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第44讲 植物的组织培养及植物有效成分的提取1(2016烟台诊断性测试)蓝莓提取物中的花青素不仅易于吸收,而且它们可以穿过血液脑屏障,保护各个精细组织的细胞,并能有效抑制破坏眼部细胞的酵素,从而改善视力。蓝莓中花青素获得途径如下图:(1)图中和分别表示蓝莓组织培养中的_过程。如果要用此方法对蓝莓进行大规模繁殖,在对蓝莓外植体细胞进行接种前,需要进行_、_两项工作。(2)在外植体培养获得幼苗的过程中,除了需要提供一定的营养、_、温度、ph和光照外,还必须在_的条件下培养。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值_(填“高”或“低”)时,有利于根的分化。(3)花青素易溶于甲醇、乙醇、丙酮等混合溶剂中,所以采用_法进行提取。新鲜的蓝莓含有大量的水分,在花青素的提取过程中,要对新鲜的蓝莓进行_处理,但要注意控制_和时间。答案:(1)脱分化(或去分化)、再分化制备ms固体培养基(配制培养基)外植体消毒(两空可互换)(2)激素无菌高(3)有机溶剂萃取干燥(脱水)温度2(2016广东清远期末)传统药用植物栝楼的根、果实、种子等均能入药,其合成的天花粉蛋白是中药天花粉的主要有效成分。现科研人员进行以下的研究,大致流程如下:(1)接种在ms培养基中的栝楼种子,如先经加水浸没的萌发率为75%,不加水浸没的萌发率为2.5%,说明栝楼种子萌发需要_。(2)在培育“无菌苗”过程中,使用的部分激素组合如表1(注:表示未添加该种植物激素),除甲组仅有顶芽长成小苗外,所有的培养基上都有腋芽长出,可见诱导腋芽生长加入_是必需的。表1组别6ba(mg/l)naa(mg/l)甲乙1.0丙0.5丁1.00.5戊2.00.5(3)在诱导“愈伤组织”的ms培养基中,使用了以下一些激素组合(如表2),培养基上均能诱导叶盘缓慢长出黄绿色的愈伤组织,其中组b2和组b3诱导产生的愈伤组织在培养30天后分化出小芽点,并迅速长大成无根苗,两组的分化率分别为25.0%和14.3%。可见0.2 mg/l naa与激动素(6ba等)配合可诱导栝楼叶片_长出愈伤组织,但不利于诱导愈伤组织_。表2组别naa(mg/l)6ba(mg/l)iaa(mg/l)kt(mg/l)a10.22.0b10.24.0c10.26.0a22.00.2b24.00.2c26.00.2a30.22.0b30.24.0c30.26.0解析:(1)从题意中可以看出,种子浸泡后萌发率提高,说明种子萌发过程中需要水分。(2)比较表格中信息和实验结果可以推测:只加入6ba或naa或6ba和naa二者均加入,都可以促进腋芽的生长。(3)a1、b1、c1组中都是0.2 mg/l naa与激动素(6ba等)配合,根据实验结果,只出现愈伤组织,说明0.2 mg/l naa与激动素(6ba等)配合可以促进脱分化过程,由于没有长成幼苗,说明不利于再分化过程。答案:(1)充足的水分(水分、水)(2)6ba或naa或6ba和naa(植物激素)(3)脱分化再分化3(2016太原八校一模)回答下列有关植物有效成分提取的问题:(1)从胡萝卜中提取胡萝卜素时,通常在萃取前要将胡萝卜粉碎和_,以提高萃取效率。鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素时,通常采用_法,在鉴定的过程中需要用_作为对照。(2)用水蒸气蒸馏法提取薄荷油时,在油水混合物中加入氯化钠的作用是_,加入无水硫酸钠的作用是_,除去固体硫酸钠常用的方法是_。(3)橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解,使用水中蒸馏法又会产生_的问题,所以一般采用_法。解析:(1)为提高萃取效率,从胡萝卜中提取胡萝卜素时,需要在萃取前将胡萝卜粉碎和干燥。通常采用纸层析法鉴定萃取物中是否含有胡萝卜素,在鉴定的过程中需要用标准样品作为对照。(2)水蒸气蒸馏法提取薄荷油时,为使油层和水层分离,需在油水混合物中加入氯化钠;分离出的油层中加入无水硫酸钠的作用是除去少量的水,除去固体硫酸钠的常用方法是过滤。(3)由于橘皮精油的有效成分在用水蒸气蒸馏时会发生部分水解,使用水中蒸馏法又会产生原料焦糊的问题,所以一般采用压榨法提取橘皮精油。答案:(1)干燥纸层析标准样品(2)有利于油层和水层的分离除去少量的水过滤(3)原料焦糊压榨4胡萝卜素是一种常用的食用色素,可分别从胡萝卜或产胡萝卜素的微生物菌体中提取获得,流程如下:酵母菌r,的筛选)酵母菌r,的培养)菌体,裂解)离心),sdo5(沉淀)过滤浓缩胡萝卜素的鉴定(1)筛选产胡萝卜素的酵母菌r时,可选用_或平板划线法接种。采用平板划线法接种时需先灼烧接种环,其目的是_。(2)培养酵母菌r时,培养基中的蔗糖和硝酸盐可分别为酵母菌r的生长提供_和_。(3)从胡萝卜中提取胡萝卜素时,干燥过程应控制好温度和_以防止胡萝卜素分解;萃取过程中宜采用_方式加热以防止温度过高;萃取液浓缩前需进行过滤,其目的是_。(4)纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素。鉴定过程中需用胡萝卜素标准品作为_。解析:(1)接种微生物的方法主要是稀释涂布平板法和平板划线法。接种过程中为了避免杂菌的污染,要进行无菌操作,必须对接种环进行灼烧处理。(2)在微生物培养过程中,蔗糖主要提供碳源,也可以作为能源物质;硝酸盐中含有氮元素,可提供氮源。(3)提取胡萝卜素时,温度过高、时间过长会导致胡萝卜素分解;由于萃取剂通常具有挥发性,直接加热时挥发出来的有机溶剂遇明火易爆炸,故常采用水浴加热;萃取和浓缩前进行过滤是为了将原料中的不溶物滤去。(4)提取出来的胡萝卜素往往不纯,鉴定时常用标准品作为对照。答案:(1)稀释涂布平板法(或稀释混合平板法)灭菌(或防止杂菌污染)(2)碳源氮源(3)时间水浴滤去不溶物(4)(实验)对照5(2016长春二模)研究发现柚皮精油和乳酸菌素(蛋白质)均有抑菌作用,两者的提取及应用如图所示。据图回答下列问题:(1)为了提高出油率,也因为柚皮易焦糊,宜采用_法提取柚皮精油,该过程得到的糊状液体可通过_除去其中的固体杂质。(2)为了分离出优良的乳酸菌a,需要制备_培养基;若需长期保存菌种,可采取的方法是_。(3)抑菌实验时,在长满致病菌的平板上,会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的_来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。(4)某橘农发现自家一橘树具有抗虫性状,欲利用组织培养技术大量繁殖。若用花药离体培养,则应选择_期的花药成功率最高。确定花粉发育期最常用的方法是_法,若花粉不易着色,需采用_法。通过花药培养产生花粉植株一般有两种途径:一是花粉通过_阶段发育为植株;另一种是花粉在_培养基上,先形成愈伤组织,再将其诱导分化成植株。解析:(1)为了提高出油率,也因为柚皮易焦糊,所以一般采用压榨法提取柚皮精油,过滤压榨获得的糊状液体,即可得到柚皮精油。(2)一般选用选择培养基分离获得优良的乳酸菌;宜采用甘油管藏法长期储存菌种。(3)抑菌实验时,在长满致病菌的平板上,会出现以抑菌物质为中心的透明圈,通过测定透明圈的直径大小来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。(4)选择单核期的花药离体培养,成功率最高。确定花粉发育期最常用的方法是醋酸洋红法,若花粉不易着色,需采用焙花青铬矾

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