o n s ，ac e n t r a l c o m p o s i t ed e s i g nw a se m p l o y e df o rt w oi n d e p e n d e n tv a r i a b l e s ，t h ep e r c e n t a g eo f h - h p ca n dp n s ，g e t t i n gf r o mo n e - f a c t o rt e s t t h ed e p e n d e n tr e s p o n s ev a r i a b l e sw e r e m e a s u r e da sr e l e a s er a t eo fr b la t1ha n d1 2 b i o a d h e s i v ei n t e n s i t y c o n s e q u e n t l y , w h e nt h e 3 h ，t h a to fr g la t1ha n d1 2ha n d c o r r e s p o n d e n tp e r c e n t a g eo fp n s ， m c ca n dh h p cw a s31 ，6 0 a n d9 ，t h er e l e a s er a t eo fr b ti nl ha n d1 2 hw a s 6 8 2 a n d5 3 2 5 a n dt h a to fr g lw a s8 3 4 a n d9 5 0 9 ，r e s p e c t i v e l y t h e b i o a d h e s i v et i m ew a s7 8 m i n a f t e rr i n s i n go fp n sp o w d e r s ，t h el a s t i n gt i m eo fc i l i a r y m o v e m e n tw a s9 4 8 4 t op h y s i o l o g i c a ls a l i n eg r o u p ，a l m o s tw i t h o u tt o x i c i t y f u r t h e r m o r e ，t h ep o w d e r sn e i t h e ra th i g hd o s e ( 4 0 m g ) n o ra tl o wd o s e ( 16 m g ) h a d i r r i t a t i o no ne n d o t h e l i a lc e l lo fr a b b i t s n a s a lm u c o s a t h ep o w d e r sw a sa d m i n i s t r a t e dt o r a t sa st h ef o r mo fs u s p e n s i o na n dt or a b b i t sa s t h ef o r mo fp o w d e r s ，r e s p e c t i v e l y a sar e s u l t ，t h ea b s o l u t eb i o a v a i l a b i l i t yo fr g lw a s 10 3 5 6 i nr a t s ，c o n f o r m i n gt ot w o - c o m p a r t m e n tm o d e la n dt h a to fr b la n dr g lw a s 8 0 15 a n d10 0 5 8 i nr a b b i t s ，a l s oc o n f o r m i n gt ot w o c o m p a r t m e n tm o d e l i no r d e r t o i n v e s t i g a t ep r o t e c t i v e e f f e c t so ft h ep o w d e r sa g a i n s tc a r d i o c e r e b r o v a s c u l a r d i s e a s e s w eb u i l ta c u t em y o c a r d i a li n f a r c t i o nm o d e li nr a t sb yo c c l u s i o no fl e f t c o r o n a r ya r t e r ya n dc e r e b r a li s c h e m i a - r e p e r f u s i o nm o d e li ng e r b i l sb yo c c l u s i o no f b i l a t e r a lc o m l n o nc a r o t i da r t e r y ( c c h ) c o n s e q u e n t l y , t h ep o w d e r ss i g n i f i c a n t l y r e d u c e dm y o c a r d i a li n f a r c ts i z ei n d u c e db yo c c l u s i o no fl e f tc o r o n a r ya r t e r y , a l l e v i a t e dc e r e b r a le d e m aa n dt h es t r o k es y m p t o m si n d u c e db yo c c l u s i o no fc c a ， a n dt h ee f f e c t sw e r ed o s e d e p e n d e n t ，t h eh i g h e rd o s eu s e d ，t h eb e r e re f f e c t so b t a i n e d w ep r e l i m i n a r i l ye s t a b l i s h e d q u a l i t y s t a n d a r do ft h e p o w d e r s ，i n c l u d i n g i d e n t i f i c a t i o no ft h em a i na c t i v ec o m p o n e n t si nt h ep o w d e r s ，r b l ，r g l a n d n o t o g i n s e n o s i d er 1 ，b yt l cm e t h o d ；a n a l y s i so ft h ep e r c e n t a g eo fp n si nt h e p o w d e r s b yu vm e t h o d ；a n da n a l y s i so fr b la n dr g lc o n t e n tb y h p l c a sar e s u l t ，a t c o r r e s p o n d e n tp l a c ep n sp o w d e r s t e s ts o l u t i o nd i s p l a y e dt h es a m ec o l o rp o i n ta st h a t o fc o n t r o ls o l u t i o n ；a f t e rs t a i n i n g ，p n sp o w d e r s t e s ts o l u t i o nh a dam a x i m u m a b s o r p t i o na t5 6 0 n m ；a n da f t e rb e i n gp r e t r e a t e dp n sp o w d e r s s a m p l e sw e r ei n j e c t e d i n t oh p l ca n da n a l y z e d i 1 1w h i c ha d d e dr e c o v e f i t yo fr b la n dr g lw a sb o t hb e t w e e n 9 5 a n d10 5 a n db o t ho fw i t h i n - d a ya n db e t w e e n - d a yp r e c i s i o nw a sl e s st h a n5 i n f l u e n c i n gt e s ti n d i c a t e dt h a tr b lc o n t e n ts i g n i f i c a n t l yd e c r e a s e da f t e r5d a y su n d e r h i g ht e m p e r a t u r e a n dh i g hh u m i d i t y ；r g lc o n t e n ta n dt h ep e r c e n t a g eo fp n s s i g n i f i c a n t l yd e c r e a s e da f t e r5d a y s u n d e rh i 曲t e m p e r a t u r e ，h i g hh u m i d i t ya n ds t r o n g l i g h t ，a n dt h es a m p l e sd i s p l a y e dt h es a m ec o l o rp o i n ta s c o n t r o ls o l u t i o na tt h e c o r r e s p o n d e n tp l a c e a st h er e s u l to fa c c e l a t i n gt e s ti n d i c a t e d ，u n d e rt h ec o n d i t i o no f 4 0 ( 3a n dr h7 5 r b la n dr g lc o n t e n t ，p n sp e r c e n t a g e ，t l ca n da p p e a r a n c eh a d n os i g n i f i c a n tc h a n g ea f t e r3m o n t h sa n dt e s to f6m o n t h si sp r o c e e d i n g l o n g t e r m t e s ti n d i c a t e dt h a tt h ep o w d e r sw a ss t a b l ea f t e rp l a c i n ga tr o o mt e m p e r a t u r ef o r3 4 m o n t h sa n dt e s t so f 6 ，9 ，1 2 ，18 ，2 4a n d3 6m o n t h sa r e p r o c e e d i n g b a s e do nt h er e s u l t s ，i tc a nb ec o n c l u d e dt h a tt h ep o w d e r se x c e l l e n t l vr e a c ht h e g o a l s t h a tw e p r e d i c t e d t h ep o w d e r sn o t o n l ys i g n i f i c a n t l ye n h a n c e dt h e b i o a v a i l a b i l i t yo fp n sb u ta l s os i g n i f i c a n t l yd e c r e a s e dt h et o x i c i t yo fp n so nn a s a l m u c o s a a n ds t a b i l i t yt e s ta l s oi n d i c a t e dt h a tt h ep o w d e r sw a s p o s s i b l ys t a b l ee n o u 2 h k e yw o r d s ：s a p o n i n so fp a n a xn o t o g i n s e n g ；g i n s e n o s i d er b l ；g i n s e n o s i d er g l ； n o t o g i n s e n o s i d er i ；m i c r o c r y s t a l l i n ec e l l u l o s e ；m o d e r a t e v i s c o s i t yh y d r o x y p r o p y l c e l l u l o s e ； i n t r a n a s a l p o w d e r s ； m i l l i n g ；l y o p h i l i z a t i o n ； c e n t r a l c o m p o s i t e d e s i g n 。r e s p o n s e s u r f a c e m e t h o d o l o g y ；c i l i a r y t o x i c i t y ；p h a r r n a c o k i n e t i c s ； b i o a v a i l a b i l i t y ；p h a r m a c o d y n a m i c s ；a c u t em y o c a r d i a li n f a r c t i o nm o d e l ：c e r e b r a l i s c h e m i a - r e p e r f u s i o nm o d e l ；q u a l i t ys t a n d a r d ；s t a b i l i t y 5 复日大学硕l 研究生学位论文三七总皂苷鼻腔用粉雾剂的研制 1 - | l 刖舌 建国5 0 多年来，特别是改革开放2 0 多年来，中药领域内人才培养、课题研 究和产业发展取得了长足的进步i l 】。但中药产业也面临着严峻的挑战，尤其是中 药产品的质量问题己成为制约中药产业发展、影响市场丌拓，特别是国际市场开 拓的瓶颈问题。皂苷类药物在我国具有悠久的临床应用历史，是最具有开发前景 的植物药之一，因此将其按照严格的药学规范标准开发成高效、优质、安全、稳 定、服用方便的新制剂【2 j ，将具有广阔的市场前景和深远的社会意义。 1 立题依据 现代医药为人类的医疗保健和生存繁衍作出了重要贡献，但是也面临着越来 越多的从理论到临床方面的问题d 1 。因为随着人类社会的发展和生活质量的提 高，人类疾病谱、健康观念、对生命质量的要求以及医学模式都发生了相应的变 化，而这些问题仅仅依靠化学药物是难以解决的。因此，“回归自然”，崇尚天然 药物正在成为一种世界潮流，这为中华民族之瑰宝一中医药的发展提供了难得的 机遇和广阔的发展空间。但是机遇和挑战并存，我国中药产业发展面临的挑战主 要包括越来越多的“洋中药”抢滩国际、国内市场；经济全球化和我国加入世界经 济贸易组织后，企业的竞争压力越来越大，对知识产权的保护日趋严格，新药仿 制几乎不可能；我国中药企业自身存在着许多问题，比如剂型落后、缺乏国际认 可的标准规范、产品质量稳定性较差等。因此，对于制剂研究人员来说，对传统 中药的剂型进行研究，开发具有自主知识产权的新药，改变其落后状态，实现中 药现代化，是我们的重要使命之一。 三七 p a n a xn o t o g i n s e n g ( b u r k ) e h c h e n 为五加科人参属的一个种，盛产于 我国云南和广西，是我国的名贵中药，具有“散瘀、止血、消肿、定痛”四大功 效，使用历史近6 0 0 年，栽培历史也在4 0 0 年以上。三七总皂苷( s a p o n i n so f p a n a x n o t o g i n s e n g ，p n s ) 是三七的主要有效部位，在三七粉中的百分含量为 8 2 0 旷2 9 4 ，为白色或类白色无定型粉末。 三七化学成分的研究始于3 0 年代初期，但进展不快。直到7 0 年代，由于发 现三七含有一些与人参相似的化学成分，而引起了国内外植物药学界的重视。目 前己分离并鉴定了2 0 余种单体皂苷成分【4 5 j ，主要是达玛烷型而无齐墩果酸型。 根据其苷元结构的不同，p n s 可分为以人参皂苷r b l ( r b l ) 为代表的2 0 ( s ) 原人参 二醇型( p r o t o p a n a x a d i o lg r o u p ) 和以人参皂苷r g l ( r 9 1 ) 为代表的2 0 ( s ) 一原人参三醇 型( p r o t o p a n a x a t r i o lg r o u p ) ，其块根中主要单体的结构见f i g u r e1 【5 ，6 。另外，在三 6 复q 人学硕士研究生学位论文三七总皂苷鼻腔用粉雾剂的研制 七的不同生长部位中，其地下部分和地上部分的皂苷组成也不尽相同，含量各异， 地下部分以r g l 为主，地上部分则相反，以r b l 为主。 p n s 具有多种药理活性，作用于机体多个系统，尤其对冠心病、心绞痛、心 率失常以及脑卒中、眼前房静脉阻塞等有确实可靠的疗效。有人提出人参皂苷多 种作用的途径假说，提示p n s 可能有类似的作用机制，见f i g u r e2 【_ 7 1 。由图可见， p n s 中的主要有效成分能够嵌入细胞膜，与细胞膜上的受体、酶和蛋白质作用， 以及进入细胞内与细胞核上的受体相互作用，从而引发一系列的细胞反应，发挥 各种药理作用。据世界卫生组织公布的数据显示，心脑血管疾病己成为危害人类 健康的第一大杀手，目前，我国约有1 1 亿心脑血管疾病患者，在4 0 岁以上的 中老年人中，5 7 以上的人都患有不同程度的心脑血管疾病。因此，p n s 具有广 阔的开发前景。 目前，p n s 在临床上的主要剂型为注射剂“血塞通”和口服制剂“三七总甙 片”。注射剂疗效确切，但成本高、使用不方便、患者顺应性差，且容易导致过 敏等不良反应，存在安全性问题；而对于口服给药，国内外大量研究报道证明 p n s 极易被胃酸水解，同时对肠内菌分泌的水解酶类如b 葡萄糖苷酶等较敏感， 而且皂苷类分子量大，肠黏膜渗透性较差，口服给药的生物利用度很低，疗效缓 慢而不确切，临床应用也受到一定限制。 到目前为止，国内外对皂苷类的研究报道多限于化学成分、药理作用及临床 适应证等方面，关于改变剂型和开发新的给药途径的研究仅见本课题组的报道 峭l 。因此，本文研制开发p n s 的新剂型，将具有广阔的市场前景，对皂苷类药 物的研究具有重要的学术价值，对中药现代化的发展也具有重要的参考意义。 2p n s 的剂型研究进展 p n s 具有多种显著的药理活性，人们开发了许多以其作为主药或中药复方组 分的制剂，用于各种疾病的治疗。 2 1 口服制剂 由于口服给药方便，制剂工艺较为简单，是一种较为传统的给药途径。以 p n s 为原料的口服制剂已有血塞通片、胶囊、颗粒剂等，用于脑路瘀阻、中风偏 瘫、胸f c ：j 心痛、脑血管后遗证及冠心病、心绞痛等的治疗【9 1 。 我国中药发展至今，中药复方是目前临床应用及新药开发的主流，p n s 作为 一个具有多种药理活性的中药，广泛应用于各种复方中。通舒胶囊的主要成分为 复旦人学硕士研究生学位论文 三七总皂苷鼻腔用粉雾剂的研制 p n s 及灯盏花提取物，具有活血化瘀、疏通筋络的功划1 0 1 。伤宁口服液由黄芪、 白术、当归、三七等组成，具有益气养血、活血生肌的功效，用于促进气血不足 证手术患者的创口愈合【l l 】。在复方鳖甲软肝片中，三七为君药，系贵重药材，以 粉末直接压片入药，临床上用于治疗慢性肝炎纤维化及早期肝硬化患者见胁肋隐 痛或结下痞、面色晦暗、脘腹胀满等的治疗【12 1 。复方丹参滴丸由丹参、三七和 冰片等三味中药，经科学方法提取有效成分精制而成，是治疗心血管疾病的常用 药【1 3 】。 1g l c 垒l g l c 2 g l c 4g i c 旦g i c 5g i c j 丝一g l c i i g l c 鱼l g l c 7g l c j l 二l g l c ( j i c g l c 立上a r a ( p y r ) g i c g l c 兰lg l 。 g l c 旦胁 r ) g i c lg l c 鱼lx y l 8g l c 9g l c 且r h a 1 0g l c _ 2 _ l x y l l ig l c 1 2 g l c 1 3 g l c2 ：l x y l 1 4g i c _ 2 - 上一r h a h h h h g k j 一g l c g l c g l c g l c 3g l c r 2 g l c 1 ：n o t o g i n s e n o s i d ek n o t o g i n s e n o s i d el n o t o g i n s e n o s i d em g i n s e n o s i d er d g i n s e n o s i d er b l g i n s e n o s i d er b 2 7 ：n o t o g i n s e n o s i d e 鼬 8 ：g i n s e n o s i d er h m 9 ：g i n s e n o s i d er 9 2 1 0 ：n o t o g i n s e n o s i d er 2 11 ：n o t o g i n s e n o s i d er 3 12 ：g i n s e n o s i d er g l 13 ：n o t o g i n s e n o s i d er l 14 ：g i n s e n o s i d er e g l c ：伊d - g l u c o p y r a n o s y l ；x y l ：犀d - x y l o p y r a n o s y l ；r h a ：o 江- r l a a r n n o p y r a n o s y l ； a r a ( p y r ) ：_ ( x - l - a r a b i n o p y r a n o s y l f i g u r e1t h em a i nc o m p o n e n t si ns a p o n i n so fp a n a xn o t o g i n s e n ga n dt h e i r s t r u c t u r e 8 2 3 4 5 6 复旦大学硕：l 研究生学位论文三七总皂苷鼻腔用粉雾剂的研制 f i g u r e2s c h e m a t i cd r a w i n gt oi l l u s t r a t ep o t e n t i a ls i t e so fa c t i o no fg i n s e n o s i d e s o np l a s m am e m b r a n ea n dn u c l e a rm e m b r a n e ( “? ”i n d i c a t e s h y p o t h e t i c a ls i t e s ) 为了减少给药次数，提高患者的依从性，中药口服缓控释制剂的研究对于需 要多次给药的疾病的治疗具有重要意义，心血管药物尤其如此。丹参、三七两味 在临床上药效显著、被广泛应用的中药，具有活血通经、祛瘀止痛、补血养气的 功效，其丹七普通片的临床给药方式为3 5 片( r i d ) 。为了提高丹七制剂的临床 疗效，袁媛等u 4 j 对其缓释制剂进行了研究，以h p m c 作为骨架材料，并用正交 试验设计优化了处方。 2 2 注射剂 虽然口服给药方便，但p n s 口服后极易受胃酸、肠内酶系的影响而降解， 而且分子量较大，亲水性极强，肠粘膜透过性差，生物利用度很低，口服疗效很 差。注射剂直接进入人体组织或血管，所以吸收很快，作用迅速，比较适合p n s 这类口服生物利用度很低的药物。 以p n s 为原料的注射剂血塞通，具有活血化瘀的功效，2 0 0 m g 血塞通加入 到2 5 0 5 0 0 m l5 葡萄糖溶液或生理盐水中，静脉滴注，以治疗前后血脂水平、 血液流变学参数和甲襞微循环为指标评价疗效，结果表明，血塞通通过降低血脂、 改善血液流变性及改善微循环而达到治疗作用【l 引。p n s 和灯盏花素具有相似的 心血管作用，两者经现代工艺精制而成的复方注射剂对心肌缺血的保护作用与抗 9 复旦大学硕十研究生学位论文三七总皂仔鼻腔用粉雾剂的研制 脂质过氧化有关1 6 1 。 2 3 皮肤外用制剂 在三七巴布剂中，由于p n s 是分子量较大的水溶性物质，即使在促透剂的 作用下，其透皮率仍仅为1 8 0 6 ，提示p n s 巴布剂的制备有相当大的难度【1 7 】。 但是三七f 0 j n 夕t - 用仍具有一定的治疗作用。三七粉外敷治疗痈疮破溃不愈合8 例，效果较满意。复方三七止痛酊是新研制的中成药制剂，由三七、血竭等6 味中药制成，具有解痉镇痛、抗炎消肿、止血祛瘀等作用1 9 1 。 2 4 黏膜给药制剂 由于p n s 口服给药生物利用度低，且在血中消除很快，而注射给药，用药 不方便，且存在过敏等安全性问题，因此为了提高其生物利用度，增加安全性， 必须探索其新的给药途径。许清芳等【8 1 制备了p n s 的粉剂和凝胶剂，相对于静 脉给药，生物利用度达到9 0 左右；而且相对于溶液剂，鼻纤毛毒性减小。本 课题组还制备了p n s 的脂质体，肺部给药，生物利用度与鼻腔给药接近【2 0 1 。 3 鼻腔给药的优点和国内外的研究进展 黏膜给药系统由于其独特的优势引起了药学研究者的广泛关注。而