陈苏宁分子生物学技术在AML规范化诊断中的价值.ppt

分子生物学技术在AML规范化诊断中的价值 陈苏宁 苏州大学附属第一医院江苏省血液研究所 急性白血病的分型AML的诊断技术及进展AML的细胞和分子遗传学异常AML的微小残留病检测 2011年美国发病率和死亡率最高的10种肿瘤类型 CACancerJClin2011 CACancerJClin2011 2011年美国血液肿瘤预期发病率和死亡率 发病率 淋巴瘤 NHL HL 白血病 CLL AML ALL CML MM死亡率 白血病 AML CLL ALL CML 淋巴瘤 NHL HL MM 2007年美国各年龄和性别组报告死亡数排名前五位的肿瘤类型 CACancerJClin2010 中国白血病发病率 白血病发病率 2 1 6 9 10万AML 1 85 10万 ALL 0 69 10万 CML 0 36 10万 CLL 0 05 10万 日本白血病发病率 2001年全国白血病中心AML 1 2 2 9 10万 ALL 0 5 1 5 10万 CML 0 3 1 1 10万 CLL 0 1 0 8 10万 1827年 法国的AlfredVelpeau描述第一例白血病1847年 Virchow首次提出了 白血病 这个名称1976年 法 美 英3国7位血液学家以光镜下的形态为主 参照细胞化学染色 制定了FAB分型标准 标志着现代白血病诊断与分型的开端80年代末至90年代初 随着免疫学 细胞遗传学和分子生物学理论和技术的发展 出现了MICM 形态学 免疫学 细胞遗传学 分子生物学 分型WHO造血和淋巴组织肿瘤分类方案 2001 2008 FAB分型及WHO分类 FAB 主要建立在形态学基础上WHO 2001和2008 骨髓或外周血原始细胞比例 20 将一些有明确诊断及预后指导意义的细胞或分子遗传学异常作为诊断和分型的重要标志将患者诊断之前的疾病状态和治疗措施纳入考量 FAB和WHO分类方案的主要区别 急性白血病的WHO分型 急性髓细胞白血病 AML 和相关肿瘤系列不明的急性白血病 ALAL 前体淋巴肿瘤B淋巴母细胞白血病 淋巴瘤T淋巴母细胞白血病 淋巴瘤 急性髓细胞白血病 AML 和相关肿瘤 伴再现性遗传学异常的AML伴MDS相关改变的AML继发于MDS或MDS MPN伴有MDS相关细胞遗传学异常2或3系50 以上的细胞有发育异常治疗相关性AML不另作分类的AML髓细胞肉瘤Down s综合征相关髓系增生疾病母细胞性浆细胞样树突细胞肿瘤 伴再现性遗传学异常的AML AMLwitht 8 21 q22 q22 RUNX1 RUNX1T1AMLwithinv 16 p13 1q22 ort 16 16 CBFB MYH11APLwitht 15 17 q22 q12 PML RARAAMLwitht 9 11 p22 q23 MLLT3 MLLAMLwitht 6 9 p23 q34 DEK NUP214AMLwithinv 3 q21q26 2 ort 3 3 RPN1 EVI1AML M7witht 1 22 p13 q13 RBM15 MKL1 AMLwithmutatedNPM1 AMLwithmutatedCEBPA 通常AML的诊断标准 原始细胞比例 20 但如果t 8 21 t 15 17 或inv 16 阳性 则不论原始细胞比例为多少 AML诊断成立 急性髓细胞白血病微分化型 M0 急性髓细胞白血病未成熟型 M1 急性髓细胞白血病成熟型 M2 急性粒单核细胞白血病 M4 急性单核细胞白血病 M5 急性红白血病 M6 急性巨核细胞白血病 M7 急性嗜碱粒细胞白血病 ABL 急性全髓增殖性疾病伴骨髓纤维化 不另作分类的AML 急性白血病的WHO分型 急性髓细胞白血病 AML 和相关肿瘤系列不明的急性白血病 ALAL 前体淋巴细胞肿瘤B淋巴母细胞白血病 淋巴瘤T淋巴母细胞白血病 淋巴瘤 急性白血病的WHO分型 急性髓细胞白血病 AML 和相关肿瘤系列不明的急性白血病 ALAL 前体淋巴细胞肿瘤B淋巴母细胞白血病 淋巴瘤T淋巴母细胞白血病 淋巴瘤 B淋巴母细胞白血病 淋巴瘤无法分类的B淋巴母细胞白血病 淋巴瘤伴有再现性遗传学异常的B淋巴母细胞白血病 淋巴瘤t 9 22 q34 q11 BCR ABLt v 11q23 如t 4 11 如MLL AF4t 12 21 p12 q32 TEL AML1t 1 19 q23 p13 E2A PBX1t 5 14 q31 q32 IL3 IGH超二倍体核型亚二倍体核型T淋巴母细胞白血病 淋巴瘤 骨髓淋巴母细胞 20 且无髓外肿块 如伴有t 12 21 t 1 19 等B淋巴母细胞白血病特征性的细胞遗传学异常 可诊断为B淋巴母细胞白血病 急性白血病的分型AML的诊断技术及进展AML的细胞和分子遗传学异常AML的微小残留病检测 急性白血病的诊断和分型依赖于多种检测方法的联合使用 形态学 外周血片 骨髓 涂片 活检 细胞化学染色免疫表型检测 多参数流式细胞仪细胞遗传学检测常规核型分析FISH CGH SKY 染色体涂染分子遗传学检测融合基因检测 RT PCR PML RARA AML1 ETO CBFB MYH11 MLL BCR ABL 基因突变 FLT3 ITD CEBPA NPM TET2 IDH1 NOTCH1 IKZF1 FBXW7 拷贝数变化 CNV array CGH SNP array高通量测序技术 1950 1960 1970 1980 1990 2000 2010 确定染色体数目 46 发现Ph 发现 21 各种显带技术出现 发现多数AL患者伴有染色体异常 FISH出现 阐明某些染色体异常的分子学改变 SKYCGHPCR技术FLT3 ITD 1996 c KIT突变 1993 芯片技术 cDNAarrayArray CGH SNP array 测序技术的发展大量基因突变的发现 JAK2 NPM CEBPA PAX5 IKZF1 FLT3 RUNX1 WT1 RAS NOTCH1 新一代高通量测序技术 各种遗传学改变间的相互作用 白血病遗传学研究的历史 G带 RP11 438N5 G248P8432B2 der X normal 11 WCP3 WCP5 FISH 2p 3p 3q23 q29 3q25 4 5 7p15 p22 7p11 2 8p 8q11 2 q21 2 8q21 3 q23 8q24 10 12p 12p11 14q24 q32 15 16p 19 ChromosomalCGH 69 71 XXYY 1 del 1 p11 del 2 p der 3 t 3 11 p24 4 4 6 der 7 t 7 10 ins 10 8 q22 8 8 ins 10 8 q22 10 11 der 12 t 8 12 p13 t 8 12 der 14 t 3 14 q21 16 17 18 19 cp5 SKY Oligoarray CGH 分辨率高 可发现 5kb的CNV样本要求量小 0 5ug费用更低AgilentNimbleGen不能检测单亲二倍体 UPD LOH不能检测平衡性染色体重排 APL STAT5B RARA T ALL患者 UTX缺失 SNP array 分辨率高 Affymetrix Illumina可检出CNV 单亲二倍体 LOH 可推算样本嵌合度 del 11 p13p13 33 86Mb 36Mb RemovalofNRE LMO2activation tel cen e1 e3 4 e2 e5 e6 LMO2 NRE proximalpromoter distalpromoter breakpoint 测序技术的快速发展带来价格的下降 1990 2001 2007 2010 2012 摩尔定律 13年 30亿美元 已经进入数千美元测一个全基因组的时代 2weeks 0 001 0 01 0 1 1 0 10 0 100 0 1000 0 10 000 0 100 000 0 第二代测序技术平台 单分子实时测序 第三代测序技术 国际肿瘤基因组协作组 2008年成立11个国家 20个肿瘤类型 500个肿瘤样本预计2010年底可完成数百个肿瘤样本的全基因组测序 Nature 2010 April15 DLBCLMYD88 39 ABC DLBCLNature 10Feb 2011 BCL2 33 5 主要见于GCB DLBCLASH2010B ALL CREBBP NCOR1 ERG SPI1 TCF4 TCF7L2 Nature 10March2011 MM BRAF NFKB通路的11个成员 Nature 16March2011 CLL NOTCH1 MYD88 Nature 5Jun2011 JEM 13Jun2011 HCL BRAFV600E 48 48NEJM Jun162011 急性白血病的分型AML的诊断技术及进展AML的细胞和分子遗传学异常AML的微小残留病检测 约55 的AML患者可检出克隆性染色体异常分子遗传学技术的进展使得多数AML患者检出基因水平的异常 如Flt3 CEBP 及NPM1基因的突变遗传学异常对于理解AML发病机制 建立新的诊断方法 研发治疗药物或指导临床治疗有重要的价值在WHO分型建议中 一些特殊的遗传学异常被列为诊断和分型的依据 AML常见的染色体异常AML常见的基因突变AML常见的基因表达异常 AML常见染色体异常 单一异常 45 2种异常 55 5 5q 7 7q 8 Y 11 13 21 22 3q26 del 9q t 6 9 t 9 22 等 AML常见核型异常 42 4 18 8 14 4 5 8 5 6 5 4 2 9 江苏省血液研究所AML患者核型异常的分布 t 8 21 q22 q22 见于约10 AML 形成8号染色体上的AML1 ETO融合基因CR率高 EFS长 预后相对较好20 30 伴c KIT突变 复发率增高 预后较差 75 伴性染色体丢失及del 9q 等附加异常 伴性染色体丢失不影响预后 伴del 9q 提示预后不良 AML M2t 8 21 q22 q22 9q Y t 8 21 q22 q22 模式图 inv 16 p13 q22 t 16 16 p13 q22 见于约5 AML 20 AML M4及100 AML M4Eo遗传学特点 因16号染色体较小及带型的限制 常规核型分析容易漏诊有典型形态学改变及常见继发性异常的患者必须行FISH或PCR检测CBF MYH11融合基因常伴继发性异常 8 21 22约30 患者亦存在KIT突变 复发率增高 预后欠佳化疗敏感 预后相对好 易发生CNSL AML M4Eo骨髓象 AML M4Eo 8 inv 16 FISH检测inv 16 inv 16 模式图 t 15 17 q22 q12 见于8 10 AML对全反式维甲酸敏感 生存期长分子生物学特征 易位形成PML RAR 融合基因 是APL特异性的分子生物学标志PML RAR 对APL诊断具有高度特异性 也是治疗的分子基础 AML M3 8 t 15 17 AML M3t 11 17 涉及MLL基因的染色体异常 流行病学 见于约5 AML 与单核细胞白血病有特别的联系遗传学特点 11q23上受累的基因是MLL 易位的伙伴基因不固定目前报道的涉及MLL的染色体易位有104种 已经明确的MLL伙伴基因有64种除t 9 11 外的累及MLL的易位预后多不佳 涉及MLL易位的染色体断裂点的分布 t 6 9 p23 q34 DEK NUP214 约占AML的0 7 1 8 M2 M4多见 多有MDS病史形成DEK CAN融合基因69 的儿童患者和78 的成人患者可检出FLT3 ITD预后不良 累及3q26的染色体异常 见于APL以外的各种AML亚型 占AML的1 2 多种变异型t 3 3 q21 q26 RPN1 EVI1t 3 7 q21 q26 inv 3 q21q26 RPN1 EVI1重排导致3q26的EVI1基因表达异常上调缓解率低 复发率高 预后较差可检测到由EVI1与位于其上游约2kb处的MDS1基因形成的融合性剪接异构体 EVI1 MDS1 的表达 t 1 22 p13 q13 RBM15 MKL1 仅见于AML M7亚型 未见于唐氏综合征相关AML M7患者多为婴儿 中位年龄4个月完全缓解率50 中位生存期8个月重排形成RBM15 MKL1融合基因缓解率低 复发率高 预后较差 G带 上图 R带 下图 其他少见的染色体易位 t 9 22 q34 q11 0 5 1 的AML累及MOZ的染色体易位t 8 16 p11 p13 MOZ CBP融合基因 多见于M4和M5亚型 骨髓易见吞噬红细胞现象 预后不佳inv 8 p11q13 MOZ TIF2融合基因t 8 22 p11 q13 MOZ p300融合基因t 3 5 q25 q35 NPM1 MLF1融合基因 多见于由MDS转化AML 活检易见多系病态造血 预后不良t 16 21 p11 q22 FUS ERG融合基因 多见于M4 M5 易见吞噬红细胞和血小板 预后不良累及11p15 5NUP98基因的染色体易位 已达25种 AML常见的染色体异常AML常见的基因突变AML常见的基因表达异常 FLT3 ITD 流行病学 占正常核型 AML患者的28 34 伴t 15 17 t 6 9 的AML患者突变率高 而伴t 8 21 inv 16 和11q23异常的患者中少见预后意义 正常核型 AML患者检测到FLT3 ITD提示患者复发率高 生存期短其不良预后与伴FLT3 ITD的等位基因的数量呈正相关作为MRD标志的价值有限 FLT3 TKD 流行病学 占正常核型 AML患者的11 14 约2 8 的ALL患者也可检测到预后意义 不明确分子生物学特点 最常见的突变类型为累及FLT3第20号外显子第835及836个密码子的错义突变 小片段插入或缺失突变突变使位于TKD羧基端的A loop持续活化 进而抑制AML细胞的凋亡部分AML患者可同时存在FLT3 ITD和FLT3 TKD c KIT基因突变 流行病学 占CN AML的5 8 25 CBF相关AML突变多发生于受体胞外区的8号或17外显子的第816密码子预后意义 伴KIT突变尤其是第17号外显子D816突变的t 8 21 阳性AML患者的总复发率 CIR 相对高 且EFS RFS及OS相对较短 NPM1基因突变 广泛表达的磷蛋白质 NPM1可与ALK RAR 和MLF 1等形成融合基因 参与白血病或淋巴瘤的发病流行病学 25 35 的AML患者45 62 正常核型AML患者 10 15 核型异常AML患者预后意义 化疗CR率高 预后良好分子生物学特点 突变位点在12号外显子 突变导致NPM1蛋白异常定位于胞浆40 伴NPM1突变的AML患者可同时检测到FLT3 ITDNPM1mut FLT3 ITDneg预后良好 CEBPA基因突变 流行病学 可见于5 8 的AML 多见于正常核型患者分子生物学特点 羧基端亮氨酸拉链区突变氨基端无义突变Green等报道7 107 1427 的年轻AML患者可检出CEBPA突变 其中45 为单次突变 55 为双次突变 双次突变患者8年生存率优于单次突变或未突变者 54 vs 31 vs 34 只有CEBPA双次突变才有预后意义 JClinOncol 2010Jun1 28 16 2739 47 CEBPA突变的预后意义 TET2基因突变 TET2位于4q24 有抑癌基因功能 是AML患者突变率较高的基因之一 约20 TET2基因突变也可见于MPN 10 CMML 30 50 MDS 20 TET2基因突变的预后意义尚不明确 早期的报道认为预后良好 但近来有多项研究发现对总生存无影响TET1基因编码 酮戊二酸依赖的双加氧酶 将5 甲基胞嘧啶转化为5 羟甲基胞嘧啶 参与甲基化调控TET2基因与TET1基因有很高的同源性 提示也可能有相同酶活性 DNMT3A基因突变 哺乳动物中 包括4种DNA甲基转移酶 DNMT1 DNMT2 DNMT3A DNMT3B DNMT3A基因位于2p23 3 是重要的从头甲基化酶 也是DNA甲基化的重要参与者22 的原发性AML可检出DNMT3A基因突变 是预后不良的标志8 的MDS患者可检出DNMT3A基因突变 有突变的患者总生存率下降 转AML风险增高 LeyTL etal NEJM2010WalterMJ etal Leukemia2011 RUNX1基因突变 RUNX1基因位于21q22 是转录因子核心结合因子家族成员 在t 8 21 q22 q22 AML中 可与位于8q22的RUNX1T1基因形成RUNX1 RUNX1T1融合基因RUNX1基因的点突变可见于AML MDS CMML 原发性MDS患者的RUNX1基因突变率约为7 15 继发性MDS的突变率更高RUNX1基因突变是预后不良的标志 AML患者常见基因突变和异常表达的预后意义 Dohner H etal Blood2010 115 453 474 485例正常核型年轻AML患者NPM1 CEBPA MLL FLT3 ITD或TKD NRAS和WT1基因突变的检测结果 AML常见的染色体异常AML常见的基因突变AML常见的基因表达异常 异常表达的AML相关基因及其预后意义 WT1基因高表达 WT1基因位于11p136 8 的AML患者伴有WT1基因突变约75 AML患者可检测到WT1高水平表达缓解率低 预后差作为泛白血病标志用于缺乏遗传学标志的AMLMRD的监测 AML染色体异常的预后分级 分子遗传学异常的预后意义 白血病的发生需要两类突变协同 白血病 造血祖细胞增殖不受控制 CML样疾病 造血祖细胞分化障碍 MDS样疾病 类突变 类突变 信号转导通路的基因突变如BCR ABL TEL PDGFRB N RAS k RAS FLT3 ITD FLT3 TKD PTPN11 JAK2等 转录因子突变如AML1 ETO CBF MYH11 PML RARa MLL基因重排 CEBPA NPM1等 急性白血病的分型AML的诊断技术及进展AML的细胞和分子遗传学异常AML的微小残留病检测 MRD是指在白血病患者完全缓解后 体内残存少量白血病细胞的状态 检测方法包括荧光原位杂交 PCR 流式细胞术MRD检测对于评估疾病状态 判断疗效 预测复发 早期干预具有重要临床意义多参数流式细胞仪和荧光定量PCR技术的发展显著提高了MRD检测的敏感性和准确性 常用MRD检测技术及其敏感性 FCM技术 白血病细胞可出现异常的免疫表型以及细胞散射光特征的改变FCM检测MRD的原理是对散射光异常或 白血病相关 表型进行检测 可同时定量测定多个参数变化FCM检测MRD的敏感性约在10 3 10 4适用范围广 操作快捷尚未发现真正意义上的白血病细胞特异性抗原 实时定量RT PCR 在PCR中引入了荧光标记分子 通过监测荧光信号的积累来观察整个循环过程 计算PCR产物量不需要PCR后期处理步骤 重复性好 准确可靠保持经典PCR灵敏 快速的特点 克服了传统PCR技术不能准确定量和假阳性污染的缺点 MRD的概念及其检测技术AML患者的MRD检测标志AML患者MRD检测的临床意义 一 免疫标志二 染色体易位和融合基因三 基因突变四 异常表达的AML相关基因 AML患者的MRD检测标志 正常造血细胞在其分化不同阶段的抗原表达受一系列基因严密控制 在一定分化阶段哪些抗原表达及抗原表达量的多少存在着明显的规律性AML细胞可出现白血病相关异常免疫表型 LAIP 非同步抗原同时表达交叉抗原同时表达抗原表达量异常细胞表面与胞浆内抗原同时表达光散射信号改变等 FCM检测LAIP作为MRD标志适用于75 85 的AML和95 的ALL患者一些AML患者的LAIP可见于所有白血病细胞 部分AML的LAIP可仅见于部分白血病细胞大多数情况下初诊时的LAIP 复发时仍可检出FCM检测MRD的敏感性约在10 3 10 4 低于RQ PCR1log 但 5色的MFC可部分弥补这一缺陷LAIP在疾病发展过程中可发生转化 导致假阴性 应用多种抗体组合可减少假阴性 一 免疫标志二 染色体易位和融合基因三 基因突变四 异常表达的AML相关基因 AML患者的MRD检测标志 AML常见染色体异常 单一异常 45 2种异常 55 5 5q 7 7q 8 Y 11 13 21 22 3q26 del 9q t 6 9 t 9 22 等 伴再现性遗传学异常的AML AMLwitht 8 21 q22 q22 RUNX1 RUNX1T1AMLwithinv 16 p13 1q22 ort 16 16 CBFB MYH11APLwitht 15 17 q22 q12 PML RARAAMLwitht 9 11 p22 q23 MLLT3 MLLAMLwitht 6 9 p23 q34 DEK NUP214AMLwithinv 3 q21q26 2 ort 3 3 RPN1 EVI1AML M7witht 1 22 p13 q13 RBM15 MKL1 AMLwithmutatedNPM1 AMLwithmutatedCEBPA 一 免疫标志二 染色体易位和融合基因三 基因突变四 异常表达的AML相关基因 AML患者的MRD检测标志 发生率高在病程中稳定存在突变集中于热点部位目前以NPM1基因A型突变最为常用 基因突变在MRD检测中应用的要求 PHF6基因突变类型 AML患者常见基因突变及其预后意义 NPM1基因突变类型 一 免疫标志二 染色体易位和融合基因三 基因突变四 异常表达的AML相关基因 AML患者的MRD检测标志 异常表达的AML相关基因及其预后意义 MRD的概念及其检测技术AML患者的MRD检测标志AML患者MRD检测的临床意义 一 FCM检测LAIP二 RQ PCR检测遗传学标志 AML患者MRD检测的临床意义 美国西雅图移植中心99例CR1接受同胞相合或无关供体HSCT的AML患者移植前采用10色MFC检测骨髓标本MRD水平75例患者未检出MRD 24例患者检出不同程度MRD0 1 14例评估移植前MRD水平对预后的影响 HSCT前MRD水平对AML患者预后的影响 JClinOncol2011 29 11 1190 1197 2年总生存率 移植前MRD阴性患者显著高于阳性患者 76 6 vs30 2 2年复发率 移植前MRD阴性患者显著低于阳性患者 17 6 vs64 9 移植前MRD水平有助于提示移植预后 JClinOncol2011 29 11 1190 1197 荷兰 英国多中心协作组 94例儿童AML患者68 的患者可检出2个以上LAIP 26 的患者可检出1个LAIP 6 的患者无LAIP FCM检测LAIP在儿童AML患者中的应用 Leukemia 2010 24 1599 1606 随着巩固治疗的进行 MRD的水平呈逐渐降低的趋势 Leukemia 2010 24 1599 1606 诱导化疗后MRD水平可作为判断患者预后的独立因素 不同组别3年无病生存期或总生存期有显著差异 Leukemia 2010 24 1599 1606 一 FCM检测LAIP二 RQ PCR检测遗传学标志 一项406例APL的动态RQ PCR检测结果显示 MRD持续阳性或由阴性转为阳性为APL复发的指证RQ PCR检测PML RARA基因的敏感性为10 3 10 5 分子复发患者PML RARA基因的上升速度约为1log 月PB和BM的对照试验显示 BM检测的敏感性约为PB的1 5倍每隔3个月进行BM的PML RARA检测是理想的MRD检测策略 可提前发现复发迹象 并尽早砷剂治疗 防止血液学复发 RQ PCR检测PML RARA融合基因 JClinOncol2009 27 3650 3658 MRCAML 15方案对APL患者每隔3个月进行BM的PML RARA检测 发现复发迹象后给予砷剂治疗 白血病复发率明显低于未常规进行MRD检测的AML12方案组 JClinOncol2009 27 3650 3658 RQ PCR检测PML RARA融合基因可早期提示APL复发 JClinOncol2009 27 3650 3658 动态RQ PCR检测结果显示 AML1 ETO CBFB MYH11融合基因的表达水平与复发密切相关经过巩固治疗后 在长期缓解的核心结合因子白血病患者中 常可检测到低水平的融合基因转录以104个ABL1基因拷贝作为内参照 AML1 ETO融合基因低于10 12个拷贝预示患者可达长期缓解 RQ PCR检测AML1 ETO CBFB MYH11对早期发现AML复发的意义 Blood2010 115 453 474 不同遗传学背景的AML细胞 其克隆增殖速度和分子水平复发的变化存在较大差异OmmenHB等采用RQ PCR技术对74例伴有分子标志 PML RARA AML1 ETO CBFB MYH11融合基因和NPM1突变 的复发AML患者进行MRD动态监测CBFB MYH11阳性克隆的倍增时间明显长于其他克隆 AML分子水平复发的动态差异 Blood2010 115 453 474 Ommen H B etal Blood2010 115 198 205 RQ PCR检测显示 AML1 ETO CBFB MYH11 PML RARA NPM突变等分子标志在血液学复发前可观察到逐渐升高的趋势 CBFB MYH11白血病克隆的倍增时间 36天 长于AML1 ETO 14天 PML RARA 12天 NPM突变 11天 由于CBFB MYH11相关白血病复发时白血病细胞增殖缓慢 有学者认为PB检测MRD足以提早发现复发迹象 并及时进行干预近期的一项研究对53例AML1 ETO相关白血病患者进行了长期随访 结果显示巩固治疗期间及治疗完成后一年内 每3个月1次MRD检测足以早期鉴别出复发患者 Blood2010 115 198 205 JClinOncol 2010Aug10 28 23 3724 9 AML1 ETO CBFB MYH11 PML RARA等特异性的融合基因是最理想的MRD检测标志RQ PCR技术是检测上述标志的理想手段 WT1是常用于AML患者MRD检测的泛白血病标志有关WT1是否是可行MRD标志仍存在不一致的结论JClinOnco