荧光分析测定维生素cppt课件

维生素c、维生素c和维生素c的荧光分析测定原理，维生素c实验的荧光分析，维生素c应用的荧光分析，解说员：赫正宣，I，维生素c，维生素c的测定原理，1.1维生素c是维持身体正常生理功能(也称为抗坏血酸)的重要维生素之一，人类不能自行合成，只能从食品和药物中摄取，1.2维生素c测定方法维生素c的一般方法包括分光光度法、电化学法、滴定法、酶、色谱等。本实验提出了一种测定维生素c的新荧光分析方法。维生素c被Cu2氧化到脱氢抗坏血酸中，并产生苯甲酸、三甲基溴化铵和荧光增敏效应，对系统荧光强度测定法对维生素c进行了定量分析。第二，维生素c实验的荧光分析，第一实验1.1主要仪器和试剂分子发光度计3360LS-55酸度计：pH-211榨汁机：CW-JE04电恒温浴缸锅：HH。SY11-Ni1 CuSO4溶液：2.010-3gm/L十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB)溶液33606.010-4g/mL苯甲酸溶液：1.010-4gm/L ml，2维生素c标准溶液：1.010-5g/ml，2 8(避光保存)；NaOH-邻苯二甲酸钾缓冲液： ph=6.0，1.2实验阶段(1)测试对象样本和空白对照25mL比色管中的0.6mLCuSO4溶液，2.0mL示甲基溴化铵溶液，2.0mL苯甲酸溶液，一定量的维生素c标准溶液，5.0mLNaOH-邻苯二甲酸缓冲液，蒸馏水正常容量，摇晃以不含维生素c溶液为空对照组。(2)水浴加热在35恒温水浴中加热30分钟，溶液流动的水冷却到室温。(3)荧光分析中，将要测试的样品放在样品架上，将这里的波长设置为308nm，发射波长为408nm，测量荧光强度F，对不含维生素c的试剂，用空卵计算F0，F测量=F-F0。2结果和讨论2.1激发光谱和发射光谱3.0mL维生素c标准溶液，根据实验方法分别在290330nm、360460nm的激发光谱和发射光谱图1，图2中所示。这里的波长为308nm，发射波长为408nm时，系统的荧光强度最大，试剂的空白荧光值相对较低，稳定，因此本实验表明，这里的波长为308nm，发射波长为408nm。1-cu2ba缓冲溶液CTMAB2-cu2ba维生素c缓冲液CTMAB，1-cu2ba缓冲液CTMAB；2-cu2ba维生素c缓冲液CTMAB，激发光谱，发射光谱。2.2试剂的添加顺序分别在添加等量试剂的情况下，测试了试剂的不同添加顺序对荧光强度的影响。试验结果表明，按照固定物时间顺序添加CuSO4溶液、苯甲酸溶液、维生素c标准溶液、邻苯二甲酸酯缓冲溶液，系统的荧光强度最高，因此该添加顺序是最佳试剂的添加顺序。2.3缓冲溶液溶液的pH值对系统的荧光强度有很大影响，试验了不同pH值对荧光强度的影响。从pH荧光强度曲线中可以看出，当pH值为5.9到6.2时，荧光强度达到最大值，并且相对稳定，因此最佳PH值为6.0。缓冲溶液的种类对系统的荧光强度也有一定的影响。PH 6.0缓冲液：NaOH-KH2PO4、KH2PO4-硼砂、KH2PO4-Na2HPO4、NaOH-邻苯二甲酸酯、Na2HPO4-柠檬酸、NaOH-柠檬酸钠、hhaoh试验结果表明，如果添加的缓冲溶液是nao-邻苯二甲酸酯，则荧光强度最大，稳定性最强。因此，本实验选择邻苯二甲酸酯作为缓冲溶液，最佳使用量为5.0毫升。2.4加热温度和加热时间测试了不同温度对系统荧光强度的影响。结果表明，加热温度为35 时，有助于在不破坏反应物和产品结构的情况下提高系统反应速度。通过改变加热时间的实验结果表明，在35的水温下加热30分钟，系统的荧光强度达到最大，相对稳定。，2.5硫酸铜和苯甲酸的其他条件保持不变，测试了硫酸铜和苯甲酸的含量对系统荧光强度的影响。结果表明，硫酸铜的使用为0.6mL，苯甲酸的使用为2.0mL时，系统的荧光强度最大。分别测试了十六烷基三甲基溴化铵(CTMAB)、十二烷基磺酸盐和-环糊精对系统荧光强度的影响。结果表明，表面活性剂对系统的荧光强度有一定的感光效果，其中CTMAB对系统的感应效果最好。进一步测试了CTMAB的使用对系统荧光强度的影响，当CTMAB的使用量为2.0mL时，系统荧光强度最大。第三，荧光分析维生素c应用，样品测定维生素c药片，研究，混合，准确地溶于0.1520g二次蒸馏水，容量为500毫升的瓶子固定容量，移至水溶液。正确移动10mL溶液，用100mL溶液稀释为样品稀释剂。测量样品稀释液，进行标准回收试验。西红柿和水果简是用这种方法测量的。取正确数量的坚果，用100毫升的溶液制成。洗干净的西红柿榨汁，得到一定量的番茄汁，然后配合100毫升的溶液。其他阶段由维生素c药片等方法决定。样品测量结果见表3表3样品测量结果(n=3)。从表3可以看出，维生素c药片、西红柿、水果珍的维生素c含量以96.7% 100.5%的准确度测定。表3样品测定结果(n=3)，荧光分析测定维生素c的优点是简便、精度、检测限度低，该方法可应用于水果、蔬菜、药物中维生素c的检测，适合推广。谢谢市政府！Theend、利用特定物质接收光时发生的荧光特性及强度对物质进行定性分析或定量分析的方法称为荧光光谱分析。这里光的波长和强度保持不变，荧光物质发生的荧光通过单色发射装置照射到探测器上，将发射单色仪调节为各种波长，由探测器测量相应的荧光强度，然后以荧光波长为横坐标，荧光强度为纵坐标，