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文档简介

1 操作台基本要求 2 随着传代次数的增加 连续培养细胞系遗传物质不稳定 不得将细胞存放于 20 或 80 冰柜中 因为细胞存在次低温条件下活力迅速降低 3 细胞污染 1 细菌污染 2 酵母污染 3 霉菌污染 初期 PH 值维持稳定 污染严重后 PH 值迅速升高 导致培养基浑浊 4 病毒污染 一般不会对与其宿主物种不同的细胞培养物造成不良影响 通过电子显微镜检 查 一组抗体的免疫染色 ELISA 实验或者采用适当病毒引物的 PCR 技术可以检 测出细胞为病毒污染 5 支原体污染 唯一检测支原体污染的方法是采用荧光染色 ELISE PCR 免疫染色 放射自 显影 4 抗生素只能作为对付污染的最后手段而且只能短期使用 并应尽快撤出 5 适合贴壁的细胞和悬浮的细胞 6 基础培养基 减血清培养基 无血清培养基 7 PH 值 大多数正常哺乳动物细胞系 PH 为 7 4 成纤维细胞系适合轻度偏碱 pH7 4 7 7 Sf9 和 sf21 等昆虫细胞系最适合在 PH 值为 6 2 的环境中生长 8 温度 大多数人和哺乳动物细胞系在 36 至 37 最佳 昆虫细胞在 27 为最佳 禽类细胞在 38 5 最佳 冷血动物 15 26 9 动物细胞形态划分 成纤维细胞 贴附生长 上皮样细胞呈多角形 贴附 淋巴母细胞样细胞呈球形 不贴附 特殊形态 I 型有长突触 型没有轴突 10 细胞增长模式 11 何时传代 哺乳动物 生长的 PH 值通常表示乳酸储积 且有毒性 当 PH 迅速降低 0 1 0 2PH 单位 同时细胞浓度增大 则应对细胞进行传代 昆虫细胞 PH 值会上升但不超过 6 4 12 贴壁细胞的解离 13 贴壁细胞的传代 14 贴壁昆虫细胞传代 15 悬浮细胞传代流程 16 细胞冻存
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