乌龙头的培养

The Effect Of 2 2 4 4 D D N NA AA A 6 6 B BA A O On n A Ar ra al li ia a s Callus Abstract Aralia Araliaceae woody plants common name also known as needling old bract crateva unilocularis gill Aralia and so on Aralia has developed as a potential new plant has aroused extensive research the study of its rich nutritional value and medicinal value With different concentrations of 2 4 D NAA 6 BA combination induced the formation of a callus Aralia Optimum ratio of hormone Key words Aralia Tissue culture hormone concentration callus 1 前言 前言 楤木 Aralia chinensis L 为五加科木本植物 俗名又称 刺老苞 树头菜 刺龙牙 等 1 2 楤木属全世界共有40余种 大多数分布在亚洲和北美 我国广泛分布28种 3 我国主要分布在东北 云南 甘肃的陇南 天水等地 4 据不完全统计 我国常见木本蔬菜约100多种 5 我国楤木属主要种类可列表如下 1 中国产楤木属种类 6 中文名别名拉丁名产地 楤木飞天蜈蚣 鸟不宿 五龙头等 Aralia chinensis L 特产中国 主要分布西北 华北 长江流域及以南山 区 辽东楤 木 龙牙楤木 刺龙牙 刺老鸦 A elata Miq Seem产河北东北部 东北地区 及青岛崂山 黄毛楤 木 刺龙苞 鸟不企 大鹰不扑 A decaiseneana Hance 产云南 贵州 广西 湖 南等地 棘茎楤 木 红楤木 鸟不宿 红刺党等 A echnocaulis Hand Mazz 产长江流域及以南各省 长刺楤 木 刺叶楤木 雷公木 鹰不扒 A spnifolia Merr产福建 广东 江西 浙 江等 太白楤五龙头 刺苞头A taibaiensis 产云南 四川 陕西 甘 木Z Z Wang et H C Zheng 肃 宁夏等地 长白楤 木 东北土当归 九眼 独龙 A continentalis Kitagawa 产吉林 辽宁等地 食用土 当归 水白芷 川土当归A cordata Thunb分布长江流域以南及甘肃 陕西 河北 河南 北京 等地 楤木具有很高的食用价值 随着世界范围内人们生活水平的不断提高 人 们对食品营养的重视也越来越大 现代工业科技进步之下同样也引起了食品安 全与营养的巨大问题 近年来安全问题频频出现 也引起了人们对食品安全的 重视和营养的研究 楤木做为木本蔬菜中的一种因其野生在林缘地区 不施农 药 化肥 又远离工矿城市 空气 土壤又无污染 故称绿色食品 楤木芽菜 味清香 爽口 尤其是在全遮光条件下生产出来的芽菜 芽苞开绽后称芽菜 其风味不但仍能保持芽苞自然状态下的特色 而且风味更加细嫩 鲜美 更适 合初食者的口味 7 楤木不仅具有很大的食用价值而且具有药用价值 据报道 楤木芽体内的 总皂甙和锗的含量分别是人参的 2 8 倍和 3 6 倍 8 楤木属药用主要是其根皮 具有祛风除湿 利尿消肿 活血止痛 疏肝解郁 温中和胃之功效 主要用于 治疗风湿痹痛 跌打损伤 肝炎 疮痈等 民间还用于小儿豆疹 干咳等 现 已发现其为高含量的齐墩果酸资源植物 从中提取的齐墩果酸已用于治疗肝炎 及中毒性肝损伤 9 10 楤木处于野生状态 而且分布零散 生长量低 给这一野生资源的开发利 用造成了一定的困难 目前很多研究人员已经对楤木属的一些种类的繁殖做了 初步的研究 可参照表 2 2 楤木繁殖研究 11 14 繁殖研究进展楤木属种类 常规培育组织培养 播种育苗 种子的采集 与处理 催芽与播种 实验表明 MS NAA0 01mg L 处理 对愈伤组织诱导 分化效果较好 辽东楤木 根段繁殖诱导成苗培养基为 MS NAA0 02mg L 6 BA0 5mg L 生根培养基为改进的 MS NAA0 01mg L IBA1 5mg L 长白楤木 在国内 科研人员仅对长 白楤木的常规栽培技术 选地 整地 育苗 移 栽 田间管理 采收加工 作了有限的研究 确定了腋芽途径最佳初始培养基 MS 6 BA1 5mg L 2 4 D1 0mg L 分化培养基为MS 6 BA2 0mg L NAA0 2mg L IAA0 2mg L 生根 培养基为1 2MS NAA0 02mg L 和 1 2MS IBA0 5mg L 黄花楤木 用 ABT 生根剂不同浓度对 硬枝 嫩枝及根进行处理 后扦插育苗试验 结果表 明 黄花楤木 1cm 以上的 根用 ABT 生根剂浓度为 100mg kg 处理 5 8 h 生根率最高 可达 58 3 0 5 1cm 生根率一 般 0 5cm 以下的生根 率最低 硬枝扦插生根率 仅为 3 4 嫩枝扦插未 有生根现象 暂无 龙牙楤木 种子繁殖 根蘖苗繁殖 插条扦插 根段扦插 诱导培养基 MS 6 BA1 5mg L IAA0 1 0 5mg L 分化培养基 MS 6 BA1 6mg L 2 4 D1 6mg L IAA0 1 0 6mg L 在甘肃天水林区 陇南山地 漳县阴湿山区 也广泛分布有 楤木 其与 其它林木混生 喜连片生长 浑身长满小刺 是礼县山林地区所产的药 菜 两用的名贵野菜 同样有很大开发潜能 但目前还没有人对乌龙头的繁殖做 以研究来使其进行规模化栽植 本实验对天水当地的野生楤木 乌龙头 进行组培实验 初步探索不同激素浓度搭配 对楤木组培中诱导愈伤组织的影 响并找出最适激素浓度搭配 2 材料 材料 2 12 1 供试材料 供试材料 楤木嫩芽 采自天水当地 2 22 2 实验用品 实验用品 超净工作台 上海智域分析仪器制造有限公司 PH 仪 雷磁 PHS 3D 编号 600606060025 上海精密科学有限公司 酒精灯 镊子 手术刀 电子天平 玻璃棒 容量瓶 灭菌锅 培养瓶 或培养皿 封口膜 培养箱 胶头滴管等 2 32 3 实验药剂 实验药剂 2 4 二氯苯氧乙酸 2 4 D 2 4 Dichlor ophenoxy acetic acid 98 上海生工生物 萘乙酸 NAA 北京双旋微生物培养基制品厂 6 苄基嘌呤 6 BA 6 Ben Zylamino purine 99 上海生工生物 大量元素 微量元素 铁盐 维生素氨基酸等 三 实验处理与方法三 实验处理与方法 2 12 1母母液液 母母液液 母母液液 及及母母液液 的的配配置置 各种营养成分的用量 除了母液 为 20 倍浓缩液外 其余的均为 200 倍浓 缩液 上述几种母液都要单独配成 1 L 的贮备液 2 22 2激激素素的的配配置置 1 2 4 二氯苯氧乙酸 2 4 D 1 mg mL 2 萘乙酸 NAA 0 2 mg mL 3 6 苄基嘌呤 6 BA 1 mg mL 都定容与 100 mL 的容量瓶中待用 2 32 3培培养养基基的的配配置置与与灭灭菌菌 本本实实验验采采用用 M MS S 基基本本培培养养基基 加入琼脂煮沸后吸取 母液 为 50 mL 母液 A 和 B 各 5 mL 最后加蒸馏水定容至 1000mL 搅拌均匀 调 PH 用滴管吸取物质的量浓 度为 1 mol L 的 NaOH 溶液 逐滴滴入溶化的培养基中 边滴边搅拌 并随 时用 PH 仪测培养基的 pH 一直到培养基的 pH 为 5 8 为止 2 3 12 3 1倒培养基 倒培养基 本次实验探究不同激素浓度对楤木愈伤组织的影响 采用一个梯度三个 重复 所以用 200 mL 的烧杯按表 3 加入三种激素 采用 3 3 4 组合 然 后倒入培养基至 200 mL 后分装入 3 个培养瓶中 激素浓度设置参照文献 15 2 42 4培培养养基基灭灭菌菌 培养基的灭菌采用高压蒸汽灭菌 121 0 105MPa 15 20min 在灭 菌时对接种用的手术刀 镊子 蒸馏水也进行统一灭菌 2 52 5 接种 接种 无菌室要进行甲醛熏蒸灭菌 接种前先打开无菌操作台上的紫外灯灭菌 20 分钟后方可进行接种 用天水楤木嫩芽作为外植体 一般直径大小为1 2cm 将嫩芽水洗净后 先 用 70 乙醇浸泡 30s 再用 0 1 升汞消毒 7 10min 用无菌水冲洗外植体三 次 至表面基本无消毒液 然后切取乌龙头嫩芽分生组织部分厚约2mm 然后再将其切成 6 份 保留其分生组织 进行移接并编号 每种激素搭配做 3 个重复 将盛有外植体的培养瓶放入培养箱培养 培养条件为 光强2000lux 温 度 25 12h 光照 3 实验结果与分析 实验结果与分析 表格 3 编号2 4 D mg L NAA mg L 6 BA mg L 接种数出愈率重复次数 10 50 51 0153 20 50 51 5153 30 50 52 0153 40 51 01 0153 50 51 01 5153 60 51 02 0153 70 51 51 0153 80 51 51 5153 90 51 52 0153 101 00 51 0153 111 00 51 5153 121 00 52 0153 131 01 01 0153 141 01 01 5153 151 01 02 0153 161 01 51 0153 171 01 51 5153 181 01 52 0153 191 50 51 0153 201 50 51 5153 211 50 52 0153 221 51 01 0153 231 51 01 5153 241 51 02 0153 251 51 51 0153 261 51 51 5153 271 51 52 0153 282 00 51 0153 292 00 51 5153 302 00 52 0153 312 01 01 0153 322 01 01 5153 332 01 02 0153 342 01 51 0153 352 01 51 5153 362 01 52 0153 4 结论结论 参考文献 1 李继红 董晓东 楤木的繁殖技术研究 J 中国野生植物资源 2003 22 3 50 51 2 代永彬 发展穗木巩固鲁甸县退耕还林工程成效 J 林业调查规划 2004 124 126 3 姜 鸑 姜 新 楤木属植物研究现状与展望 J 河北农业科学 2008 12 5 87 90 4 文 军 中国五加科楤木属一些分类群的订正 N 植物分类学报 2000 38 1 1 9 5 王国良 闫小红 日本无刺楤木离体茎段人工促成产芽技术 N 南京林业大学学报 2006 30 1 61 64 6 任风芝 栗新慧 屈会化 楤木属植物化学成份及药理活性研究进展 J 广州化工 2000 28 4 124 130 7 于生林 楤木开发利用大有前途 J 林业科技 2002 35 8 王国良 张 敏 闫小红等 日本无刺楤木促成芽营养成分的比较研究 J 江苏林业科 技 2006 33 6 6 9 9 雷志钧 周日宝 楤木根皮的生药学研究 N 湖南中医药导报 2001 5 2 87 88 10 王忠壮 靳守东 全山丛等 楤木属植物药食兼用嫩芽营养成分分析 N 营养学报 1999 21 1 100