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文档简介
实验11植物的组织培养 第四部分浅尝现代生物技术 1 进行菊花的组织培养2 尝试植物激素的应用3 说明植物组织培养的原理 学习目标 1 植物组织培养的原理 基础知识 概念 指在无菌和人为控制的条件下 将离体的植物器官 组织 细胞 培养在人工配制的培养基上 给予适宜的培养条件 诱导其产生愈伤组织 丛芽 最终形成完整的植株 原理 细胞的全能性 2 全能性的原因 生物体的细胞 具有使后代细胞形成完整个体的能力 离体 营养物质 激素和其他外界条件 植物细胞表现全能性条件 3 细胞分化概念 实质 个体发育中细胞在形态 结构和生理功能上出现稳定性差异的过程 在特定的时间和空间条件下 基因的选择性表达 4 脱分化与再分化脱分化再分化 高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程 愈伤组织继续进行培养重新分化成根或芽等器官的过程 愈伤组织 细胞排列疏松而无规则 是高度液泡化的 呈无定形状态的薄壁细胞 培养基需具备五大类营养要素大量元素 n p s k ca mg等微量元素 b mn cu zn fe mo i co等有机成分 甘氨酸 烟酸 肌醇 维生素 蔗糖等 5 ms培养基 主要是生长素和细胞分裂素植物激素和人工合成的植物激素 6 植物激素 每一种激素的使用量 不同激素的配比 植物激素的配比 植物组织培养的过程 实验操作 菊花的组织培养步骤 无菌环境一定的温度一定的光照含有全部营养成分的培养基适量空气适合的ph植物激素比例合适适宜的外植体 植物组织培养的条件 防止外植体带菌 保证培养基及接种器具彻底灭菌 严格遵守无菌操作规程 ms培养基 细胞分裂素和生长素 适时 污染途径 1 培养基的灭菌 高压蒸汽灭菌 2 外植体的消毒 酒精 氯化汞 3 接种的无菌操作 酒精 酒精灯 灼烧 4 无菌箱中的培养 5 移栽到消过毒的环境中生存一段时间 在整个操作过程中 实现无菌环境的途径 结果分析与评价 1 接种3 4d后 观察外植体的生长情况 统计多少外植体被污染 多少能正常生长 分析被污染原因 2 是否完成脱分化和再分化 3 是否进行统计 对照与记录 4 生根苗移栽是否合格 考点1植物组培的原理和形式 1 植物组织培养的原理是细胞的全能性 2 植物组织培养有两种形式 愈伤组织培养 固体培养基 和细胞悬浮培养 液体培养基 3 植物组织培养要经过脱分化和再分化 考点2组培的操作细节与原理 1 常用植物激素 1 生长素类天然的 吲哚乙酸 iaa 4 氯吲哚乙酸等人工合成的生长素类似物 吲哚丙酸 ipa 吲哚丁酸 iba 萘乙酸 naa 2 4 d 2 细胞分裂素类天然的 玉米素等人工合成的 激动素 kt 苄基腺嘌呤 ba 天然激素含量低 获取难 而且植物体内含降解此类激素的酶 所以为了保证作用时间 达到作用效果 一般采用人工合成的类似物 2 ms培养基ms培养基有几十种成分 所以一般都采用配制浓度是实际溶液浓度的5 10倍的浓缩液 即母液 配制母液的注意事项 1 勿用自来水配制母液 2 应将每种化合物单独溶解后 再一一混合 为避免发生沉淀 最后加入的是氯化钙溶液 3 若母液中出现絮状物 表明离子之间发生反应 需要重新配制母液 4 植物生长调节剂难溶于水 需要碱或酸助溶 一般生长素类物质用碱或酒精助溶 细胞分裂素类物质用酸助溶 加入蒸馏水定容时要缓慢 课堂小结 菊花组织培养 基础知识 实验操作 植物体的组织培养 影响组织培养的因素 细胞分化细胞全能性组织培养过程 营养激素环境条件 ms固体培养基制备外植体消毒 接种 培养 移栽 栽培 1 植物组织培养过程中的脱分化是指 a 植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞b 未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程c 植物的器官 组织或细胞通过离体培养产生愈伤组织的过程d 去植物的枝芽培育成一株新植物的过程 c 随堂练习 2 下面关于植物组织培养的叙述 正确的是 a 叶肉细胞脱分化后可形成无定形状态的薄壁细胞b 叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织c 通过植物组织培养 可培育出性状更优良的品种d 植物体的任何一个体细胞经离体培养都表现出全能性 a 3 下列关于影响植物组织培养因素的说法正确的是 a 不同植物组织培养的难易程度不同 同一种植物材料培养的难易程度相同b 在植物组织培养中 培养基中必须添加植物激素c 植物激素中生长素和细胞分裂素的作用是相互独立的d ph 温度 光照条件等对植物组织培养也特别重要 b 4 植物细胞表现出全能性的必要条件是 a 给予适宜的营养和外界条件b 导入其他植物细胞的基因c 脱离母体后 给予适宜的营养和外界条件d 将成熟筛管的细胞核移植到去核的卵细胞内 c 5 在植物组织
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