动物生理学实验二 鱼类采血技术与血细胞生理幻灯片.ppt

实验二鱼类采血技术与血细胞生理 知识回顾 血液 是一种由血浆和血细胞组成的流体组织 由心脏搏动推动在心血管系统中不断循环流动 具有运输 防御和免疫 维持内环境的相对稳定和参与体液调节等多种功能 1 血液组成 2 红细胞脆性与溶血 红细胞具有选择透过性 高渗失水 低渗吸水 低渗条件下或其他原因致使红细胞易破裂导致血红蛋白逸出称溶血 3 实验目的 1 学习鱼类采血的主要方法 掌握鱼类尾柄动脉采血技术 2 了解血液的组成 进一步深刻认识血浆与血清的主要区别 3 观察红细胞在不同浓度生理盐水中的细胞形态 进一步认识红细胞的渗透脆性 4 实验原理 5 6 7 8 9 10 11 实验对象 鲫鱼 实验药品 肝素钠溶液 MS 222溶液 生理盐水 1 0 65 0 3 蒸馏水 仪器与器材 解剖盘1个 毛巾1块 1mL注射器5个 烧杯 200mL 1 5mL离心管 10个 显微镜 载破片5片 滴管2支 拭镜纸 12 实验方法与步骡 1 血液采集 1 实验鱼的麻醉将鲫鱼先放入MS 222溶液的桶中 进行实验鱼的麻醉 当鲫鱼在麻醉剂溶液中缓慢运动或在桶中侧翻时 这时表明麻醉的程度比较适中 13 鱼类麻醉前后对比示意图 14 2 取血的准备将准备好的1mL注射器 一只不作任何处理 一只抽动活塞用肝素钠溶液将注射器内湿润 为血液的采集做好准备工作 15 3 血液的采集注射器的针头从臀鳍基部下针 将针头沿着垂直于尾柄的方向推进 使针头刚好尾部脊柱的下侧 此时保证针头的位置不随意挪动 右手大拇指和食指带动活塞向外运动 经大气压力将血液压入注射器中 16 2 血清 血浆的制备 血清的制备用未经肝素钠溶液处理的注射器所采集的血样 注入离心管后让其静止放置20分钟 待血液凝结后所析出的上清液即为血清 17 血浆的制备经肝素钠溶液处理的注射器所采集的血样 注入离心管后放置1小时 或者3000转 分钟转速下离心5分钟 获得的上层淡黄色液体即为血浆 比较血浆和血清两者存在的区别 18 3 红细胞的渗透脆性 等渗观察用滴管吸0 65 的生理盐水 吸1mL左右滴入1只新的离心管中 再将刚采取的新鲜血液 或去纤维蛋白血 用注射器轻轻推1 2滴到该生理盐水中 待轻轻颠倒混匀后 用吸管滴1滴到载玻片上 放于显微镜下观察细胞的形态 19 渗透失水用滴管吸1 的生理盐水 吸1mL左右滴入1只新的离心管中 再将刚采取的新鲜血液 或去纤维蛋白血 用注射器轻轻推1 2滴到该生理盐水中 待轻轻颠倒混匀后 用吸管滴1滴到载玻片上 放于显微镜下观察细胞的形态 20 渗透吸水用滴管吸0 3 的生理盐水 将1mL左右生理盐水滴入1只新的离心管中 再将刚采取的新鲜血液 或去纤维蛋白血 用注射器轻轻推1 2滴到该生理盐水中 待轻轻颠倒混匀后 用吸管滴1滴到载玻片上 放于显微镜下观察细胞的形态 脆性鉴定再将新鲜血液滴入蒸馏水中 观察细胞的形态 21 注意事项 1 麻醉实验鱼时不要过度麻醉 会对血液的流动产生一定的影响 最终导致采血困难 同时 麻醉的时间也不能过短 否则影响采血操作 2 肝素钠溶液处理注射器时 一定要将注射器内部全部湿润 否则仍可能会产生凝血 22 3 下针的位置有要准 一定要刺到脊柱腹侧 且针头不能轻易变动位置 不然血液很难抽出 若出现位置失误 应该重新再试一次 4 未经肝素钠处理的注射器 抽出的血液要尽快注入到离心管中 避免血液在注射器中凝固 23 5 血液颠倒混匀的过程要轻 不能太剧烈 否则容易导致溶血 6 离心的速度不能太快 否则易导致溶血 24 实验结果 1 描述血浆与血清的主要特点 并说出他们的主要区别 2 描述不同浓度下红细胞的形态结构 以及形成这种结果的原因 3 描述尾柄动脉采血的过程 25 思考与讨论 1 采出的血液很快凝固 这