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章末整合 酶是在生物体活细胞中合成的 多数酶在细胞内直接参与生物化学反应 少数的酶要分泌到细胞外发挥作用 1 胞内酶的制取 如果提取存在于细胞内的酶 需要破碎生物组织细胞 可用破碎仪 研磨器或匀浆器等机械将组织细胞破碎 使酶从活细胞中释放出来 进入细胞外的溶液中 经过滤 离心制备成粗酶液 酶的存在 简单制作方法及酶活力的测定 1 酶在生物体内的存在 或分布 部位 2 酶的制备 2 胞外酶的制备 对于唾液淀粉酶 胰蛋白酶等分泌到细胞外的酶 可以直接从动物分泌物或细胞外的组织间隙中提取 酶活力测定的一般原理和方法 1 酶活力的含义 酶的活性是指酶催化一定化学反应的能力 2 酶活力测定的一般原理和方法 酶的活力通常以单位时间内底物的消耗量或者在单位时间内产物的生成量来表示 例如 通过测定单位时间内麦芽糖的生成量来检测淀粉酶的活力 由于麦芽糖与3 5 二硝基水杨酸试剂反应 能生成黄褐色产物 利用分光光度法进行比色 可以测出麦芽糖的生成量 另外 还可以通过测定单位时间内淀粉的消耗量来检测淀粉酶的活力 3 直接使用酶 固定化酶和固定化细胞 简析实验是科学研究过程中的一个重要环节 是在人为控制的条件下 研究对象变化 以其结果论证科学结论的一种科学方法 1 变量 或因子 是指实验过程中被操纵控制的特定因素或条件 按性质不同常有以下两类 实验理论中的变量问题 1 实验变量与反应变量 实验变量也称自变量 指实验中由实验者所操纵的因素或条件 反应变量亦称因变量 是指实验中由于实验变量的改变而引起变化的量 2 无关变量与额外变量 无关变量是指不是该实验所探究的因素或条件 但可能对实验结果造成影响 由无关变量所引起的变化结果称额外变量 显然 额外变量会对反应变量起干扰作用 造成误差 实验的关键之一在于控制无关变量或减少额外变量 洗涤剂中酶制剂洗涤效果探究实验变量分析 1 加酶洗衣粉的洗涤效果的探究方法 实验设计遵循的原则是对照原则和单一变量原则 如探究普通洗衣粉和加酶洗衣粉对衣物污渍的洗涤效果有何不同时 以控制洗衣粉的种类为变量 其他条件完全一致 同时 普通洗衣粉处理污物与加酶洗衣粉处理污物形成对照实验 2 变量的分析和控制 影响加酶洗衣粉洗涤效果的因素有水温 水量 水质 洗衣粉的用量 衣物的质料 衣物大小 浸泡时间 洗涤的方式和洗涤的时间等 2 某学生为研究加酶洗衣粉的洗涤效果 设计了如下实验 制备不同洗衣粉含量的洗涤液 按下表设置实验组 每只烧杯加入等量的洗涤液 相同的污染布料 并设置相同且适宜的浓度 以污染布料洗净所用的时间为实验结果 下列实验结果预测及其分析 不正确的是 典例1 时间 a 当洗衣粉含量为任一固定值时 都能发现酶的最适ph值的估计值b 当ph为任一固定值时 都能证明酶影响反应速率c 无论洗衣粉含量为何值 根据实验结果作出的曲线图形近似 v 字形d 此实验涉及2个自变量 1个因变量解析根据每一横格可以看出 a正确 当ph为任一固定值时 不同的洗衣粉浓度 反应速率不同 不能证明酶影响反应速率 无论洗衣粉含量为何值 总能得到一个最适ph 因此根据实验结果作出的曲线图形近似 v 字形 此实验的自变量是洗衣粉浓度和ph 因变量是洗净所用时间 答案b 简析 固定化酶和固定化细胞特点分析 特别提醒 1 固定化细胞使用的都是活细胞 因而为了保证其生长 增殖的需要 应该为其提供一定的营养物质 2 固定化细胞由于保证了细胞的完整性 因而酶的环境改变小 所以对酶的活性影响最小 下列关于固定化酶和固定化细胞的叙述 正确的是 a 固定化细胞技术在多步连续催化反应方面优势明显b 固定化酶的应用中 要控制好ph 温度和溶解氧c 利用固定化酶降解水体中有机磷农药 需提供适宜的营养条件d 利用固定化酵母细胞进行发酵 糖类的作用只是作为反应底物 典例2 解析固定化细胞可连续多步催化反应 应用固定化酶需控制好温度和ph 不需控制溶解氧 利用固定化酶降解有机磷农药 不需提供营养 利用固定化酵母细胞发酵 糖类既作为反应底物 又可作为酵母细胞生命活动的能源物质 答案a 江苏 下列有关酶的制备和应用的叙述 正确的是 a 酶解法和吸水涨破法常用于制备微生物的胞内酶b 透析 电泳和酸解等方法常用于酶的分离与纯化c 棉织物不能使用添加纤维素酶的洗衣粉进行洗涤d 多酶片中的胃蛋白酶位于片剂的核心层 例1 解析酶解法可去除微生物的细胞壁 再通过吸水涨破法使细胞内的物质释放出来 提取分离其中的胞内酶 透析和电泳可用于酶的分离和纯化 但酸解会破坏酶的结构 棉织物的主要成分是纤维素 可用含纤维素酶的洗衣粉洗涤 因为纤维素酶使纤维的结构变得蓬松 从而使渗入到纤维深处的尘土和污垢能够与洗衣粉充分接触 达到更好的去污效果 多酶片中的胃蛋白酶应在片剂的糖衣内层 而片剂的核心层应是在小肠中发挥作用的胰蛋白酶等 答案a 浙江 某同学进行苹果汁制作实验 工艺如图所示 例2 请回答问题 1 图中用kmno4溶液浸泡苹果的目的是 黑曲霉提取液中含有的 可水解果胶 从而使果汁澄清 固定化柱中填充的石英砂通过 方式将酶固定化 酶被固定后用蒸馏水洗涤固定化柱是为了除去 2 实验中 操作流程a和b的先后顺序为 在苹果汁澄清过程中 应关闭的流速调节阀是 要测定从固定化柱流出的苹果汁中是否还有果胶 可取一定量的果汁与等量的 混合 如果出现 现象 说明果胶还没有被完全水解 为使果胶完全水解 应将流速调 3 实验后 将洗涤过的固定化柱在低温环境中保存若干天 该固定化柱仍可用于苹果汁制作实验 说明固定化酶可被 使用 解析考查苹果汁的制作过程 1 苹果汁的制作需要果胶酶 该酶来自图中的黑曲霉 果胶酶将果胶催化水解 提高了果汁的澄清度 酶固定常用吸附法 2 先提取果胶酶再进行果汁的制作 防止苹果汁时间过久变质 澄清过程应关闭阀1 避免提取液进入固定柱中降低了果汁质量 如果果胶未完全分解 可降低流速 延长反应时间 3 固定化酶的优点之一是被固定的酶可以重复使用 答案 1 消毒 果胶酶 吸附 未被

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