人教版选修一专题二 课题一 微生物的实验室培养 作业.docx

济南市济钢高中人教版高中生物选修一专题二 课题一 微生物的实验室培养 同步测试一、单选题（共10题；共20分）1.无菌技术包括以下几个方面的叙述，其中错误的是（ ） a.对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌b.将培养器皿、接种用具和培养基等进行灭菌c.为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行d.实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触2.不同的微生物对营养物质的需要各不相同下列有关某种以co2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是（ ） a.co2可以为该微生物提供能源b.水是该微生物的营养要素之一c.无机盐是该微生物不可缺少的营养物质d.氮源物质为该微生物提供必要的氮素3.高温灭菌的的原理是（） a.每种微生物生长的最适温度是一定的b.微生物对于高温环境不适应c.高温破坏了细胞内的蛋白质、核酸，影响其生命活动d.高温降低了环境中氧的浓度4.将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37恒温箱的目的是（ ） a.对比观察培养基有没有被微生物利用b.对比分析培养基上是否生有杂菌c.没必要放入未接种的培养基d.为了下次接种时再使用5.下图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为12345。下列操作方法正确的是（ ） a.操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌b.划线操作须在火焰上进行c.在5区域中才可以得到所需菌落d.在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌6.细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌（） a.接种针、手、培养基b.高压锅、手、接种针c.培养基、手、接种针d.接种针、手、高压锅7.如图是微生物平板划线示意图划线的顺序为1、2、3、4、5下列操作方法正确的是（） a.操作前要将接种环放在火焰旁灭菌b.划线操作须在火焰上进行c.在5区域中才有可能得到所需菌落d.在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环进行灭菌8.有关平板划线操作不正确的是（ ） a.将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红b.接种环在平板上划线位置是随机的c.在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰d.最后将平板倒置，放入恒温箱中培养9.外科手术器械和罐头食品的灭菌，都要以能够杀死什么为标准？（ ） a.球菌b.杆菌c.螺旋菌d.芽孢10.下列有关细菌纯培养的说法，不正确的是（ ） a.实验操作者接种前需用70%的酒精棉球擦手消毒b.每次划线后接种环要在酒精灯火焰上灼烧灭菌c.培养基上的单个菌落都是一个细菌细胞的克隆d.菌液梯度稀释后用涂布法接种，得到单菌落便于计数二、填空题（共2题；共18分）11.将醋酸菌突变体中与耐酸有关的aldh基因导入优良醋酸菌中，选育出高发酵速率、耐酸的醋酸菌，用于果醋生产请分析回答下列问题：（1）对含有aldh基因的dna与质粒用同种限制酶切割后，通过_ 酶连接形成重组质粒 为获得耐酸的醋酸菌，用_法接种于含高浓度醋酸的培养基进行筛选将筛选_ 纯化的菌种用 的方法长期保存（2）图1表示温度尧乙醇浓度对该醋酸菌产酸量的影响醋酸菌能将乙醇转变为_，再将其转变为醋酸研究不同酒精浓度下的最高产酸量时，最好把温度控制为_，如温度过高，醋酸菌代谢缓慢甚至死亡，原因是_酒精发酵后通过出料口检测酒精浓度，将发酵液中酒精浓度调节到_ 左右，才接种醋酸菌，较高的酒精浓度会使产酸量下降，不适宜接种，原因是_（3）为检测发酵过程中醋酸菌数量，将1ml发酵液稀释100倍后，分别取0.1ml稀释菌液均匀 涂布在4个平板上曰经适当培养后，4个平板上的菌落数分别为24、139、140、141，据此可得出每毫升发酵液中的活菌数为_个/ml 12.微生物及其培养：重金属嗜好性细菌在饮用水微污染和应急突发事件中能够用于水污染控制处理获得高纯度、安全、高嗜好重金属的细菌，需要进行系列获取样本及其相关培养的实验实验室选用铅、汞作为重金属实验剂（1）为了较快取得高嗜好重金属的细菌样本，一般选择_的土壤浸出液要提纯理想的菌种样本，研究小组将实验分两步，第一步是培养与提纯高嗜好重金属的细菌；由于这种细菌是用于饮用水的抗重金属污染，因此，第二步必须进行抗生素敏感性检测完成下列有关“培养、获取高纯度、高嗜好重金属细菌”的实验设计思路：配制培养基：（2）分别配制含_不同浓度系列的_态培养基灭菌：（3）采用高温、高压灭菌高温高压灭菌有利于杀死_制备培养平板（培养皿中的培养基）；菌种分离与培养：（4）接种：_然后在适宜的环境中培养菌种选择：（5）选取_菌种备用选取安全性菌种的实验，一般采取抗生素敏感性实验法：（6）对抗生素敏感性越强的细菌安全性越高，其判断理由是_（7）用添加抗生素来筛选对抗生素高敏感的细菌，会由于这些细菌死亡而无法得到，试验时为准确定位和获取对抗生素高敏感的细菌，必须配制_培养基，在实验操作上，可采取先_，然后通过“印章”法来接种到添加抗生素的培养基中培养，以准确定位和获得理想的菌群 三、综合题（共2题；共17分）13.请回答下列有关生物技术实践方面的问题： （1）微生物的培养和鉴别技术是一项基本技术为了从样本中获取细菌的单菌落，可用_法及_法将样本接种于_表面，经过选择培养、鉴別等步骤获得培养基进行灭菌时，应该采用的方法是_为统计样品中活菌的数目，在37培养箱中培养适当时间后形成菌落，一般选择菌落数在_的平板进行计数 （2）泡菜虽然好吃，但其中的亚硝酸盐会危害人体健康亚硝酸盐在特定条件下会转变成_，这是一种致癌物，测定亚硝酸盐含量的原理是在_条件下，亚硝酸盐与显色剂反应，生成玫瑰红色物质正常情况下，随着腌制时间的延长，亚硝酸盐含量的变化趋势是_ 14.重金属嗜好性细菌在饮用水微污染和应急突发事件中能够用于水污染控制处理获得高纯度、安全、高嗜好重金属的细菌，需要进行系列获取样本及其相关培养的实验实验室选用铅、汞作为重金属实验剂 （1）为了较快取得高嗜好重金属的细菌样本，一般选择_的土壤浸出液 （2）要提纯理想的菌种样本，研究小组将实验分两步，第一步是培养与提纯高嗜好重金属的细菌；由于这种细菌是用于饮用水的抗重金属污染，因此，第二步必须进行抗生素敏感性检测完成下列有关“培养、获取高纯度、高嗜好重金属细菌”的实验设计思路： 配制培养基：分别配制含_不同浓度系列的_态培养基灭菌：采用高温、高压灭菌高温高压灭菌有利于杀死_制备培养平板（培养皿中的培养基）；菌种分离与培养：接种：_然后在适宜的环境中培养菌种选择：选取_菌种备用选取安全性菌种的实验，一般采取抗生素敏感性实验法：对抗生素敏感性越强的细菌安全性越高，其判断理由是_ 用添加抗生素来筛选对抗生素高敏感的细菌，会由于这些细菌死亡而无法得到，试验时为准确定位和获取对抗生素高敏感的细菌，必须配制_培养基，在实验操作上，可采取先_ ， 然后通过“印章”法来接种到添加抗生素的培养基中培养，以准确定位和获得理想的菌群 答案解析部分一、单选题1.【答案】a 【解析】【解答】解：a、对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行消毒，a错误； b、为保证不被杂菌污染，应将培养器皿、接种用具和培养基等进行灭菌，b正确；c、酒精灯火焰附近可以形成一个无菌区，为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行，c正确；d、周围物品可能会含有杂菌，为防止污染，实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触，d正确故选：a【分析】实验室中无菌操作的要求一般有：对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行灭菌消毒；将培养器皿、接种用具和培养基等进行灭菌；为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触2.【答案】a 【解析】【解答】解：a、co2属于无机物，不能作为微生物的能源物质，a错误； b、细胞的生命活动离不开水，水是该微生物的营养要素之一，b正确；c、无机盐是该微生物不可缺少的营养物质，c正确；d、氮源物质为该微生物提供必要的氮素，d正确故选：a【分析】培养基的组成成分包括碳源、氮源，水、无机盐，有的还有生长因子，以co2为唯一碳源的培养基培养自养微生物，培养基中还必须提供氮源、水、无机盐3.【答案】c 【解析】【分析】高温杀菌可分为灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。原理是高温破坏了细胞内的蛋白质、核酸，影响其生命活动，灭杀病原菌或特定微生物；答案选c。4.【答案】b 【解析】【解答】解：通过设计对照实验，目的是为了检测培养基制备是否成功，即是否污染了杂菌，如果接种后的培养基和未接种的培养基均有菌落生成，则表示培养基受到污染；如果未接种的培养基上没有菌落生成，则表示培养基没有受到污染 故选：b【分析】微生物培养的关键是无菌操作，为防止杂菌污染培养基，需要将接种后的培养基和一个未接种的培养基（对照组）都放入到37恒温箱中，培养12h和24h后，分别观察并记录结果5.【答案】d 【解析】【解答】进行平板划线操作之前，用将接种环在酒精灯火焰上进行灼烧灭菌，a错误；平板划线操作应在火焰旁进行，不能在火焰上进行；b错误由题图可知，5区域是最后一个区域，有可能在5区域获得所需要的菌落，在4区域也有可能得到所需要的菌落，c错误；在1，2，3，4区域中划线前都要对接种环进行灼烧灭菌，保证每次划线的菌种来自上一区域的末端，5区域划线前都要对接种环进行灼烧灭菌目的是防止杂菌污染，1区域划线后进行灼烧灭菌是防止污染环境及操作者，d正确。【分析】本题主要考查平板划线法的相关知识，意在考查考生对所学知识的理解，把握知识间的内在联系的能力。6.【答案】c 【解析】【解答】解：高压蒸汽气灭菌锅是灭菌的一个设备，通常用于培养基的灭菌；用酒精擦拭双手是消毒的一种方法；火焰灼烧，可以迅速彻底地灭菌，适用于微生物的接种工具，如接种环、接种环等金属用具 故选：c【分析】消毒是指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物消毒方法有煮沸消毒法和巴氏消毒法，此外也使用化学试剂进行消毒，如用酒精擦拭双手等灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子灭菌方法有灼烧灭菌（接种工具：接种环、接种针等）、干热灭菌（如玻璃器皿）和高压蒸汽灭菌（培养基）7.【答案】d 【解析】【解答】解：a、进行平板划线操作之前，用将接种环在酒精灯火焰上进行灼烧灭菌；a错误b、平板划线操作应在火焰旁进行，不能在火焰上进行；b错误c、由题图可知，5区域是最后一个区域，有可能在5区域获得所需要的菌落，在4区域也有可能得到所需要的菌落；c错误d、在1、2、3、4区域中划线前都要对接种环进行灼烧灭菌，保证每次划线的菌种来自上一区域的末端，5区域划线前都要对接种环进行灼烧灭菌目的是防止杂菌污染，1区域划线后进行灼烧灭菌是防止污染环境及操作者；d正确故应选d【分析】阅读题干和题图可知，本题是与平板划线操作有关的题目，先梳理平板划线操作的相关知识，然后结合选项描述分析判断8.【答案】b 【解析】【解答】解：a、将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他的金属用具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，a正确；b、在平板划线时，要划35条平行线，而不是随机的，b错误；c、在挑取菌种前和接种完毕后均要将试管口通过火焰，c正确；d、将平板倒置放在恒温箱，d正确故选：b【分析】平板划线法是指通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种，逐步稀释分散到培养基的表面，最后得到由单个细菌繁殖而来的菌落9.【答案】d 【解析】【解答】解：因食物腐败变质是由于微生物的生长和大量繁殖而引起的根据食物腐败变质的原因，食品保存就要尽量的杀死或抑制微生物的生长和大量繁殖，外科手术器械和罐头食品的都要求无菌而细菌最难以被杀死的结构是芽孢所以，外科手术器械消毒的标准是能够杀死细菌休眠体芽孢为标准故选：d【分析】芽孢是在右下细菌等微生物的生存环境恶劣时形成的抗逆性很强的圆球形或椭球形休眠体食品保存就要尽量的杀死或抑制微生物的生长和大量繁殖，外科手术器械和罐头食品的都要求无菌而细菌最难以被杀死的结构是芽孢10.【答案】c 【解析】【解答】解：a、实验操作者接种前需用70%的酒精棉球擦手消毒，a正确； b、每次划线后接种环要在酒精灯火焰上灼烧灭菌，b正确；c、培养基上的单个菌落都是一个细菌细胞或几个同种细菌的克隆，c错误；d、菌液梯度稀释后用涂布法接种，得到单菌落便于计数，d正确故选：c【分析】1无菌技术的主要内容对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行；实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触2、微生物常见的接种的方法：平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落3、菌落是由单个细菌（或其他微生物）细胞或一堆同种细胞在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见的子细胞群落二、填空题11.【答案】dna 连接 ；平板划线（稀释涂布平板）；甘油管藏；乙醛；35（3035）；温度过高，影响酶的活性（使酶失活）；4%；（较）高浓度的酒精会抑制醋酸菌的生长和代谢；1.4105 【解析】【解答】解：（1）用基因工程选育醋酸菌时，对含有aldh基因的dna与质粒用同种限制酶切割后，通过基因针线即dna连接酶形成重组质粒常用平板划线法或稀释涂布平板法接种并筛选耐酸的醋酸菌用甘油管藏法将纯化的菌种长期保存（2）醋酸菌能进行有氧发酵将乙醇转变为乙醛，在氧化为醋酸图1中醋酸菌的最适发酵温度是35，所以最好把温度控制为35（3035）如温度过高，影响酶的活性，导致醋酸菌代谢缓慢甚至死亡图2中乙醇浓度为4%时醋酸菌的产酸量最高，所以解析果醋发酵时需要将发酵液中酒精浓度调节到4%左右才接种醋酸菌否则高浓度的酒精会抑制醋酸菌的生长和代谢，导致产酸量下降（3）进行菌落计数时需要选择每个平板菌落数在30300之间的平板进行统计计数，为避免误差，应当选择3个或三个以上的平板进行计数并去平均值，故每毫升发酵液中的活菌数为（139+140+141）30.1100=1.4105个/ml【分析】本题是运用基因工程技术选育选育出高发酵速率、耐酸的醋酸菌，用于果醋生产据图分析：图1中醋酸菌的最适发酵温度是35，图2中乙醇浓度为4%时醋酸菌的产酸量最高据此分析作答12.【答案】受金属污染或重金属含量高；汞、铅； 固；细菌与芽孢；用接种针取一定量的菌样，采取分区划线法接种在培养基上；高浓度重金属培养基中的大菌落；对抗生素敏感度越高，细菌越容易被抗生素灭活，有利于保护人体健康；不含抗生素的对照；在对照培养基中进行接种、培养 【解析】【解答】解：（1）为了得到重金属嗜好性细菌，一般选择受金属污染或重金属含量高的土壤浸出液（2）应选用选择培养基分离、提纯理想的菌种样本需要分别配制含汞、铅不同浓度系列的固态培养基（3）在此实验中要注意无菌操作，避免杂菌的污染，采用高温、高压灭菌高温高压灭菌有利于杀死细菌与芽孢（4）可采用平板划线法接种：用接种针取一定量的菌样，采取分区划线法接种在培养基上然后在适宜的环境中培养（5）选择培养基分离并选取高浓度重金属培养基中的大菌落菌种备用（6）由于对抗生素敏感度越高，细菌越容易被抗生素灭活，有利于保护人体健康，因此对抗生素敏感性越强的细菌安全性越高（7）用添加抗生素来筛选对抗生素高敏感的细菌，试验时为准确定位和获取对抗生素高敏感的细菌，需要配制不含抗生素的对照培养基，在实验操作上，可采取先在对照培养基中进行接种、培，然后通过“印章”法来接种到添加抗生素的培养基中培养，以准确定位和获得理想的菌群故答案为：（1）受金属污染或重金属含量高（2）汞、铅 固（3）细菌与芽孢（4）用接种针取一定量的菌样，采取分区划线法接种在培养基上（5）高浓度重金属培养基中的大菌落（6）对抗生素敏感度越高，细菌越容易被抗生素灭活，有利于保护人体健康（7）不含抗生素的对照 在对照培养基中进行接种、培养【分析】实验中要注意无菌操作，避免杂菌的污染，应选用选择培养基分离得到1、实验室常用的灭菌方法：灼烧灭菌：将微生物的接种工具，如接种环、接种针或其他金属工具，直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧，可以迅速彻底地灭菌，此外，在接种过程中，试管口或瓶口等容易被污染的部位，也可以通过火焰燃烧来灭菌；干热灭菌：能耐高温的，需要保持干燥的物品，如玻璃器皿（吸管、培养皿）和金属用具等，可以采用这种方法灭菌；高压蒸汽灭菌：将灭菌物品放置在盛有适量水的高压蒸汽灭菌锅内，为达到良好的灭菌效果，一般在压力为100 kpa，温度为121的条件下，维持1530 min2、培养基配制时的注意事项：全程要求无菌操作，无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还能有效地避免操作者自身被微生物感染培养基灭菌后，需要冷却到50左右时，才能用来倒平板可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，当感觉到锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板操作时应使锥形瓶的瓶口通过火焰，以防止瓶口的微生物污染培养基平板冷凝后皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，若将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染在倒平板的过程中，不能将培养基溅到皿盖与皿底之间的部位，因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生三、综合题13.【答案】（1）平板划线；稀释涂布；固体培养基；髙压蒸汽灭菌法；30300（2）亚硝胺；盐酸酸化；先增加后减少，然后基本不变 【解析】【解答】解：（1）为了从样本中获取细菌的单菌落，可用平板划线法及稀释涂布法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴別等步骤获得培养基进行灭菌时，应该采用的方法是髙压蒸汽灭菌法为统计样品中活菌的数目，在37培养箱中培养适当时间后形成菌落，一般选择菌落数在30300的平板进行计数（2）亚硝酸盐在特定条件下会转变成亚硝胺，这是一种致癌物，测定亚硝酸盐含量的原理是在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与显色剂反应，生成玫瑰红色物质发酵初期，由于硝酸盐还原菌的活动，亚硝酸盐含量有所增加；发酵中期，由于硝酸盐还原菌受抑制，同时形成的亚硝酸盐又被分解，因而亚硝酸盐含量下降所以在整个发酵过程中，亚硝酸盐含量的变化趋势是先增加后减少，然后基本不变【分析】1、微生物常见的接种的方法平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落2、泡菜的制作原理泡菜的制作离不开乳酸菌在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸3、测定亚硝酸盐含量的原理在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与n1萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测对比，可以大致估算出亚硝酸盐的含量14.【答案】（1）受金属污染或重金属含量高（2）汞、铅；固；细菌与芽孢；用接种针取一定量的菌样，采取分区划线法接种在培养基上；高浓度重金属培养基中的大菌落；对抗生素敏感度越高，细菌越容易被抗生素灭活，有利于保护人体健康；不含抗生素的对照；在对照培养基中进行接种、培养 【解析】【解答】解：（1）为了得到重金属嗜好性细菌，一般选择受金属污染或重金属含量高的土壤浸出液（2）应选用选择培养基分离、提纯理想的菌种样本需要分别配制含汞、铅不同浓度系列的固态培养基（3）在此实验中要注意无菌操作，避免杂菌的污染，采用高温、高压灭菌高温高压灭菌有利于杀死细菌与芽孢（4）可采用平板划线法接种：用接种针取一定量的菌样，采取分区划线法接种在培养基上然后在适宜的环