金霉素的生产工艺流程.doc

金霉素的生产工艺流程摘要：本文主要是阐述金霉素的生产过程，以及其结构和性质，和一些金霉素在生产过程中的工艺控制要点。关键词：金霉素，氯四环素，金色链霉菌，发酵，发酵液预处理，精制本品抗菌谱与四环素相似，对革兰氏阳性球菌，特别是葡萄球菌、肺炎球菌有效。因为副作用大，目前只外用，用于治疗结膜炎、沙眼。又称氯四环素。【英文/拉丁名称】Chlortetracycline，氯四环素，Aureomycin。【分子式】【化学名】6一甲基-4-(-甲氨基)-3，6，10，12，12a-五羟基一1，11一二氧代一7一氯一1，4，4a，5，5a，6，ii，12a-八氢一2并四苯甲酰胺酸酸盐。【分子量】478.89【分子式】C22H23ClN2O8【性状】本品为金黄色或黄色结晶；无臭，味苦；遇光色渐变暗。【药理作用】 本品属四环素类药物，主要抑制敏感微生物的蛋白质合成。其抗菌谱广，对革兰阳性菌、 阴性菌、螺旋体、立克次氏体、支原体、衣原体、部分原虫等均可抑制。 金霉素主要与微生物的30S小亚基A位结合，进而干扰氨基酰tRNA 与30S小亚基结合，使氨基酰tRNA不能进入mRNA上的受位，抑制了蛋白质合成时肽链的延长；金霉素还可以阻止已合成的蛋白质肽链释放。 金霉素对70S 核蛋白体的作用更为敏感，因此，金霉素能够选择性抑制敏感微生物，具有良好的安全性能。【药代动力学】本品为局部用药，全身很少吸收。【禁忌证】有金霉素药物过敏史者，有四环素类药物过敏史者禁用本品。 【不良反应】轻微刺激感。偶见过敏反应，出现结膜充血、眼痒、水肿等症状。应用时耐药菌株可过度生长。【注意事项】对本品过敏者禁用，过敏体质者慎用；本品不宜长期连续使用，使用5日症状未缓解，应停药；若出现充血、眼痒、水肿等症状，应停药。【贮藏】密闭，在干燥阴凉处保存。1. 生产菌种金色链霉菌9647斜面及平板分离培养基（%）：麸皮3.0。琼脂2.0，磷酸氢二铵0.05，磷酸氢二钾0.02，硫酸镁0.03，消前ph6.36.5。种子培养基（%）：玉米淀粉4.0，花生饼粉2.0，蛋白胨0.5，酵母粉0.6，硫酸镁0.03，硫酸铵0.03，氯化钠0.4，碳酸钙0.4，磷酸二氢钾0.03，淀粉酶0.5，油0.1消前ph6.36.5发酵培养基（%）：玉米淀粉6.5，玉米粉2.0，花生饼粉3.5，蛋白胨0.5，酵母粉0.5，硫酸镁0.03，硫酸铵0.03，氯化钠0.3，碳酸钙0.6，磷酸二氢钾0.01，淀粉酶0.5，油0.1消前ph6.36.5斜面及平板培养条件：培养温度33，相对湿度45%65%，培养45d2. 种子制备种子培养条件：培养温度31，相对湿度45%65%，摇瓶装量30ml/250ml三角瓶，摇床转速280r/min，培养28h发酵培养条件：培养温度31，相对湿度45%65%，摇瓶装量30ml/250ml三角瓶，摇床转速280r/min，接种量25%，培养5d3.发酵30L小试发酵罐培养条件：培养温度2931，通气1:1（vvm），罐压0.03Mpa，搅拌转速400 r/min，接种量25%，培养5d 100立方米发酵罐培养条件：培养温度2931，通气1:0.8（vvm），罐压0.03Mpa，搅拌转速125r/min，接种量25%，培养5d补料控制：在发酵培养12h左右，当总糖低于5.5%时开始补料，发酵培养12h48h控制总糖浓度5.5%3.5%，发酵培养49h100h控制总糖浓度3.5%2.0%，发酵培养100h放罐控制总糖浓度2.0%1.5%。当ph在5.8时自动补入氨水，控制ph在5.8左右。流加补料：依据发酵液中还原糖的含量和补料糖的浓度，设定每小时的补料量，以匀速自动补入，控制还原糖浓度1.0%以上。分批补料：依据发酵液中还原糖的含量和补料糖的浓度，采取每隔6h补料一次，控制还原糖浓度1.0%以上。总糖和还原糖的测定：菲林试剂发氨基氮的测定：甲醛法菌丝浓度的测定：去发酵液10ml于离心沉淀管中，在2500r/mi测沉淀物在发酵液中的比例即得菌丝浓度发酵效价的测定：分光光度法ph的测定：用ph电极测定生产工艺流程孢子培养孢子培养36摄氏度，5d7d36摄氏度，5d7d沙土孢子 母瓶斜面孢子发酵种子培养生产斜面孢子 种子培养液 发酵液1：0.5V/(V*min)155180h3032摄氏度，1：15V/(V*min)2428摄氏度4.提取与精制可采用沉淀法，溶剂萃取法或离子交换法提取。发酵液预处理酸化过滤成复盐加2%草酸，再用Hcl调ph1.2，硫酸，黄血盐各加0.1%0.2%发酵液 酸性滤液加Cacl2 0.07，氯化镁 0.160.3 氨水调PH7.57.8一次转盐酸盐金霉素钙镁复盐 粗品20乙醇，11Hcl，4749摄氏度，保湿1h精制二次转盐酸盐溶解粗品 加1824Hcl，4045摄氏度，保湿1h加8氯化镁的乙醇，氨水调PH6.7，效价10万uml气流干燥分离洗涤金霉素盐酸盐结晶 湿晶体用1：2热水（40摄氏度）洗涤，再用1：2乙醇洗涤进风湿度100摄氏度以下，出风湿度40摄氏度以下，60目过筛金霉素盐酸盐成品参考文献陈电容，朱照静主编.生物制药工艺学.人民卫生出版社,2009.02.顾觉奋主编.抗生素.上海科学技术出版社,2001年09