Prochymal治疗GvHD

干细胞药物-Prochymal,美国：2,加拿大：1,比利时：1,澳大利亚：1,韩国：3,国际上获批的8种干细胞药物,国际上获批的8种干细胞药物,Prochymal,Prochymal-Osiris,Prochymal（美国）,商品名： Prochymal（孤儿药）生产商： 美国Osiris活性成分： 异体骨髓来源间充质干细胞适应症： 新诊断的I型糖尿病批准日期： 2010年5月批准机构： 美国食品与药品监管理局FDA,Prochymal（加拿大）,商品名： Prochymal 生产商： 美国Osiris 活性成分： 异体骨髓来源间充质干细胞 适应症： 儿童急性重症GvHD(6月到17岁) C/D级急性GvHD以及累积内脏的B级GvHD 批准日期： 2012年5月 批准机构： 加拿大健康监管部门 仍在开发: 急性放射性损伤、肺损伤修复，肺动脉疾病；,产品主要特征：成分：异基因骨髓来源间充质干细胞细胞活力: 70%表面分子: CD105,CD166阳性; CD45阴性;活性: TNF RI表达108pg/ml IL-2R表达抑制30%产品辅料：10%DMSO，5%HSA，Plasma-Lyte-A,Prochymal,细胞制备： 采集异基因志愿者骨髓来源间充质干细胞,体外培养,收获; 制成100*106个细胞/15ml的冷冻细胞悬液; 使用前稀释到2.5*106/ml的静脉输液； 应用前准备： 37水浴3-5分钟，融化； 将融化的Prochymal注入装有25ml勃脉力A缓冲液的稀释袋，根据用量选择加入的Prochymal的量； 5小时内用完；,Prochymal,临床应用： 临床应用前： 输入Prochymal前30-60分钟前应用氢化可的松或者苯海拉明，防止输液过敏反应； 剂量： 2*106hMSCs/kg体重静脉滴注（一袋适用50Kg）； 初始治疗：一周两次，连续四周（间隔三天），评估是否需要继续治疗； 继续治疗：如果初始治疗出现部分效果，进行继续治疗；一周一次，连续四周； 复发：如果出现复发，再进行一个疗程，从初始治疗开始；,Prochymal,可能的副作用： 感染： 最常见，包括一些干细胞制剂常规检测的病原； 肺毛细血管堵塞： 动物实验证明，大剂量会堵塞肺部毛细血管； 建议输液时检测动脉氧分压； 过敏：对干细胞制剂生产过程中使用的猪源或者牛源蛋白过敏；安全性试验发现试验组和对照组之间副作用概率没有统计学意义的差异。,Prochymal,作用机制和GvHD,GvHD(移植物抗宿主病)：,移植物抗宿主反应是一种特异的免疫现象，是由于移植物组织中的免疫活性细胞与免疫受抑制的、组织不相融性抗原受者的组织之间的反应。因此，GVHD的发生必须具备以下条件;,1.移植物必须具有免疫活性的淋巴细胞;2.宿主必须含有移植物中所没有的组织相容性抗原，因此宿主对移植物来说是异己的;3.宿主必须无力对移植物发动一个有效的免疫攻势;,GVHD是骨髓移植的主要障碍，也是骨髓移植后主要并发症和死亡原因。,急性GVHD一般发生在骨髓移植后3个月内，多见于移植后3-4周，其主要病变是皮肤、肝脏和消化道细胞坏死，严重时可引起广泛的肠道黏膜和皮肤脱落，对真菌和细菌感染的易感性增高，从而发生致病性感染。急性GVHD的典型临床表现是皮疹、小肠结肠炎伴腹泻、肝功能紊乱伴黄疸和发热。,GvHD分级：,C/D级急性GvHD以及累积内脏的B级GvHD,180天存活率,71%,69%,31%,GvHD的常规治疗：,首选常规用药（primary）：-级：局部用激素；中度到重度： 口服或静脉输液激素；,次选用药（secondary）：,Prochymal的作用机制：,Newman et al .Inflammation & Allergy - Drug Targets, 2009, 8, 110-123,Prochymal的作用机制：,MSC能够抑制异常的免疫活动，但是没有发现过度抑制引起的毒性。,临床前研究,归巢试验：,输液后数小时内血液中检测不到；输液后几分钟内，主要分布在肺部（肺毛细血管太狭窄的结果）；输液后24小时，细胞主要在肺部，少量在肝脏、肾脏、脾脏中；输液后48小时，在肺部和肝脏的数量均等；,毒性试验：,单次注射最大量（大鼠）：无症状最大注射量：40*106/kg，最大耐受量：65*106/kg；重复累积剂量（大鼠）：80*106/kg；反复注射6个月后的狒狒仍然健康，免疫系统没有受到损伤；基因毒性和成瘤性：2年试验，没有发现任何异常；裸鼠成瘤和异位组织生成：6周裸鼠成瘤试验阴性，12个月试验没有发现任何肿瘤和异位组织；,有效性试验（狒狒）：,先给狒狒注射安慰剂或Prochymal;然后给与Con A、异基因外周血单核细胞;接受了Prochymal的狒狒，对异体移植的抗原反应明显下降；接受了Prochymal的狒狒，对Con A的反应没有下降，维持整体免疫球蛋白水平；,Prochymal抑制了狒狒对异体移植物（抗原）的细胞反应，但不影响整体的免疫应答功能和水平。,Prochymal临床试验,Prochymal治疗急性GvHD: Protocol260/261(期)Prochymal挽救普通治疗无效型GvHD:Protocol270(期)Prochymal治疗激素无效的GvHD:Protocol280(期)Prochymal联合激素治疗GvHD: Protocol265(期)Prochymal治疗激素无效的急性GvHD儿童:Protocol275Prochymal治疗激素无效的急性GvHD成人:Protocol276,Protocol-260招募：33人； 时间：Feb 2005Jul 200828天期随机临床试验，用来衡量安全性和有效性；双臂：2million细胞/kg体重 8million细胞/kg体重第一天、第四天静脉注射prochymal，每天维持静脉注射甲泼尼龙2mg/kg，或者口服强的松2.5mg/kg。受试者继续服用全治疗剂量环孢素、他克莫司、MMF;,Prochymal治疗急性GvHD(期),Protocol-261对prochymal安全性的2年随访；,入组标准：受试对象必须在18-70岁之间；如果是女性并且处于生育年龄段，必须非怀孕和非哺乳状态，并且需要采取节育措施，男性也必须采取节育措施；受试者必须是刚刚被诊断为到级急性GvHD急需治疗，不需要用组织活检确诊GvHD，但必要时会建议受试者，活检结果不能延迟入组；受试者必须是先后接受了完全或强度减低的清髓术和来源于骨髓、外周血、脐血包括供体淋巴细胞输注的异体造血干细胞移植；受试者必须拥有最基础的肝肾功能，定义为： Cockroft-Gault 公式计算有效肌酐清除率30mL/分钟；受试者必须在用药后28天试验节点接受所有特定的评定；受试者必须提供签字的知情同意，以及授权试验组使用保密保护的健康信息；,排除标准：受试对象之间接受过到级急性GvHD 的其他治疗；受试对象在接受Prochymal治疗之前接受过超过天的2mg/kg/day的甲泼尼龙治疗；受试对象在六个月内有过无法控制的酒精或其它物品滥用成瘾；受试对象在30天内使用过其它处于开发阶段的药物（未经FDA批准进入市场），受试对象在28天试验周期内也不得使用其他开发阶段的药物；研究人员认为受试对象的某种当前或者潜在状况会影响对受试者评定；受试对象有不稳定的心律失常；受试对象不愿意参加长期随访项目也就是protocol-261；受试对象对牛源和猪源产品过敏；受试对象接受过针对实体瘤治疗的移植；,主要结果衡量：Protocol 260 28天总体有效（overall response）,包括完全有效（complete response）和部分有效（partial response）;Protocol 261 为安全性试验随访病人，2年内在protocol-260试验中各剂量组的各种副作用的发生率；,次要结果衡量：Protocol 260 第1天GvHD症状中有损害的一个或多个器官在第28天有部分改善； 最佳改善表现的时间点； 单或多器官改善的时间；Protocol 261 90天存活人数；,Protocol 280招募：244人（28名儿童）； 时间：Jul 2006May 2010期随机双盲临床试验，平行对照，衡量治疗安全性和有效性； 双臂：每次注射: 2million MSC/kg体重 安慰剂（没有细胞的赋形剂）每周2次注射，共注射4个周，次与次之间间隔超过3天;临床试验在维持常规治疗的基础上;,Prochymal治疗激素治疗无效的GvHD,入组标准：受试对象必须在6个月-70岁之间；受试对象对激素治疗无效; 对激素无效的定义是B-D级急性GvHD表现出: 接受甲泼尼龙治疗3天至2周没有改善,剂量大于等于1mg/kg/day，或相当量；受试者在四天随机化过程中需要接受治疗，紧急情况下可以启动次选治疗，但在随后三天内必须接受prochymal注射；在随机化之前提升过激素剂量的对象可以入组，提升剂量不作为次选治疗；受试者必须拥有最基础的肝肾功能，定义为： Cockroft-Gault 公式计算有效肌酐清除率30mL/分钟；对于儿童受试者利用Schwartz方程计算；如果是女性并且处于生育年龄段，必须非怀孕和非哺乳状态，并且需要采取节育措施，男性也必须采取节育措施；受试者在入组时的卡氏评分不低于30分；受试者必须能提供亲手签字的知情同意书；,排除标准：受试对象在随机化的24小时之前接受过备选治疗；受试对象接受过激素以外的首选治疗药物治疗急性GvHD；受试对象正在参加CTN protocol 0302;研究人员认为受试对象的某种当前或者潜在状况会影响对受试者评定，未控制的感染、心脏衰竭、肺动脉高压；受试对象在30天内使用过其它处于开发阶段的药物（未经FDA批准进入市场），受试对象在28天试验周期内也不得使用其他开发阶段的药物；受试对象对牛源和猪源产品过敏；受试对象接受过针对实体瘤治疗的移植；,主要结果衡量：28天之前，或者28天的完全有效；,次要结果衡量：第一次注射后180天的存活人数；,Protocol 275/Protocol 276儿童：2个月17周岁 75个受试者 59有效统计成人：18周岁70周岁 120个受试者 单臂：每次输入2million MSC/kg体重每周2次，连续4周；,Prochymal治疗激素无效的急性GvHD儿童/成人,入组标准：2个月-17周岁之间;受试者为对激素治疗没有反应的B-D级GvHD;受试者对猪源或者牛源蛋白酶有过敏反应;受试者没有针对实体瘤的移植治疗;受试者没有胸腔积液渗出,没有弥漫性肺泡出血;没有需要通过面罩吸氧超过2L每天,或超过28%的浓度来维持92%以上的血氧饱